khả năng nhân nhanh của chồi chuối tiêu nhập nội
- Mẫu: Chồi nuôi cấy được lựa chọn là những chồi phát triển tốt, không bị nhiễm, không bị dị dạng được cấy vào môi trường thí nghiệm nhân nhanh.
- Môi trường nền được sử dụng là MS bổ sung sucrose 30g/l, agar 5,7g/lít, myo inositol 100mg/l, pH = 5,8. Trong giai đoạn này tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng (BAP hoặc Kinetin, IAA) đến hệ số nhân của chồi chuối tiêu nhập nội.
Giai đoạn tái sinh chồi Giai đoạn tạo vật liệu khởi đầu Giai đoạn nhân nhanh chồi Mẫu: Chồi in vitro Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh Mẫu: Chồi in vitro Giai đoạn vườn ươm Mẫu: Cây con in vitro
Cây chuối tiêu nhập nội nuôi
- Cách tiến hành: Box cấy được vô trùng bằng tia UV trong vòng 30 phút, panh, dao, đĩa, khăn lau được hấp khử trùng và sấy khô trước khi tiến hành cấy.
Dùng panh gắp chồi chuối ra đĩa đã được đốt bằng cồn 960, dùng dao cắt bỏ ngọn tách bỏ lớp đen ở gốc. Cấy những chồi vừa thu được vào môi trường thí nghiệm, mỗi bình 6 chồi. Sau khi cấy ghi rõ ngày, tháng, công thức, lần nhắc lại và chuyển vào phòng nuôi có điều kiện phù hợp.
- Phương pháp bố trí thí nghiệm
+ Các công thức bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn với 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại 5 bình, mỗi bình 6 chồi, 90 chồi/công thức.
+ Thời gian theo dõi: Theo dõi sau 20 ngày nuôi cấy. - Các thí nghiệm tiến hành:
Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BAP đến khả năng nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội.
Công thức thí nghiệm Nồng độ BAP (mg/l)
1 (đ/c) 0,0 2 1,0 3 2,0 4 3,0 5 4,0 6 5,0
Nồng độ BAP thích hợp cho nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội ở thí nghiệm 1 (kí hiệu CT*) được sử dụng cho các thí nghiệm kết hợp tiếp theo.
Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ Kinetin đến khả
năng nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội.
Công thức thí nghiệm Nồng độ Kinetin (mg/l)
1 (đ/c) 0,0
2 0,5
3 1,0
4 1,5
Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của sự kết hợp giữa BAP và IAA
đến khả năng nhân nhanh chồi chuối tiêu nhập nội.
Công thức thí nghiệm Nồng độ (mg/l) Nồng độ IAA (mg/l) 1 (đ/c) CT* 0 2 CT* 0,1 3 CT* 0,2 4 CT* 0,3 5 CT* 0,4 6 CT* 0,5
3.4.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất kích thích sinh trưởng đến khả năng ra rễ chồi chuối tiêu nhập nội khả năng ra rễ chồi chuối tiêu nhập nội
- Mẫu: Chồi chuối được nghiên cứu trong giai đoạn nhân nhanh sinh trưởng bình thường, có chiều dài từ 3 - 4cm, có từ 4 - 5 lá được lựa chọn cấy chuyển sang giai đoạn ra rễ.
- Môi trường nền được sử dụng là MS bổ sung sucrose 30g/l, agar 5,7g/l, myo inositol 100mg/l, pH = 5,8. Trong giai đoạn này nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng (NAA và IBA) đến khả năng ra rễ của chồi chuối tiêu nhập nội.
- Cách tiến hành: Box cấy được vô trùng bằng tia UV trong vòng 30 phút, panh, dao, đĩa, khăn lau được hấp khử trùng và sấy khô trước khi tiến hành cấy.
Dùng panh gắp chồi ra đĩa đã được đốt qua cồn 960, dùng dao cắt bỏ phần đen ở gốc. Do chồi có lá dài rất dễ bị chạm xuống mặt box vì vậy khi thao tác cần cẩn thận không để bị chạm xuống mặt bàn tránh hiện tượng bị nhiễm. Sau đó cấy những chồi vừa thu được vào môi trường thí nghiệm, mỗi bình 5 chồi. Sau khi cấy ghi rõ ngày, tháng, công thức, lần nhắc lại và chuyển vào phòng nuôi có điều kiện phù hợp.
- Phương pháp bố trí thí nghiệm
+ Các công thức được bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn với 3 lần nhắc lại, mỗi lần 5 bình, mỗi bình 7 chồi, 105 chồi/công thức.
- Các thí nghiệm tiến hành
Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA đến khả năng ra rễ
chồi chuối tiêu nhập nội.
Công thức thí nghiệm Nồng độ NAA (mg/l)
1 (đ/c) 0,0 2 0,1 3 0,2 4 0,3 5 0,4 6 0,5
Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng của IBA đến khả năng ra rễ của chồi chuối tiêu nhập nội.
Công thức thí nghiệm Nồng độ IBA (mg/l)
1 (đ/c) 0,0 2 0,1 3 0,2 4 0,3 5 0,4 6 0,5