2. Thực nghiệm vă kết quả
2.3.3. Chuẩn bị mẫu thử
Chúng tôi thử trín hai dịch chiết lă dịch chiết Methanol vă dịch chiết nước.
- Dịch chiết Methanol: Tiến hănh chiết Soxhlet toăn cđy dược liệu trong 6 - 8 giờ với dung môi lă Methanol, lấy dịch chiết ra vă cất thu hồi dung môi đựơc cao đặc. Hoă cao đặc văo nước nóng theo tỉ lệ 1:1 (lg dược liệu chiết được lml dịch chiết nước); 1:2; 1:4.
- Dịch chiết nước: Tiến hănh sắc toăn cđy dược liệu trong 4 - 6 giờ, lăm 3 lần với dung môi lă nước. Gộp dịch sắc cô còn lại tỉ lệ 1:1 (lg dược liệu chiết được lml dịch chiết nước); 1:2; 1:4.
2.3.4. Tiến hănh
Cấy vi khuẩn vă nấm từ ống giống sang môi trường thạch dinh dưỡng có bề mặt thạch nghiíng. Để ở nhiệt độ 37°c trong 24 giờ.
Cấy câc vi sinh vật văo môi trường canh thang sao cho nồng độ tế băo vi sinh vật lă 108 tế băo trín lml. Để trong tủ ấm 37°c trong 24 giờ.
* Tiến hănh thử:
Đun chảy thạch, để nguội tới nhiệt độ 45°C- 50°c đối với câc chủng không có nha băo ( BP, ST, EC, CAN) vă nhiệt độ 60°C- 70°c đối với chủng có nha băo (BS, BC). Cho lml huyền dịch vi khuẩn (nấm) nồng độ 108 tế băo trín lml ở trín văo bình 100ml môi trường thạch dinh dưỡng (môi trường Sabauraud). Đổ thạch ra câc đĩa Petri. Khi thạch nguội tiến hănh đục lỗ (lỗ thạch đường kính 0,8cm). Nhỏ dịch chiết văo câc lỗ thạch theo sơ đồ có sẵn. Để ở nhiệt độ thường 30 - 60 phút. Sau đó để trong tủ ấm 37°c. Sau 1 8 - 2 4 giờ, đo đường kính vòng vô khuẩn. Kết quả được tóm tắt trong bảng 5:
Bảng 5: Kết quả thử tâc dụng khâng khuẩn, khâng nấm của câc dịch chiết từ
Ghi chú: (-): Không có tâc dụng
N 1: Dịch chiết nước tỉ lệ (1:1) M l: Dịch chiết Methanol tỉ lệ (1:1)
N2: Dịch chiết nước tỉ lệ (1:2) M2: Dịch chiết Methanol tỉ lệ (1:2)
N3: Dịch chiết nước tỉ lệ (1:4) M l: Dịch chiết Methanol tỉ lệ (1:4)
Nhận Xĩt: Dịch chiết nước của toăn cđy Polycarpaea corymbosa (L.)
có tâc dụng khâng khuẩn trín một số vi khuẩn Gram (+): Bacillus ceraus,
Bacillus pumillus có tâc dụng ở nồng độ 1:1. Không có tâc dụng đối với vi khuẩn Gram (-) vă nấm.
Dịch chiết Methanol của toăn cđy Polycarpaea corymbosa (L.) có tâc
dụng tốt trín vi khuẩn Gram (+), không có tâc dụng trín vi khuẩn Gram (-) vă nấm.
Với tỉ lệ 1:1 có tâc dụng trín cả bốn chủng vi khuẩn Gram (+) lă:
Bacillus subtilis, Bacillus pumillus, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus.
Với tỉ lệ 1:2 có tâc dụng trín câc chủng Gram (+) lă: Bacillus pumilus,
Phần 3 : KẾT LUẬN VĂ ĐỂ XƯĐT
1. Kết luận:
❖ Chúng tôi đê tiến hănh thu mẫu, mô tả đặc điểm thực vật cđy Săi hồ
BT mọc ở vùng bờ biển Nam trung bộ. Xâc định được tín khoa hoc của
cđy năy lă: Polycarpaea corymbosa (L.) Lamk. Họ Cẩm chướng: Caryophyllaceae
♦> Tiến hănh nghiín cứu đặc điểm thực vật của cđy năy bao gồm :
> Mô tả đặc điểm vi phẫu của rễ vă thđn.
> Mô tả đặc điểm của bột rễ, bột cănh mang lâ, bột hoa.
❖ Định tính trong rễ vă cănh mang lâ Săi hồ BT có flavonoid, saponin, tanin, đường khử, chất bĩo, caroten.
♦> Tiến hănh định tính flavonoid trong rễ vă cănh mang lâ bằng sắc ký lớp mỏng. Thấy hệ dung môi Toluen : Ethyl acetat: Acid formic (5:6:1). * Kết quả:
> Mẫu rễ có 3 vết với Rf lần lượt lă: 0,30; 0,44; 0,54.
> Mẫu cănh mang lâ có 6 vết với Rf lần lươt lă: 0,24; 0,31;
0,43 ;0,48 ; 0,54; 0,82.
♦> Xâc định được hăm lượng câc chất vi lưọng trong cđy lă: Mg«0,05%; Al«0,25%; Ca«0,10%; Si»0,50%; Cr«0,0025%; Cu*0,0005%;
Zn* 0,015; Ti«0,0005%; Mn»0,05%.
♦> Tiến hănh thử tâc dụng khâng khuẩn của dịch chiết Methanol vă dịch chiết nước của cđy Săi hồ BT kết quả nhận thấy:
> Dịch chiết nước tỉ lệ 1:lcó tâc dụng với BC, BP.
> Dịch chiết Methanol tỉ lệ 1:2 có tâc dụng lín BP, BC.
> Dịch chiết Methanol tỉ lệ 1:1 có tâc dụng lín BP, BC, BS, ST.
2. Đí xuất:
Do thời gian có hạn nín chúng tôi chưa nghiín cứu sđu được về hoâ học vă tâc dụng dược lý. Chúng tôi thấy rằng cần tiếp tục nghiín cứu sđu hơn về hoâ học vă chiết, tâch, phđn lập vă xâc định cấu trúc câc thănh phần hoâ học trong câc bộ phận của cđy. Thử câc tâc dụng dược lý khâc của cđy năy. Để xâc định cđy năy có thể sử dụng lăm thuốc được không vă có những tâc dụng như thế năo đối với động vật thí nghiệm vă vă cơ thể con người.
TĂI LIỆU THAM KHẢO I.Tăi liệu tiếng Việt
1. Bộ môn Dược Liệu-Trường đại học Dược Hă Nội (1998), Băi giảng
Dược liíụ.
2. Bộ môn Dược Liệu-Trường đại học Dược Hă Nội (1999), Thực tập Dược liệu - phần hoâ học.
3. Bộ môn Thực vật - Trường đại học Dược Hă Nội (1991), Băi giảng thực
vật học, NXB Y học.
4. Võ Văn Chi (1999), Cđy cỏ có ích ở Việt Nam, NXB Y học, tr 338-339. 5. Võ Văn Chi, Vũ Văn Chuyín, Phan Nguyín Hồng, (1969), Cđy cỏ
thường thấy ỏ Việt Nam, NXB Khoa học, tập 1, tr 293- 294.
6. Võ Văn Chi (1997), Từ điển cđy thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 346, 694-
695, 1015-1016.
7. Nguyễn Văn Đăn, Nguyễn Viết Tựu, (1985), Phương phâp nghiín cứu
hoâ học cđy thuốc, NXB Y học , tập 1.
8. Phạm Hoăng Hộ (1999), Cđy cỏ Việt Nam, NXB Trẻ, Quyển 1, tr 739 số
2961, Quyển 3 tr 264 số 8756, 8757.
9. Đỗ Tất Lợi ( 1986), Những cđy thuốc vă vị thuốc Việt Nam, NXB Y học,
tr 633- 634, 685-686.
10. Phạm Xuđn Sinh, Phùng Hoă Bình (2000), Dược học cổ truyền, NXB Y
học, tr 187.
11. Tăi liệu tiếng Anh:
11. Akahori A, Kagawa K, Shimaoka A (1975), Quantitative determination
o f saikóaponons in Buplẻuum extract. III. Extraction o f saiiosaponins from Bupleerum root. Shoyakugaku Zasshi 29: 99-105 (CA 85: 10345g).
12. Feng SJ, Zhang PL (1981), Chemical constituents o f Bupleurum tenue.
Chin trad herb drugs 12:30
13. Gan HS, Chen s w (1982), Quantitative and quantitativecomparison
between root and stem and leaves o f Bupleurum chinense. Bull Chi Mat
Med 7: 7-8.
