N: Số tinh trùng đếm được.
b. Xác định tỷ lệ tinh trùng sống
Có thể đánh giá tỷ lệ sống của tinh trùng bằng cách nhuộm tinh trùng (đang còn sống) trong thuốc nhuộm. Khi nhuộm, nếu tinh trùng còn sống thì đầu tinh trùng không bắt màu, ngược lại,nếu tinh trùng hết thì đầu tinh trùng bắt màu hồng.
+Phương pháp nhuộm bằng thuốc nhuộm Eosin 0,5%
Trộn một giọt tinh trùng tươi với một giọt dung dịch Eosin 1% lên một phiến kính, phủ lamell lên, tiến hành kiểm tra sau 30 giây ở kính hiển vi (vật kính 40). Quan sát kết quả: Tinh trùng sống không nhuộm màu. Tinh trùng chết nhuộm màu đỏ hồng.
+Phương pháp nhuộm bằng hỗn hợp Eosin-nigrosin 1. Trộn một giọt tinh trùng với hai giọt Eosin 1%.
2. Sau 30 giây, thêm ba giọt Nigrosin 10% và trộn (30 giây).
3. Đặt một giọt mẫu lên một phiến kính và trải ra lớp mỏng. Để mẫu khô, kiểm tra dưới kính 10-40. Quan sát kết quả: Tinh trùng sống có màu trắng. kiểm tra dưới kính 10-40. Quan sát kết quả: Tinh trùng sống có màu trắng. Tinh trùng chết nhuộm màu đỏ.
Đặt mẫu lên kính hiển vi (x 10), kiểm tra tổng số 100 tinh trùng trong đó tính số lượng tinh trùng sống (không bắt màu) và suy ra tỷ lệ phần trăm. Nếu tinh trùng sống đạt 80% trở lên, chứng tỏ tinh dịch tốt, sử dụng đạt hiệu quả cao. (2) (1) (1) (1) (2) Giọt mẫu
giảng TH CNSHĐV
Hình 7.10: Cách kéo tiêu bản
Hình 7.11: Tinh trùng chết bắt màu.
IV. YÊU CẦU
1. Thu nhận số trứng từ buồng trứng vào 3 epperdorf khác nhau, theo 3 loại A,B,C. Ghi nhận ngày, tháng thu nhận. A,B,C. Ghi nhận ngày, tháng thu nhận.
2. Xác định nồng độ tinh trùng, đếm hai lần trong phòng đếm. 3. Xác định phần trăm tinh trùng sống từ tiêu bản nhuộm. 3. Xác định phần trăm tinh trùng sống từ tiêu bản nhuộm.