So sánh tách chiết DNA, RNA và mRNA
DNA RNA mRNA
1. Phá màng tế bào,
màng nhân Chất tẩy (SDS)+ siêu âm, ... Thiocyanate guanidinium LiCl, Urea, .. + cơ học, ..
Thực hiện trong môi trường vô trùng
2. Loại protein Phenol pH8
Chloroform:IAA Khác
Phenol pH4 : Chloroform:IAA
Khác Phenol pH4
3. Thu hồi nucleic acid:Tủa Tủa
Boom Lọc
Ethanol tuyệt đối Isopropanol, ... Hấp phụ trên silica Thu trên màng lọc
Ethanol tuyệt đối Isopropanol, ... Hấp phụ trên silica Thu trên màng lọc
So sánh tách chiết DNA từ thực vật, động vật và vi khuẩn vật, động vật và vi khuẩn
Giống nhau
Hầu hết tách chiết ở các loại tế bào động vật, thực vật, vsv đều theo nguyên lý cơ bản là gồm 3 bước: phá vỡ màng tế bào, làm biến tính các loại ngoài DNA (protein, RNA,..) để thu dịch có chứa DNA, kết tủa và thu nhận DNA.
So sánh tách chiết DNA từ thực vật, động vật và vi khuẩn
Thực vật Động vật Vi khuẩn
Mẫu Lá, rễ, thân,… Tế bào gan, cơ, tim,… Plasmid, E coli Trước khi tách chiết
phải nghiền, thêm vào tác dụng của hóa chất để phá hủy thành tế bào
cellulose
Trước khi tách chiết phải nghiền sơ,thêm vào tác dụng của hóa chất để phá hủy màng tế bào
Chỉ cần dùng hóa chất để phá vỡ màng tế bào. Phải thêm công đoạn ly tâm ở đầu quá trình để thu nhận được tế bào vsv.
Thường cho thêm
Proteinase K để bất hoạt DNase và
RNase
Thường cho thêm
Proteinase K để bất hoạt DNase và RNase
Tế bào vsv không cần cho thêm chất bất hoạt DNase và RNase
ở tế bào động vật rất giàu protein nên
thường cho thêm enzyme xúc tác quá (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});