VI. ð IỀU KHIỂN SINH SẢN Ở TRÂU Bề CÁI 6.1 Gõy ủộng dục ủồng loạt
b. Cụng nghệ cấy truyền phụ
Cụng nghệ cấy truyền phụi bao gồm những cụng ủoạn sau ủõy:
- Chọn bũ cho và bũ nhận phụi
Trường ðại học Nụng nghiệp 1 - Giỏo trỡnh Chăn nuụi Trõu Bũ --- 171 Vỡ cụng nghệ cấy truyền phụi là ủể khai thỏc tối ủa những con cỏi cú tiềm năng di truyền cao, cho nờn việc chọn bũ cho phụi rất quan trọng. Bũ cỏi cho phụi phải ủược chọn từ ủàn hạt nhõn, cú nguồn gốc và lý lịch rừ ràng, cú khả năng sinh sản tốt. Cỏc chỉ tiờu sinh sản chớnh ủược quan tõm là số lượng, chất lượng phụi cũng như cường ủộ khai thỏc phụi từ con bũ ủú.
+ Chọn bũ nhận phụi
Bũ nhận phụi là những con “mang thai hộ”, cho nờn khi chọn làm con nhận phụi khụng cần căn cứ vào phẩm giống hay năng suất của bản thõn con bũ ủú. Bũ nhận phụi chỉ ảnh hưởng ủến việc tiếp nhận phụi, mang thai mà khụng ủúng gúp vào kiểu di truyền của ủời con. Vỡ vậy chỉ cần chọn những con ủạt cỏc yờu cầu sau ủõy:
• ðẻ ớt nhất 2 thỏng trước ủú (bũ cỏi ủó sinh sản) hay bũ tơ.
• ðủ trưởng thành và cơ thểủủ lớn. Do ủú cần phải biết giống và loại phụi sẽủược cấy ủể nú cú khả năng mang thai ủến lỳc ủẻ và ủẻ bỡnh thường.
• Khụng cú bệnh tật.
• Sinh trưởng, phỏt triển và sinh lý sinh sản bỡnh thường.
Trước khi ủưa vào sử dụng, bũ cho phụi và bũ nhận phụi phải ủược nuụi dưỡng và chăm súc tốt, phải theo dừi ớt nhất hai chu kỳủộng dục.
- Sản xuất phụi
+ Gõy rụng nhiều trứng
Sản xuất phụi tức là tạo ra số lượng phụi lớn nhất cú thểủược từ một con bũ cỏi trong một kỳ khai thỏc, trong một năm hay trong một ủời của nú. Muốn vậy, ta phải gõy cho nú rụng nhiều trứng thụng qua việc sử dụng một số hocmụn. Thụng thường người ta tiờm dưới da hoặc tiờm bắp PMSG hay FSH ủể tăng cường sự phỏt triển của nhiều noón bao. Sau ủú vài ngày lại tiờm LH hoặc HCG ủể làm cho những noón bao này rụng trứng. Tuy nhiờn, LH hay HCG cú thể khụng cần thiết ủối với bũ trưởng thành. Cỏc phương phỏp gõy siờu bài noón cú thể túm tắt nhưở bảng 6.2.
Bảng 6.2: Liều lượng gonadotropin ủể gõy siờu bài noón
Kớch thớch noón bao Kớch thớch rụng trứng Loại gia sỳc Ngày chu kỳ PMSG hay FSH
(IU) (mg) HCG hay LH (IU) (mg) Bũ 15-16 1500- 3000 20-50 1500-2000 75-100 Bờ - 1000- 2000 20-50 1000-1500 50-75
Phản ứng khỏc nhau của bũ ủối với gõy rụng nhiều trứng bằng FSH phụ thuộc vào cỏc yếu tố di truyền và mụi trường, ủặc biệt là chếủộ dinh dưỡng. Lịch tiờm FSH ủể gõy rụng nhiều trứng ủó ủược thống nhất là 8 lần tiờm với liều giảm dần trong thời gian 4 ngày. Cỏc lần tiờm cỏch nhau 12 giờ vào thời gian 6-8 giờ sỏng và 6-8 giờ chiều ủều cú kết quả như nhau.
