*** Dinh lu’o’ng protein toàn phân trong huyét thanh bàng phân üng Biuret
Nguyên tâc: Protein khi tâc dung vôi thuôc thü Gornall (CuSO^/NaOH) sê tao
phüc chat màu tim hông. Dung dich dem do quang ô buôc sông 540nm, cuvet 1cm.
Tiên hành:
- Vê biëu dô mâu: Dùng dung dich protein dâ biét nông dô (50g/L) thuc hiên theo bâng sau:
Ong 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Huyét thanh pha loâng 1/10 (mL) 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,8 1,0 0
NaCl 0,9% (mL) 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,2 0 1,0
Thuôc thü Gornall (mL) 4 4 4 4 4 4 4 4 4
Lac và dë 30 phüt ô nhiêt dô phông (20 - 25°C). Tien hành do quang vôi ong trâng (ong 9) ô büôc sông 540 nm, cuvet 1cm. Vë biëu dô mâu. Tfnh hê sô :
Hêsô- _ Nong dô protein/100mL Mât dô quang - Dinh luong protein toàn phân trong huyét thanh
Cho vào 2 ong nghiêm:
Ông thü A/ Ong trâng Huyët thanh (mL) 0,05 0 NaCl 0,9% (mL) 0,95 1 Thuôc thü Gornall (mL) 4 4
Trôn dêu, dë 30 phüt à nhiêt dô phông. Tiê'n hành do quang ô buôc sông
540nm, cuvet 1cm, ong thü dôi vôi ong trâng, so vôi biëu dô mâu tfnh ra luong protein toàn phân cô trong huyët thanh.
*** Dinh luçfng albumin huyét thanh
Nguyên tac: Tai pH = 4,2 albumin tao phüc màu xanh vôi thuôc thü
Bromocresol green. Dô dâm cüa phüc hop này tÿ lê thuân vôi nông dô albumin. Phüc hop màu cô eue dai hâp thu ô buôc sông 640nm.
Tiê'n hành: Trong 3 ong nghiêm
Trâng Chuân Thü
Huyët thanh (fiL) 0 0 10
Chuân 50g/L (^iL) 0 10 0
Thuôc thü (mL) 2,5 2,5 2,5
Lâc dêu, dë 5 phüt ô nhiêt dô phông thf nghiêm. Tiën hành do quang ô buôc sông 640nm, cuvet 1 cm.
Nông dô albumin duoc tmh theo công thüc:
Nông dô albumin (g/L) = —-'hlf x 50
A chuan
Tü dô, tfnh duofc tÿ sô A/G (albumin/ globulin) cüa tùng lô chuôt thü.
*** Dinh luong seromucoid huyê't thanh
Nguyên tâc: Seromucoid duoc két tüa bôi acid phosphotungstic 5% trong
HC1 2N. Dô duc cüa dung dich tÿ lê vôi nông dô seromucoid. Hôn dich duoc do dô duc à buôc sông 400 nm.
Tien hành: Trong 1 ong ly tâm, lân luot cho 0,05mL huyét thanh, 4,5mL (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
NaCl 0,85% và 2,5mL dung dich acid perchloric (HC104) 1,8M. Trôn kÿ bàng düa thuÿ tinh. Dë 10 phüt à nhiêt dô phông roi loc hoâc ly tâm 10 phüt. Hut môi ong
5mL dich loc, thêm lmL acid phosphotungstic 5%.
Trôn dêu. Sau 15 phüt do dô duc vôi quang ké so vôi nuôc cât làm ong chüng ô buôc sông 400nm, cuvet 1cm.
Cân cü vào su thay doi dô duc dë dânh gia khâ nâng chông viêm cüa thuôc. Tÿ lê giâm nông dô seromucoid duoc tfnh theo công thüc:
De - Dt
I% = --- x 100% De
Trong dô: 1% : Tÿ lê giâm nông dô seromucoid
Dc : Dô duc lô chuôt chüng Dx : Dô duc lô chuôt thü
*** Bach câu
Bach câu duoc dém theo phuong phâp co diën. Tÿ lê giâm bach câu duoc tmh theo công thüc sau :
M e — M t
Tÿ lê giâm BC(%) = — x 100% Me
Trong dô: Mc : Sô luong bach câu lô chuôt chüng
Mt : Sô luçmg bach câu lô chuôt thü 2.1.3. Phuong phâp xiï lÿ sô liêu
2.2. KÉT QUÂ NGHIÊN CÛU VÀ NHÂN XÉT2.2.1. Theo dôi tâc dung chông tâng sinh u hat 2.2.1. Theo dôi tâc dung chông tâng sinh u hat
Câc lô chuôt duoc cây amian, cho uông saponin, a-amylase và tiêm bâp a-chymotrypsin. Sau 5 ngày gây viêm, giét chuôt, bôc tâch u hat, dem cân tuoi. Tÿ le ûc ché hinh thành u hat duoc tinh theo công thuc à mue 2.1.2.2.a.
Két quâ trong luong u hat cüa câc lô chuôt thuc nghiêm duoc trinh bày trong Bàng 2.1.
Bâng 2.1. Trong luong u hat cüa câc lô chuôt thuc nghiêm
Lô Chat thü Liêu luong SÔ
chuôt Trong luong u trung bînh (mg) Tÿ lê üc ché (%) P 1 Chüng 5 335,8 ± 14,0 0 2 SKNC l,5g/kg/ngày 5 254,1 ± 4,8 24,33 <0,01 3 a-amylase 6000UI/kg/ngày 5 249,9 ± 3,0 25,57 <0,01 4 a-CT l,5mg/kg/ngày 5 246,3 ± 3,7 26,66 <0,01 5 SKNC + a- amylase l,5g/kg/ngày + 6000UI/kg/ngày 5 203,5 ± 3,4 39,39 <0,01 6 SKNC + a-CT l,5g/kg/ngày + 1,5mg/kg/ngày 5 200,0 ± 4,2 40,45 <0,01 7 Indomethacin 5mg/kg/ngày 5 186,7 ± 4,0 44,41 <0,01
Quy uôc: Tÿ lê ûc ché u hat cüa lô chüng là 0%
Ghi chû: Két qud trên là gia tri trung binh ± SE cüa 5 chuôt.
Bâng 2.1 cho thây:
Trong luong u hat giûa lô chuôt duoc gây viêm nhung không dùng thuôc lôn hon nhiêu so vôi trong luçmg u hat trung bînh cüa câc lô chuôt duoc dùng thuôc. Su khâc biêt cô ÿ nghîa thông kê vôi p<0,01. Nhu vây, viêc sü dung thuôc cô tâc dông rô rêt dén tinh trang viêm cüa câc lô chuôt.