II. Trở ngại chính:
BÀI THỰC HÀNH SỐ 5: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG E.coli BẰNG PHƯƠNG PHÁP
TÍCH ĐỊNH LƯỢNG E.coli BẰNG PHƯƠNG PHÁP MÀNG LỌC – ĐO NHANH 5 THÔNG SỐ.
A. Thí nghiệm 1 – Phương pháp định lượng E.coli bằng phương pháp màng lọc :
I. Nguyên tắc :
Dựa vào nồng độ vi trùng coli trong một khối lượng nước nhất định mọc thành khuẩn lạc trên màng lọc được dặt nuôi cấy trên thạch Enol ở 370C 0,50C trong 24h . Điếm khuẩn lạc có ánh kim và tổng số coli phân.
II. Thí nghiệm : 1. Dụng cụ : 3 ống nghiệm được khử trùng. 1 đèn cồn. 1 cốc thủy tinh 250 ml. 1 ống đong. 1 pipet 10 ml. 1 pipet 1 ml. 1 thau nhựa. 1 khay đựng ống nghiệm. 1 bóp cao su. 2. Hóa chất : Nước cất vô trùng.
Mẫu nước thải.
Thạch.
Cồn khử trùng nơi thí nghiệm.
3. Cách tiến hành :
Dùng cồn khử trùng nơi thí nghiệm và tay.
Đốt đèn cồn để khử trùng dụng cụ.
Tiến hành tráng pipet bằng nước cất vô trùng. Sau đó, ta dùng pipet 10 ml hút 9 ml nước cất vô trùng cho vào ống nghiệm 1 + 1 ml nước thải. Lắc đều và pha loãng 10 lần.
Tiếp tục dùng pipet 10 ml hút 9 ml nước cất vô trùng cho vào ống nghiệm 2 + 1 ml nước thải pha loãng có trong ống nghiệm 1. Lắc đều và pha loãng 100 lần.
Kế đến, ta tiếp tục sử dụng pipet 10 ml hút 9 ml nước cất vô trùng vào ống nghiệm 3 + 1 ml nước thải pha loãng trong ống nghiệm 2. Lắc đều và pha loãng 1000 lần.
Sau khi pha loãng 1000 lần mang mẫu lại máy lọc để lọc mẫu.
Lọc xong để mẫu lên thạch trong khay rồi đem đi ủ với nhiệt độ là 350C trong khoảng thời gian từ 22h – 24h. Sau 24h lấy khay ra đếm.
Kết quả : có 145 khuẩn lạc.
Công thức tính chỉ số Coli với phương pháp màng lọc :
Coli – index = = = 145
Trong đó :