IV. CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT
chiết xuất những hoạt chất tan nhiều trong nước, người ta hay
Chất béo (lipid)
- Thường được loại bằng những dung mơi khơng phân cực, nhưng chúng cũng cĩ thể chiết xuất bởi những dung mơi phân cực.
- Các loại hợp chất này cĩ thể được nhận thấy khi sắc ký lớp mỏng và hiện màu bởi hơi iod sẽ cho những vệt màu nâu.
- Muốn loại bỏ chất béo và sáp cĩ thể thực hiện theo những cách sau đây:
o Bột cây trước tiên phải được ly trích bằng ether dầu hỏa cho thật kiệt, sau đĩ phơi khơ bột cây rồi trích tiếp bằng các dung mơi khác.
o Dùng sắc ký cột nhanh (flash-chromatography): dung mơi giải ly là ether dầu hỏa hoặc hexan.
Khi chiết xuất các hợp chất tự nhiên trong cây, người ta thường trích luơn các tạp chất hay cĩ trong cây như chất béo, chất màu. Những tạp chất này sẽ làm cản trở quá trình cơ lập tinh chế các hoạt chất muốn khảo sát.
Với chất màu (pigment) : rất khĩ loại, ở nhiệt độ phịng thí nghịêm cĩ thể dùng than hoạt tính, acetat chì, hoặc để trong tủ lạnh cho tủa.
Các hợp chất polyphenol-tanin: thực vật thường chứa tanin với hàm lượng cao. Muốn loại bỏ tanin ra khỏi dịch chiết nước, người ta thường cho dung dịch ly trích qua cột hấp phụ cĩ chứa polyamid, Sephadex LH-20….
Các chất dẻo (plasticizero):
• Các chất dẻo như phtalat dialkyl, tri-n-butyl acethyl citrat, tributyl phosphat, … thường là tạp chất lẫn trong dung mơi, hoặc là các phụ gia của thùng chứa làm bằng chất dẻo.
•Trong chloroform và methanol thường cĩ chứa phtalat di-2-ethyl hexyl, trước đây đã bị lầm tưởng là hợp chất thiên nhiên cơ lập từ cây cỏ.
Thí dụ:
Trong khi loại dung mơi cuả dung dịch chiết xuất để thu cao, sự cĩ mặt các muối ion vơ cơ, những vết acid cĩ thể là tác nhân cho một số phản ứng.
Một vài dung mơi như aceton, methanol, ethylen glycol cĩ thể tạo nên các dẫn xuất.
Chất hấp thụ dùng trong sắc ký cột như alumin cĩ thể gây nên phản ứng ngưng tụ, phản ứng chuyển, phản ứng cộng nước hoặc phản ứng khử nước, silicagel cũng cĩ thể gây nên phản ứng oxy hĩa.
Ngồi ra khi chiết xuất, cần phải chú ý đến các chất bơi trơn như silicon chân khơng ở thiết bị cơ quay chân khơng, các chất artefact là những chất chỉ hình thành trong quá trình chiết xuất, thường là những dẫn xuất của các hợp chất thiên nhiên. Muốn hạn chế những trường hợp này cần phải sử dụng các điều kiện chiết xuất, cơ lập êm dịu.
Tại mỗi giai đoạn của quá trình chiết xuất, đều cĩ thể tạo nên những hợp chất artefact này.