5. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn
2.2.7. Phương pháp pha môi trường đệm PBS (Phosphate buffered saline)
Môi trƣờng đệm cần sử dụng trong đề tài bao gồm 3 môi trƣờng với pH lần lƣợt nhƣ sau: pH = 2, pH = 12.
Bảng 2.3. Môi trƣờng đệm PBS với pH tƣơng ứng là 2 và 12
Hóa chất Cách pha
Thành phần Khối lƣợng Sử dụng 2 cốc đong đánh số 1; 2, cho vào mỗi cốc đong lƣợng hóa chất nhƣ bên. Thêm đến mức 800ml bằng nƣớc cất 2 lần vào 2 cốc. Điều chỉnh pH ở 2 cốc 1; 2 tƣơng ứng tới 2; 12 bằng HCl và NaOH. Bổ sung nƣớc cất tới 1000ml. Khử trùng. NaCl 0.8g KCl 0.2g Na2HPO4.12H2O 1.44g Na2HPO4 0.22g
2.5.8. Phương pháp xác định lượng thuốc giải phóng thông qua hệ thống được thiết kế
Khảo sát lƣợng thuốc đƣợc gải phóng qua màng CVK có độ dày 0.3cm và 0.7cm.
Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 150 vòng/phút, nhiệt độ 37 ± 0.5ºC.
Môi trƣờng khảo sát: Tiến hành ở các môi trƣờng đệm PBS (Phosphate buffered saline) với pH = 2, pH = 12.
Cách tiến hành:
- Lấy các màng CVK đã đƣợc hấp thụ thuốc berberin với độ dày 0.3cm và 0.7cm vào các bình chứa 100ml môi trƣờng đệm PBS có pH = 2, pH = 12.
- Sau khoảng 0.5 giờ, 1 giờ, 2 giờ, 4 giờ, 6 giờ, 8 giờ, 12 giờ, 24 giờ lấy mấu và tiến hành đo mật đọ quang phổ của mẫu từ đó tính đƣợc tỷ lệ thuốc giải phóng khỏi màng CVK.
- Số lƣợng mẫu đƣợc rút ra sau mỗi khoảng thời gian là 7ml và đƣợc bổ sung lại 7ml dung dịch đệm tƣơng ứng.
- Tất cả các thí nghiệm động lực học đƣợc thực hiện 3 lần và tính toán để lấy giá trị trung bình. Tỷ lệ giải phóng đƣợc tính theo công thức [24]:
∑
× 100% (4)
Trong đó:
R: Tỷ lệ thuốc giải phóng;
Ct: Nồng độ của berberin trong dung dịch tại thời điểm t;
V1: Thể tích của dung dịch đệm tại các giá trị pH khác nhau (100ml); n: Số lƣợng mẫu lấy ra từ dung dịch giải phóng;
V2: Lƣợng dung dịch đệm thêm vào (7ml); m: khối lƣợng thuốc trong màng ban đầu.