L ỜI MỞ ĐẦU
2.3.2 Cô lập và tinh chế các hợp chất
Trong khóa luận này, chúng tôi chỉ tiến hành khảo sát cao etyl acetate.
Đầu tiên, cao etyl acetate (30g) được SKC silica gel pha thường với dung môi rửa giải là ete dầu, EtOAc và hỗn hợp của chúng ( với độ phân cực tăng dần từ 0- 100%), các phân đoạn giống nhau trên SKLM được gom thành 7 phân đoạn và mã hóa thành A1-17. Kết quả được tóm tắt trong bảng 2.1.
Bảng 2.1 Kết quả sắc kí cột cao EtOAc
Phân đoạn Tên mã hóa Khối lượng (g) Kết quả SKLM Ghi chú
1 A1 3.55g Nhiều vết Không khảo sát
2 A2 8,81g Nhiều vết Không khảo sát
3 A3 2,34g Nhiều vết Không khảo sát
4 A4 3,05g Nhiều vết Không khảo sát
5 A5 2,55g Nhiều vết Không khảo sát
6 A6 3,36g Rõ vết Khảo sát
7 A7 1,58g Nhiều vết Không khảo sát
Khảo sát phân đoạn A7 (3,36g).
Cao phân đoạn A11 có màu đen, dạng dầu; tan tốt trong MeOH nên ta tiến hành SKC sephadex LH 20 nhiều lần với dung môi MeOH . Mẫu tách tốt với hạt sephadex LH 20. Trên cột mẫu tách thành ba lớp, các phân đoạn giống nhau trên SKLM được gom chung lại thành 4 phân đoạn ( A11.1-A11.4). Kết quả được tóm tắt trong bảng 2.2.
Bảng 2.2 Kết quả SKC trên phân đoạn A11
Phân đoạn Tên mã hóa Khối lượng (mg)
Kết quả SKLM Ghi chú
1 A6.1 977mg Nhiều vết Không khảo sát
2 A6.2 989mg Rõ vết Khảo sát
3 A6.3 650mg Nhiều vết Không khảo sát
4 A6.4 500mg Rõ vết Khảo sát
Khảo sát phân đoạn A6.4.
Phân đoạn A6.4 tiếp tục được SKC sephadex LH 20 với dung môi MeOH thu được hợp chất kí hiệu AGAΙ (m=200mg)
Khảo sát phân đoạn A6.2
Phân đoạn được SKC silica gel pha thường với hệ dung môi CHCl3:MeOH ( tỉ lệ 100% CHCl3 , 100:1 , 80:1, 70:1, 50:1 và 100% MeOH) thu được 3 phân đoạn (A6.2.1-3).
Phân đoạn A6.2.2 được SKC silicagel pha thường với hệ dung môi H:Ac (tỉ lệ 25:1, 15:1, 10:1,7:1) thu được 2 phân đoạn A6.2.2.1 và A6.2.2.2.
Phân đoạn A6.2.2.2 được SKC silica gel pha đảo với hệ dung môi MeOH: H2O ( với độ phân cực giảm dần từ 50% MeOH đến 100% MeOH ) sau đó giải ly SKLM thu được hợp chất AGAΙΙ (m=70 mg).