Trường ðại học Nụng nghiệp 1 - Giỏo trỡnh Chăn nuụi Trõu Bũ --- 172 Gần ủõy phương phỏp gõy siờu bài noón cú sử dụng thờm prostaglandin ủó cho kết quả tốt, bởi vỡ nú cho phộp xử lý gõy siờu bài noón vào bất kỳ lỳc nào giữa ngày 6 ủến lức thể vàng tự nhiờn thoỏi hoỏ; trong khi ủú thời gian thớch hợp ủể xử lý siờu bài noón là từ ngày 8- 12 của chu kỳở bũ. Prostaglandin khụng những cho phộp ỏp dụng thời gian gõy siờu bài noón cơủộng hơn mà con làm tăng số lượng phụi bỡnh thường. Hầu hết gia sỳc xuất hiện ủộng dục 2-3 ngày sau khi tiờm prostaglandin.
+ Phối giống
Khi bũ ủó ủược xử lý gõy siờu bài noón và ủộng dục, người ta tiến hành thụ tinh nhõn tạo cho nú (sử dụng tinh của những ủực giống tốt). Nờn phối lặp lại 2-3 lần, mỗi lần cỏch nhau từ 8 ủến 10 giờ, vỡ sau khi tiờm húcmụn gõy siờu bài noón số lượng trứng sẽ rụng nhiều và kộo dài sau mỗi lần ủộng dục.
+ Thu phụi
Cú hai phương phỏp thu phụi: phương phỏp phẫu thuật và phương phỏp khụng phẫu thuật.
- Phương phỏp phẫu thuật cú ưu ủiểm là tỷ lệ thu phụi cao, nhưng khú ỏp dụng trong thực tế do tớnh phức tạp của nú. Sau mỗi lần xử lý ủũi hỏi phải chăm súc, hộ lý gia sỳc hết sức cẩn thận; bũ cỏi chậm hồi phục cơ thể hơn và ảnh hưởng ủến cường ủộ khai thỏc phụi.
- Phương phỏp thu phụi khụng phẫu thuật ủơn giản, tiện lợi, cho tỷ lệ thu phụi cao khụng thua kộm phương phỏp phẫu thuật.
Việc thu hoạch phụi ủược tiến hành vào ngày thứ 6, 7 hoặc 8 sau khi phối tinh với việc sử dụng một dụng cụ chuyờn dựng (ống thụng hai chiều) và dung dịch rửa tử cung (ủồng thời cũng là dung dịch nuụi phụi ngoài cơ thể mẹ). Dung dịch thường dựng là dung dịch PBS (Phosphate Buffered Saline).
Tử cung cú thểủược dội rửa bằng cỏch ủặt ống thụng vào thõn tử cung và dội rửa thõn tử cung và cả hai sừng tử cung cựng một lỳc. Cũng cú thểủặt ống thụng vào một sừng tử cung, dội rửa một sừng tử cung ủú, sau ủú lấy ống thụng ra và ủặt vào sừng tử cung khỏc và lặp lại kỹ thuật. Cần khoảng 500ml dung dịch dội rửa cho mỗi con cho và xoa búp dung dịch trong tử cung ủể tỏch phụi khỏi thành tử cung vào dung dịch và sau ủú dung dịch dội rửa ủược hỳt ngược trở lại vào phễu lọc. Albumin huyết thanh bũ cú thểủược bổ sung ủể giảm nguy cơ phụi bị dớnh vào cỏc dụng cụ thu phụi.
Sau khi bơm dung dịch dội rửa, tiến hành xoa búp nhẹ lờn sừng tử cung và hỳt dung dịch ra. Lặp lại như vậy khoảng 8-10 lần. Phụi ủược tỏch ra khỏi dung dịch rửa bằng việc sử dụng cỏc phin lọc phụi.
