MIE)
1- Nguyên tắc chế tạo pha rắn
Để chế tạo pha rắn in dấu phân tử, người ta thêm chất phân tích hoặc các hình mẫu của nĩ cĩ cấu trúc tương tự chất phân tích vào nguyên liệu.
Các chất này sẽ tạo ra các vị trí cĩ dấu phân tử trong pha rắn.
Sau khi loại các chất này ra khỏi pha rắn, các vị trí này sẽ liên kết chọn lọc với chất phân tích.
2- Ứng dụng
Chế tạo một số pha rắn in dấu phân tử cho các chất:
Dược chất: diazepam, morphin, propanolon, theophylin.
Thuốc trừ sâu: diazinon.
Chất diệt cỏ: simazin, atrazin.
Khi chiết MIE cĩ liên kết chọn lọc tương tự liên kết kháng nguyên – kháng thể về hình thức nhưng thực tế khác nhau:
Pha rắn này được tái tạo và tái sử dụng được.
Độ ổn định cao hơn, dùng nhiều lần.
Dùng ở nhiệt độ cao, trong dung mơi khan và khoảng pH rất rộng.
Hĩa phân tích 2 Trần Trung Trực 28 I IIIII- - MMỤỤCC LỤLỤCC I-CÁC PHƯƠNG PHÁP TÁCH ... 1 A. ĐỊNH NGHĨA-PHÂN LOẠI ... 1 1- Định nghĩa ... 1 2- Phân loại ... 1
a. Cơ chế tách dựa vào... 1
b. Phương pháp tách ... 1
-i- Kích thước ... 1
-ii- Khối lượng và mật độ ... 1
-iii- Biến đổi trạng thái ... 1
mợt) Vật lý ... 1
hai) Hĩa học ... 1
-iv- Tỉ lệ giữa các pha ... 1
B. QUÁ TRÌNH TÁCH DỰA VÀO KÍCH THƯỚC ... 2
1- Phương pháp lọc (filtration)... 2
a. Chất liệu dùng để lọc ... 2
-i- Khái niệm ... 2
-ii- Các vật liệu lọc ... 2
mợt) Chất vơ cơ ... 2
hai) Chất hữu cơ ... 2
b. Các kỹ thuật lọc ... 2
-i- Lọc ở áp suất thường ... 2
-ii- Lọc ở áp suất giảm (lọc chân khơng) ... 2
2- Phương pháp thẩm phân (dialysis) ... 3
3- Phương pháp sắc ký rây phân tử - sắc ký thẩm thấu gel (size-exclusion chromatography) ... 3
C. PHƯƠNG PHÁP LY TÂM - QUÁ TRÌNH TÁCH DỰA VÀO KHỐI LƯỢNG VÀ TỶ TRỌNG (CENTRIFUGATION) 3 D. QUÁ TRÌNH TÁCH DỰA VÀO BIẾN ĐỔI TRẠNG THÁI ... 4
1- Trạng thái vật lý ... 4
a. Phương pháp cất ... 4
b. Phương pháp thăng hoa ... 4
c. Phương pháp kết tinh lại ... 5
2- Trạng thái hĩa học ... 5
E. QUÁ TRÌNH TÁCH DỰA VÀO TỶ LỆ GIỮA CÁC PHA ... 5
1- Các phương pháp chiết (extraction) ... 5
Hĩa phân tích 2 Trần Trung Trực 29
II-CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT ... 6
A. CHIẾT LỎNG-LỎNG ... 6
1- Một số thơng số sử dụng trong chiết lỏng-lỏng ... 6
a. Hệ số phân bố K... 6
b. Hệ số phân bố biểu kiến KD – hệ số phân chia D ... 8
c. Hiệu suất chiết – độ chiết – hệ số chiết ... 9
2- Các phương pháp chiết lỏng-lỏng ... 9 a. Chiết đơn: ... 9 b. Chiết lặp ... 9 c. Chiết ngược dịng... 10 -i- Nguyên tắc ... 10 -ii- Mục tiêu ... 10
-iii- Phân loại ... 10
mợt) Chiết gián đoạn qua nhiều bước ... 10
hai) Chiết liên tục qua nhiều bước ...12
3- Ứng dụng của chiết lỏng-lỏng ... 15
a. Chiết bằng dung mơi hữu cơ ... 15
b. Chiết với Chelator kim loại ... 15
c. Chiết với cặp ion ... 16
-i- Các IPA thường dùng ... 17
mợt) Các acid mạnh ... 17
hai) Các hợp chất sulfonic ... 17
ba) Các ammonium ... 17
-ii- Các ứng dụng trong kiểm nghiệm ... 17
mợt) Chiết và đo quang ... 17
hai) Chuẩn tạo cặp ion ... 17
B. CHIẾT PHA RẮN – SOLID PHASE EXTRACTION, SPE ... 18
1- Các loại pha rắn ... 18
a. Pha liên kết ... 18
Hĩa phân tích 2 Trần Trung Trực 30
2- Cơ chế lưu giữ, rửa giải ... 19
a. Pha thuận ... 19
(normal phase SPE) ... 19
b. Pha đảo ... 19
(reversed phase SPE) ... 19
c. Trao đổi ion ... 19
(Exchange SPE) ... 19
3- Thực hành chiết pha rắn ... 20
a. Chọn pha rắn... 20
b. Quy trình chiết ... 20
-i- Bốn bước của quy trình chiết ... 20
mợt) Hoạt hĩa cột ... 20
hai) Nạp mẫu ... 20
ba) Loại tạp ... 20
bớn) Rửa giải ... 20
-ii- Một số vấn đề cần nghiên cứu trong quy trình chiết ... 20
-iii- Ví dụ ...21
4- Ứng dụng của SPE ... 22
5- Kỹ thuật vi chiêt pha rắn (solid phase microextraction – SPME) ... 24
a. Nguyên tắc ... 24
b. Thiết bị SPME ... 25
c. Thực hành chiết SPME ... 25
C. CHIẾT MÀNG LỎNG (LIQUID MEMBRANE EXTRACTION)... 26
1- Nguyên tắc và ứng dụng ... 26
a. Chiết màng lỏng 3 pha - Phương pháp chiết hỗ trợ màng lỏng ... 26
(nước/dung mơi hữu cơ/nước) ... 26
b. Chiết màng lỏng 2 pha - Phương pháp chiết màng vi xốp lỏng-lỏng ... 26
(nước/dung mơi hữu cơ) ... 26
Nguyên tắc ... 26
Ứng dụng ... 26
2- Ví dụ chiết màng lỏng 3 pha ... 26
D. CHIẾT PHA RẮN IN DẤU PHÂN TỬ (MOLECULARLY IMPRINTED EXTRACTION – MIE) ... 27
1- Nguyên tắc chế tạo pha rắn ... 27
2- Ứng dụng ... 27