Mục đích: đánh giá hiệu quả của các loại dịch trích thực vật đối với hai loại nấm Curvularia sp. và Nigrospora sp. gây lem lép hạt lúa.
Thực hiện thí nghiệm:
Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 21 nghiệm thức (20 nghiệm thức sử dụng dịch trích thực vật và 1 nghiệm thức đối chứng), 5 lần lặp lại. Loại dịch trích thực vật và nồng độ dịch trích được trình bày trong Bảng 2.1. Nghiệm thức đối chứng là môi trường PDA không có chứa dịch trích thực vật.
Chuẩn bị nguồn nấm Curvularia sp. và Nigrospora sp.: tương tự Thí nghiệm 1.
Khoanh khuẩn ty nấm gây bệnh lem lép hạt (đường
kính khoảng 5mm)
Môi trường đã có thuốc hóa học theo nồng độ tính sẵn
13
Các loại dịch trích thực vật được tính toán khối lượng sao cho khi hòa tan vào chai thủy tinh chứa 95ml môi trường PDA sẽ đạt được nồng độ đã định sẳn. Thực vật sau khi thu về sẽ được rửa sạch đất cát, để ráo, cân thực vật theo khối lượng đã tính rồi nghiền với 5ml nước cất thanh trùng trong cối và chày thủy tinh đã thanh trùng khô. Sau đó, rót phần dịch trích thu được qua giấy lọc Whatman (có đường kính lỗ lọc 0,5µm) vào 1 cốc thủy tinh đã thanh trùng khô. Dùng bọc nilong bao cả bộ cốc thủy tinh và giấy lọc bên trên.
Nấu tan môi trường PDA. Khi chai môi trường đạt nhiệt độ khoảng 55-60oC (có thể cầm được chai môi trường bằng tay) thì đưa 5ml dịch trích thực vật đã chuẩn bị sẳn vào chai môi trường, lắc chai môi trường để dịch trích hòa tan đều vào môi trường. Sau đó, môi trường trong chai sẽ được đổ vào các đĩa Petri (10ml môi trường/ đĩa petri). Sau khi môi trường đặc lại, đặt các khoanh khuẩn ty nấm đã chuẩn bị vào chính giữa đĩa petri (Hình 2.2).
Hình 2.2: Sơ đồ bố trí thử nghiệm hiệu quả của dịch trích thực vật đối với nấm
Curvularia sp. (hoặc Nigrospora sp.) gây lem lép hạt lúa (Dhinggra và Sinclair)
Chỉ tiêu ghi nhận:ghi nhận đường kính khuẩn lạc của nấm vào các thời điểm 24, 48, 72, 96... giờ sau đặt khoanh khuẩn ty. Chỉ tiêu được 7 ngày.
Hiệu quả của thuốc được tính theo công thức Abbott: (ĐKKTđc – ĐKKTi)
HQT(%) = x 100 ĐKKTđc
Trong đó: ĐKKTđc: Đường kính khuẩn lạc của nghiệm thức đối chứng ĐKKTi: Đường kính khuẩn lạc của nghiệm thức thuốc i
Khoanh khuẩn ty nấm gây bệnh lem lép hạt (đường
kính khoảng 5mm)
Môi trường đã có dịch trích thực vật theo nồng độ tính sẵn
14
Số liệu được xử lý bằng phần mềm Excel và thống kê bằng phần mềm Mstatc.
15
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN