cúm
- Môi trường bảo quản mẫu 199 chứa 0,5% BSA (Albumin huyết thanh bò)
Bổ sung kháng sinh và kháng khuẩn
Penicillin G 2.000.000U/lắt Streptomycin 200 mg/lắt Polymyxin B 2.000.000 U/lắt Gentamicin 250 mg/lắt Nystatin 500.000 U/lắt Ofloxacin HCl 60 mg/lắt Sulfmethoxasole 200 mg/lắt
- Môi trường Glycerol
+ Pha chế PBS NaCl 8 g KCl 0,2 g Na2HPO4 1,15 g KH2PO4 0,2 g Nước cất vự 1000 ml
+ Hấp vô trùng (1210C/15 phút), bổ sung kháng sinh (như trên) và trộn với glycerol theo tỷ lệ 1:1
Ngoài ra có thể sử dụng các môi trường bảo quản khác như: Muối ựệm Hank, môi trường M.E.M, PBS, Tryptose Phosphate broth, Veal Infusion Broth, Sucrose-phosphate buffer. Các dung dịch này có thể ựược bổ sung BSA, gelatin 0,5 - 1%, các chất kháng sinh, kháng nấm.
- Dung dịch PBS 0,01M pH7.2
Na2HPO4 1,096 g NaH2PO4.H2O 0,316 g
Na Cl 8,5 g
Nước cất 1 lắt
Chỉnh pH = 7.2 bằng NaOH 1N hoặc HCl 1N, hấp vô trùng, bảo quản 40C không quá 3 tuần.
- Dung dịch nước muối sinh lý 0,85%:
8,5 g NaCl trong 1 lắt nước cất. Hấp vô trùng, bảo quản 40C không quá 3 tuần.
- Huyễn dịch hồng cầu gà 1%:
+ Gà trống khoẻ mạnh ựã trưởng thành, không có kháng thể cúm và newcastle.
+ Dùng bơm tiêm 5 - 10 ml hút sẵn 1ml (10 % thể tắch) dung dịch chống ựông (Natri Citrat 4%, AlserverẦ) rồi lấy máu gà ở tĩnh mạch cánh, cho máu vào ống nghiệm.
+ Ly tâm 1000 - 1500 vòng/phút, trong 15 phút, ựổ bỏ huyết tương, cho thêm nước sinh lý (NaCl 0,85%) vào hồng cầu, lắc ựều. Ly tâm như trên 3 - 4 lần ựể rửa hồng cầu. Sau lần ly tâm cuối hút bỏ nước ở trên.
+ Pha hồng cầu thành huyễn dịch 1% bằng cách pha 1 ml hồng cầu với 99 ml nước muối sinh lý.
+ Bảo quản huyễn dịch hồng cầu ở nhiệt ựộ 4 - 80 C. Hồng cầu sau khi pha có thể dùng trong 4 - 5 ngày (nếu hồng cầu bị dung huyết loại bỏ không dùng).