Con cho phụi thường ủược phong bế thần kinh tủy sống ủể trỏnh sự co búp của trực tràng trong lỳc thu phụi.
Sau khi thu phụi, số phụi sản xuất cú thể tăng hơn nhiều lần nếu ta ỏp dụng cụng nghệ cắt phụi, tức là tỏch phụi thành 2 hay 4 phần riờng biệt ủể từ mỗi phần này sẽ tỏi tạo thành một phụi mới. Như vậy, từ một phụi ban ủầu ta cú thể tạo ra 2 hoặc 4 phụi giống hệt nhau.
+ Kiểm tra và phõn loại phụi
Dung dịch hỳt ra nờn ủể lắng trong vũng 30 phỳt, trước khi kiểm tra và phõn loại phụi. Việc phõn loại phụi dựa vào kớch thước và hỡnh thỏi của phụi, mầu sắc của phụi, sự phõn bố,
Trường ðại học Nụng nghiệp 1 - Giỏo trỡnh Chăn nuụi Trõu Bũ --- 173 sắp xếp cỏc tế bào phụi. Tiờu chuẩn ủỏnh giỏ chất lượng phụi bũ sữa và bũ thịt ở Việt Nam ủó ủược Bộ NN và PTNT ban hành thỏng 6/2002.
- Bảo quản phụi
Nếu phụi khụng dựng ủể cấy truyền ngay sau khi thu thỡ cú thểủem bảo quản ủụng lạnh ủể sử dụng về sau. Phụi ủược ủúng vào cọng rạ trước khi ủem cấy hoặc bảo quản lạnh. Với trường hợp bảo quản ủụng lạnh, nhiệt ủộủược hạ từ từ trong thiết bị tựủộng cho tới -30°C. Sau ủú phụi ủược bảo quản trực tiếp trong nitơ lỏng (-196°C) trong nhiều năm. Glycerol 10% (1,4M) và Ethylene Glycol (EG) 1,5M thường ủược dựng làm chất bảo vệ lạnh.
- Giải ủụng phụi
Trước khi cấy truyền, phụi bảo quản ủụng lạnh phải ủược giải ủụng. Giải ủụng cũng phải ủược thực hiện ở nhiệt ủộ 20-300C. Tuy nhiờn, khi khụng thể giải ủụng ủược ở nhiệt ủộ ủú thỡ phải pha loóng chất bảo vệ lạnh càng nhanh khi nhiệt ủộ càng cao. Lấy cọng rạ ra khỏi ni tơ lỏng, giữ 10 giõy và sau ủú ở 300C trong 15-20 giõy. Sau khi giải ủụng ủưa phụi vào cọng rạủể cấy truyền.
- Cấy truyền phụi
+ Gõy ủộng dục ủồng pha
Phụi cần ủược cấy cho con nhận cú thời gian ủộng dục càng gần với thời gian ủộng dục của bũ cho phụi càng tốt. Gõy ủộng dục ủồng pha nhằm tạo ra ủược nhiều bũ nhận phụi cú thời gian ủộng dục ủồng thời với bũ cho phụi (nếu cấy phụi tươi) hoặc phự hợp với tuổi phụi (nếu cấy phụi ủụng lạnh). Mức ủộủộng dục ủồng pha (hay phự hợp với tuổi phụi) ảnh hưởng rất lớn lờn tỷ lệủậu thai sau khi phụi ủược cấy truyền. Tuy nhiờn, mức lệch pha ±24 giờ cũng cú thể chấp nhận ủược.
ðể gõy ủộng dục ủồng pha, người ta cú thể sử dụng PMSG, PGF2α, progesteron v.v. Những húc-mụn này ủược dựng riờng lẻ hoặc kết hợp với cỏc liều lượng và phỏc ủồ khỏc nhau tương tự như kỹ thuật gõy ủộng dục ủồng loạt ủó ủược trỡnh bày ở phần trước.