14. Ishii N, N akam ura M (1980), Islation, char acterrization and nuclear
magnetic resonance spaestra o f new saponins froom the roots o f Bupleurum falcatum L.,Chem Pharm Bull 28: 2367-2373
15.Tang w ., Eisenbrand G. (1992), Chinse Drugs of Plant Origin, Sping -
Verlag: 224- 230.
16. Shi YN, Hsu L, (1980), Islation, separation and identification ỒỊ
kaempferitrin and kaemferol-7-rhamnoside from Bupleurum scorzonerifolium leaf and stem. Chin trad herb drugs //.'241-243
17. Song s x , (1984), Quantitative analysis of saikosaponin in Bupleurum
falcatum L. and effects o f environmental factors on its content Zhiwu
Shenglixue Tongxun: 31-34
18. Wu CF, Yu QH (1984), Phamarcological studiens on Bupleurum
chinense and its active ingredient, crude saikosaponin. J Shenyang Coll Pharm 1: 214- 218
19. Yu QH, Wan LP (1986), Machanisme of the antiinflammatory effect of
Bupleurum chinense crude saikosaponin J Shenyang Coll Pharm 1: 14-16
III. Tăi liệu tiếng Phâp:
20. M.H. Lecomte (1907), Flore gĩnĩrale de L ’ indo Chine, Paris, Tom 1,
g ừ ơ i g ử i : Phan C h ỉ cừơnợ
Phồnp: Mau c ầ n Cong An t ỉ n h B Ình Thuđn prừơi nhăn : Hffuyen V i ế t Than
Đ ại hoc Đươc Ha Mọi s ố 13 Lề Thănh Tong Ha MÔỈ
BIÍN BẢH ĐỊNH TÍH CĐY
Hơi g ử i : Phan T h i ế t
J*gđy g ử i : 17
MÔ t ả m u v ạ t : 1 mẫu r ễ -í 5 raau c ă n h t r đ t r ụ i + mẫu c ă n h nhỏ cố h o a .
KẾT QUA ĐỊHiĩ TÍN Họ : CARYOPMYLLACEAE
Tín khoa họn : Poly.oarpn.ea c o ry m b o sa ( L . ) Lam. Tí n V i ệ t Han : Bnch nổ đ ị n h . Đa quả t â n phòniT
Gônp: ảụnpc : Đắp n h ọ t , t r ị vănpr ẩa.Cura hoa t h u l i ễ n , h a t nhuđn
* 4
T ă i l i í u tham khảo :
1. Phan Hoăn/? HỘ cđy cỏ V ỉậ t ìícun Nhă x u ấ t bnn Trẻ Quyến I 19s9 tran/!?
7^+0 số 2 9 6 2. Tín ítồnp: n fth ĩa A c h y a n th e s c o r v n b o s a L.
2. Vo Văn C h ỉ TỪ đ ií n cđy th u ốc V iệ t Ham Hhă x u ấ t >»ản Y học 1997 số k l
tranf? 56 HÌnh 45 .
3 . A lfr e d p ĩ t e l o t Les p l a n t e s E iĩ ^ ie ỉn a le s ầu Car,hoâf?e, ểu Laos e t ầu V iẴ i Haồ Tone ỉ 1952 pciRe 87«
Cỏ cao 10—^fO cm , c ă n h n h i ề u hay í t , n h ẵ n hay có l ò n * l e n tr ắ n p ;. I»â h ỉ n h đừdnp: c h ỉ . n h o n , cố mui do Eiôt lônpr c h ắ c , n h ẵ n hay h ơ i có lSrrc?
ẽ ă i 3 - 20BHI mọc đ ố i hay B Ọ C vò n IT .Hoa khô xnn mău tr ắ n K hay h đ i hung t h ă n h np:ù đăy đăc hay th ư a.
Phổ b iế n n h i ề u hay í t 3 nhưng n ơ i ho an g d ạ i có c â t khắp Đong Dương, c đ y bân ở c âc cửa hătip t h u ố c bắc đ ứ đ i ăr.np; cụm h o a - v ớ i rả n h t h đ n v ă l â Thuốc dùnp; lăm d ị u vă lăm s e . ổ Ẩn ĐÔ dùnr? chữa r ắ n c ắ n .
Hn ỉĩôi 21 2 9 A /2 0 0 3 ĩĩprừdi đ ị n h xtín ( Vũ Văn Chuyín Số 27 Phố nhă Chuns' Hoăn k i ế n , l ă NỘi Đ . T . : 8288256