Hoàn toàn có thể nhân sinh khối tế bào sâu khoang với điều kiện thích hợp trên môi trường Ex-Cell 420-14491C có bổ sung 25% FBS ở pH 6,8 và nhiệt

Một phần của tài liệu Phát triển sinh khối vi rút nhân đa diện (NPV) trên tế bào sâu khoang phục vụ sản xuất thuốc trừ sâu sinh học tt (Trang 26)

hợp trên môi trường Ex-Cell 420-14491C có bổ sung 25% FBS ở pH 6,8 và nhiệt

độ 280C. Nhân nuôi tế bào ở điều kiện thích hợp, mật độ tế bào có thể đạt từ 4,025-

5,750 x 1010 tế bào/ml ở thời điểm 6 ngày sau nhân. Phát triển sinh khối tế bào sâu

khoang với lượng 150ml môi trường Excell 420-14419C trên bình 250ml theo phương pháp lắc đạt mật độ 4,580- 4,879 x 1010 tế bào/ml, với lượng 750ml trên bình 1 lít theo phương pháp lắc đạt 4,08 x 1010 tế bào/ml.

1.3. Xác định được điều kiện thích hợp lây nhiễm phát triển sinh khối NPV

trên tế bào nuôi nhân khi mật độ tế bào 1,0 x 108 tế bào/ml theo chỉ số MOI là 0,1, thời gian ủ lây nhiễm trong 3 ngày trên môi trường Excell 14420-14491C có pH = 7,0 và nhiệt độ 280C. Lây nhiễm NPV trên tế bào có mật độ 1,0 x 108 tế bào/ml theo chỉ số

MOI 0,1 đạt 1,58 x 108 OB/ml hình thành sau 3 ngày (mức độ tăng 158 lần so với ban

đầu). Hiệu lực gây chết sâu khoang của NPV tạo ra trên tế bào đạt 76,27% và thể vùi hình thành tới 241,1 OB/sâu.

1.4. Tinh sạch thể vùi NPV sâu khoang bằng phương pháp ly tâm 3 lần (2 lần

nước cất xen kẽ 1 lần SDS) lắc với tốc độ 1500 vòng/phút trong thời gian 5 phút/lần, số lượng thể vùi thu được 2,71 x 108 OB/ml với tỷ lệ thu hồi đến 96,79%.

1.5. Bước đầu tạo được 2 chế phẩm dạng bột thấm nước NPV-1 WP và NPV-2

WP chứa 2x 109 OB/gam với phụ gia gồm 60% bột tan và 40% kaolin. Ngoài đồng ruộng, sử dụng 500 gam/ha chế phẩm NPV-1 WP, hiệu quả trừ sâu khoang trên bắp cải đạt 80,51%, NPV-2 WP đạt 82,29%, sử dụng NPV-1 WP trên đậu tương đạt 91,15%.

Một phần của tài liệu Phát triển sinh khối vi rút nhân đa diện (NPV) trên tế bào sâu khoang phục vụ sản xuất thuốc trừ sâu sinh học tt (Trang 26)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(27 trang)