+ Kỹ thuật cấy phụi
Con nhận cần phải ủược sờ khỏm trước khi cấy phụi ủể kiểm tra xem nú cú thể vàng hoạt ủộng tốt khụng. Phụi cú thể ủược cấy bằng phương phỏp phẫu thuật hay khụng phẫu thuật.
Cấy phụi khụng phẫu thuật về cơ bản giống kỹ thuật thụ tinh nhõn tạo, chỉ khỏc ở vị trớ cấy và vị trớ bơm tinh: phụi ủược cấy vào 1/3 phớa trờn sừng tử cung, cũn tinh ủược bơm vào thõn tử cung. Phụi ủược ủưa vào cọng rạ 0,25ml và ủặt vào ủầu sừng tử cung tương ứng với phớa buồng trứng cú thể vàng hoạt ủộng. Phong bế thần kinh tuỷ sống thường ủược sử dụng trong cấy phụi khụng phẫu thuật ủể loại bỏ co búp trực tràng và do ủú cho phộp ủặt phụi chớnh xỏc hơn và ớt gõy tổn thương hơn.
Cấy phụi phẫu thuật ủược thực hiện thụng qua vết cắt tương ứng với phớa buồng trứng cú thể vàng chức năng. Phụi ủược cấy bằng ống thụng nhỏ vào ủầu sừng tử cung cựng phớa. Vết cắt ủược gõy mờ cục bộ trong lỳc phẫu thuật. Cấy phụi bằng phẫu thuật nhỡn chung ủược thực hiện khi rất khú ủưa phụi qua cổ tử cung và kỹ thuật này cho phộp cấy phụi chớnh xỏc hơn và gõy ớt tổn thương sừng tử cung. Vỡ thế cấy phụi cú phẩu thuật cú thể cho phộp sử dụng thành cụng nhiều con nhận hơn và núi chung tỷ lệ cú chửa cao hơn. Tuy nhiờn, kỹ thuật này ủũi hỏi tốn nhiều thời gian.
Trường ðại học Nụng nghiệp 1 - Giỏo trỡnh Chăn nuụi Trõu Bũ --- 174 CÂU HỎI ễN TẬP:
1. ðặc ủiểm giải phẩu một số bộ phận quan trọng của cơ quan sinh dục trõu bũ cỏi? 2. ðặc ủiểm của cỏc giai ủoạn của chu kỳủộng dục?
3. Cơ chếủiều hoà thần kinh-thể dịch ủối với hoạt ủộng chu kỳ tớnh? 4. Những ủặc ủiểm chớnh về sự phỏt triển của thai và bũ mẹ mang thai? 5. Trỡnh bày cỏc phương phỏp chẩn ủoỏn cú thai ở bũ.
6. Nờu hiện tượng bũ sắp ủẻ và diễn biến quỏ trỡnh ủẻở bũ. 7. Cỏc quỏ trỡnh hồi phục sinh dục của trõu bũ mẹ sau khi ủẻ? 8. Yờu cầu kỹ thuật nuụi dưỡng bũ cỏi sinh sản?
9. Cỏc biện phỏp chăm súc bũ cỏi mang thai, hộ lý bũ trước, trong và sau khi ủẻ? 10.Phõn tớch cỏc chỉ tiờu ủỏnh giỏ khả năng sinh sản của trõu bũ cỏi.
11.Phõn tớch cỏc nhõn tốảnh hưởng tới khả năng sinh sản của trõu bũ cỏi.
12.Phương phỏp phỏt hiện ủộng dục và xỏc ủịnh thời gian phối giống thớch hợp cho bũ cỏi?
13.Mục tiờu và cỏc kỹ thuật gõy ủộng dục ủồng loạt cho bũ cỏi bằng húc-mụn? 14.Trỡnh bày cỏc kỹ thuật kớch thớch ủộng dục cho bũ trõu cỏi.