2. 4 Nghiên cứu một số tác dụng sinh học: 4.1 Tác dụng kháng khuẩn:
2.4.3-Thử tác dụng kích ứng trên da của dầu hạt: • Nguyên liệu:
• Nguyên liệu:
+ Mẫu thử: Dầu hạt.
+ Động vật thí nghiệm: Thỏ cả hai giống khỏe mạnh, màu trắng, có trọng lượng 2,5 ± 0,5 kg đạt tiêu chuẩn thí nghiệm.
• Thực nghiệm và kết quả:
+ Thực nghiệm: Một ngày trước khi thí nghiệm, cạo sạch lông ở vùng lưng thỏ về cả hai bên cột sống một khoảng đủ rộng để đặt mẫu thử và đối chứng. Chọn những thỏ có da mịn đều, lành lặn, không bị tổn thương để thí nghiệm.
Mẫu thử được tiến hành trên 3 thỏ. Trên mỗi thỏ, chọn một khoảng da để đặt mẫu thử và một khoảng da tương tự kề bên làm đối chứng.
Lấy 0,5 ml mẫu thử nhỏ lên miếng gạc có kích thước 2,5x2,5 cm với độ dày thích hợp. Áp miếng gạc có thấm mẫu thử lên da thỏ. Cố định miếng gạc bằng băng dính y tế không gây kích ứng trong 4 giờ. Sau 4 giờ tiếp xúc, bỏ miếng gạc và băng dính. Lau sạch vết dầu còn dính lại trên da cẩn thận bằng bông có tẩm một ít ether. Khoảng da đối chứng cũng được lau bằng bông tẩm ether tương tự. Quan sát về tình trạng thỏ sau khi đặt mẫu thử trong 3 ngày.
Đánh giá phản ứng theo các mức độ ban đỏ và phù nề trên khoảng da đặt mẫu thử so với khoảng da đối chứng kề bên tại các thời điểm 1 giờ, 24 giờ, 48 giờ và 72 giờ sau khi làm sạch mẫu thử. Nếu có tổn thương, có thể kéo dài thời gian quan sát để đánh giá đầy đủ hơn về khả năng hồi phục hoặc không hồi phục của vết thương.
Phản ứng trên da thỏ được chấm điểm theo thang điểm quy định như sau:
. Ban đỏ:
- Không ban đỏ 0
- Ban đỏ rất nhẹ 1
- Ban đỏ nhận thấy rõ 2
- Ban đỏ vừa phải đến nặng 3
- Ban đỏ nghiêm trọng 4 . Phù nề: - Không phù nề - Phù nề rất nhẹ - Phù nề nhận thấy rõ (viền phù nề rõ) - Phù nề vừa phải (phù nề «lmm) - Phù nề nghiêm trọng (phù nề >lmm) 4 0 2 3 1
+ Kết quả:
Sau khi đặt mẫu thử, thỏ không có biểu hiện gì khác thường. Không có dấu hiệu thỏ bị ngứa hay khó chịu. Trong tất cả các lần quan sát sau khi bỏ mẫu thử, khoảng da đặt mẫu thử và khoảng da đối chứng đều không có phản ứng ban đỏ hoặc phù nề. Thỏ ăn uống và hoạt động bình thường trong thời gian theo dõi.
• Kết luận: