3. Các nguyên tắc bảo quản thực phẩm
2.3.2.Sơ đồ bố trí thí nghiệm thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết vỏ
chiết vỏ hành tây
Tiến hành thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết bằng phƣơng pháp “khuếch tán trên giếng thạch” trên môi trƣờng NB (Nutrient Broth) với các
loại vi khuẩn chỉ thị nhƣ: E. coli, S. aureus, Salmonella.
a. Nguyên lý của phƣơng pháp “khuếch tán trên giếng thạch”[6]
Các phƣơng pháp này dựa trên sự khuếch tán của chất kháng sinh trong môi trƣờng thạch.
Chỗ nào có chất kháng sinh khuếch tán thì chỗ đó vi sinh vật kiểm định không mọc đƣợc và sẽ tạo thành vòng vô khuẩn.
b. Sơ đồ quy trình thực hiện
26
Hình 2.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết vỏ hành tây
27
Đục lỗ thạch: sau khi vi khuẩn đã đƣợc trải đều trên bề mặt đĩa, dùng đầu tuýp vàng vô trùng tiến hành đục lỗ thạch. Ấn nhẹ đầu tuýp lên bề mặt thạch để lấy những khối hình trụ mỏng ra ngoài. Chỗ thạch bị mất đi tạo thành một lỗ trống để chứa dịch chiết. số lƣợng lỗ thạch tùy thuộc vào mục đích nghiên cứu.
Bơm dịch chiết: dịch chiết đã chuẩn bị từ trƣớc đƣợc bơm vào các lỗ trống trên bề mặt thạch. Dùng micropipette với đầu tuýp vô trùng hút 100µl dịch chiết vào lỗ thạch. Chú ý khi nhỏ dịch chiết tránh xê dịch đĩa quá nhiều và bơm dịch chiết không đúng vị trí lỗ thạch. Khi đó dịch chiết bị loang ảnh hƣởng đên kết quả.
Quan sát kết quả: sau thời gian ủ trong tủ ấm, lấy ra quan sát và ghi nhận kết quả. Kết quả kháng khuẩn dựa trên đƣờng kính vòng tan mà dịch chiết tạo ra. Vòng tan càng lớn chứng tỏ khả năng kháng khuẩn càng cao và ngƣợc lại. Đƣờng kính vòng tan là hiệu số của đƣờng kính vòng tan tính từ tâm và đƣờng kính lỗ thạch đƣợc tính theo công thức sau:
d = d1-d2
Trong đó :
d: đƣờng kính vòng tan
d1: đƣờng kính vòng tan tính từ tâm lỗ thạch d2: đƣờng kính lỗ thạch