II. Phơng pháp nghiên cứu
1 Phơng pháp xác định hàm lợngNH4+ (8)
Hàm lợng NH4+ trong dung dịch đợc xác định bằng phơng pháp Nessler có cải tiến[18].
* Chuẩn bị dịch pha loãng của dung dịch NH4Cl chuẩn: - Dung dịch chuẩn gốc (0,3819% ~1,28 mg/ml NH4+)
Hoà tan 3,819g NH4Cl vào nớc cất, thêm nớc cho vừa đủ 1000ml
- Dung dịch chuẩn gốc pha loãng : Pha loãng dung dịch chuẩn gốc ra 100 lần : 1ml dung dịch chuẩn gốc + 99ml nớc cất. Hàm lợng NH4Cl trong dung dịch pha loãng này là 0,03819 mg NH4Cl/ml (tơng ứng với 0,0128 mg NH4+
/ml. Tiếp tục pha loãng nh sau:
- Chuẩn bị mẫu:
Tỷ lệ pha loãng dung dịch với nớc cất (ml +ml) Hàm lợng NH4+ trong dung dịch pha loãng (mg/l) 1+49 3+47 6+44 12+38 0,2569 0,7708 1,5417 3,0832 28
Trớc khi sử dụng phơng pháp Nessler, dung dịch mẫu phải đợc khử tạp chất
+ Khử tạp chất:
Cho vào bình tam giác (dung tích 250 ml ) 100 ml dung dịch mẫu, cho thêm 1ml dung dịch ZnSO4 10% lắc đều. Điều chỉnh độ pH của dung dịch đến 10,5 bằng dung dịch NaOH 6 N để lắng vài phút, sau đó lọc qua giấy lọc + Phản ứng tạo màu của dung dịch nghiên cứu với thuốc thử Nessler:
Lấy 50 ml mẫu (nếu mẫu quá đặc cần đợc pha loãng bằng nớc cất không có amôni). Sau đó nhỏ một giọt EDTA, lắc đều dung dịch.Thêm 2 ml thuốc thử Nessler vào dung dịch mẫu, lắc đều. Nếu trong mẫu nghiên cứu có mặt NH4+ , hỗn hợp dung dịch thuốc thử với Nessler sẽ có màu vàng.
* Xác định hàm lợng NH4+ bằng phơng pháp so màu trên máy quang phổ: Đo độ hấp thụ màu của dung dịch nghiên cứu và dung dịch chuẩn trên máy quang phổ kế ở bớc sóng 420 nm. Hàm lợngNH4+ trong dung dịch nghiên cứu đợc tính theo công thức:
[NH4+]( mg/l) = (ODmẫu / ODchuẩn) x Nồng độ chuẩn(mg/l) x Độ pha loãng mẫu.
Ví dụ: ODmẫu = 0,313, Độ pha loãng 10 lần ODchuẩn = 0,21.
Nồng độ chuẩn: 1,5416 mg/l
Nồng độ [ NH4+] trong mẫu = ( 0,313/0,21) x 1,5416 x 10 = 22,98 mg/l