trong canh trường nuôi vi khuẩn.
* Phương pháp xác định hoạt tính ức chế α-glucosidase: α-glucosidase:
Phương pháp nhuộm bào tử
* Nguyên tắc:
Sự bắt màu thuốc nhuộm của tế bào vi sinh vật là một quá trình hấp phụ. Phần lớn vi sinh vật bắt màu bền vững. Thuốc nhuộm thường dùng là các chất Phần lớn vi sinh vật bắt màu bền vững. Thuốc nhuộm thường dùng là các chất aminlin (chủ yếu là loại kiềm hoặc trung tính). Vì thành phần tế bào của mỗi vi sinh vật khác nhau nên khả năng bắt màu cũng rất khác nhau.
* Cách tiến hành:
Trước khi nhuộm bào tử, tiến hành sốc nhiệt (70oC trong 10 phút) hoặc để lạnh trong tủ lạnh 2oC trong 2 ngày, nhằm kích thích vi khuẩn tạo bào tử. Sau lạnh trong tủ lạnh 2oC trong 2 ngày, nhằm kích thích vi khuẩn tạo bào tử. Sau đó tiến hành làm tiêu bản để nhuộm bào tử.
Làm vết bôi và cố định vết bôi bằng cách hơ trên ngọn lửa đèn cồn.
Nhuộm xanh metylen theo loffler: Nhỏ 1 giọt xanh metylen, hơ nóng đến sôi nhẹ và giữ như vậy trong 15 − 20 giây. sôi nhẹ và giữ như vậy trong 15 − 20 giây.
Rửa bằng nước cất, nhuộm lại bằng fucshin giữ khoảng 30 giây. Sau đó rửa bằng nước cất, hơ khô. Nhỏ 1 giọt dầu soi rồi quan sát dưới vật kính dầu rửa bằng nước cất, hơ khô. Nhỏ 1 giọt dầu soi rồi quan sát dưới vật kính dầu 100X.
Phương pháp nhuộm Gram
* Cách tiến hành:
Làm vết bôi và cố định vết bôi bằng cách hơ trên ngọn lửa đèn cồn. cồn.
Nhỏ 1 giọt tím gential lên trên vết bôi, giữ trong khoảng 1 − 2 phút, rửa bằng nước cất, thấm khô. phút, rửa bằng nước cất, thấm khô.
Nhỏ dung dịch lugol lên trên vết bôi, giữ trong 1 phút rồi rửa cồn, thấm khô (hơ nhẹ trên ngọn lửa đèn cồn). cồn, thấm khô (hơ nhẹ trên ngọn lửa đèn cồn).
Nhỏ 1 giọt fucshin lên vết bôi, giữ trong 12 phút. Sau đó rửa nước, thấm khô. nước, thấm khô.
Nhỏ 1 giọt dầu soi rồi quan sát dưới vật kính dầu 100X.
Kết quả: vi khuẩn Gram (+) bắt tím, vi khuẩn Gram (−) bắt màu hồng. hồng.
IC50: The half maximal inhibitory concentrationDNJ : 1-deoxynojrimycin DNJ : 1-deoxynojrimycin