Nguyên tắc
Trong phân tử acid amin, peptid, protein có 1 đầu nhóm chức là (-COOH) mang tính acid, đầu nhóm chức còn lại là nhóm amin (-NH2 ) mang tính base, còn các amin tự do cũng như amoniac khi hòa tan thường ở dưới dạng amonium NH4+
kết hợp với 1 anion thường là clorua, sulfate, phosphate. Khi cho các phân tử này tác dụng với formol, sẽ tác dụng lên nhóm -NH2 để tạo thành phức chất metylen (-N = NH2). ΔV * 0.0014 NTS = * 100 (g/100g) m ΔV * 0.0014 NTS = * 1000 (g/l) V
Do vậy, sản phẩm là hợp chất metylen và 1 nhóm chức -COOH tự do có tính acid, có thể định lượng bằng NaOH với phenolphtalein làm chỉ thị màu, từ lượng NaOH chuẩn độ cho phép xác định 1 cách gián tiếp được lượng đạm formol.
Cách tiến hành
Trung hòa formol ½ : Lấy 50ml formol ½ thêm vào 3 giọt phenolphthalein 1%. Đem định lượng bằng dd NaOH 0.1N tới khi dd chuyển sang màu hồng nhạt, ta được formol trung hòa ½
Cân hoặc lấy một lượng chính xác m(g) hay V(ml) nguyên liệu pha loãng 10 lần, thêm vào đó 10ml dung dịch formol ½ đã trung hòa và 3 giọt phenolphthalein 3%, lắc đều để phản ứng xảy ra hoàn toàn. Sau đó định lượng bẳng dd NaOH 0.1N cho đến khi dd chuyển sang màu hồng nhạt bền vững.
Thực hiện 3 lần thử thật và 3 lần thử không. Tính kết quả
Gọi, V0 thể tích dd NaOH 0.1N thử không. Vtthể tích dd NaOH 0.1N thử thật.
→ ΔV = Vt - V0: Lượng NaOH 0.1N tương đương với lượng NH3 phóng thích đã được hấp thụ trong H2SO4 0.1N.
Từ đó suy ra:
- Số gam đạm amoniac trong 100g nguyên liệu: NF = ΔV * 0.0014 * 100 (g/100g) - Số gam đạm amoniac trong 1l nguyên liệu :
NF = ΔV * 0.0014 * 1000 (g/l)
Trong đó, 0.0014 là số gam đạm amoniac tương ứng với 1ml NaOH 0.1N.