THỬ NGHIỆM KHÁNG HUYẾT THANH
Tiến hành như phương pháp kiểm tra sự tự dính kết,nhưng sử dụng một giọt huyết thanh H thay cho dung dịch nước muối sinh lý.
Nếu xuất hiện kết dính, phản ứng coi là dương tính
3.VÍ DỤ
Nghiên cứu và phát hiện Salmonella trên một số mẫu thịt
gà tươi sống trên địa bàn hai quận Phú Nhuận và Bình Thạnh thành phố Hồ Chí Minh.
25 g mẫu + 225 ml BPW, đồng nhất mẫu trong 30 giây độ pha loãng 10-1
Đem ủ ở 37oC trong 24 giờ
Lấy 0.1ml canh trường cho vào môi trường RV Ủ ở 42oC ± 0,5 trong 24 giờ
Cấy chuyển trên môi trường XLD và ủ ở nhiệt độ 37 oC trong 24 giờ
KL đặc trưng của Salmonella trên môi trường XLD : tròn, lồi, trong suốt, có tâm đen đôi khi tâm đen quá lớn bao trùm khuẩn lạc, môi trường xung quanh chuyển sang màu đỏ
Cấy chuyển vào môi trường test sinh hóa : môi trường TSI, Manitol phenol red, Urea, LDC,
Trypton, VP
Biểu hiện đặc trưng của Salmonella : trên TSI: đỏ/vàng/H2S(+)/gas(+)/; Manitol(+); Urea(-);
LDC(+); Indol(-); VP(-) Ủ ở 37oC trong 24 giờ
Chuẩn bị mẫu Cấy mẫu. Thử nghiệm khẳng định Kết quả
Chuẩn bị mẫu
Dùng kéo vô khuẩn cắt 25g mẫu (không lấy mỡ, lấy cả chất lỏng nếu có), cho vào bao nilong vô khuẩn
Thêm vào 225ml môi trường PBW đã hấp khử trùng để nguội.
Tiến hành đồng nhất mẫu được độ pha loãng 10-1.
-Cấy mẫu từ môi trường RV sang môi trường thạch đĩa XLD
-Ủ ở nhiệt độ 370C trong 24 giờ.
Cấy mẫu
- Cấy 0,1ml dịch mẫu có nồng độ 10-1 vào ống nghiệm có chứa 10ml môi trường tăng sinh chọn lọc RV
- Ủ ở 42 ± 0,5 oC trong 24 giờ.
Tăng sinh Tăng sinh
Khuẩn lạc đặc trưng của
Salmonella
Chọn 5 khuẩn lạc đặc trưng cấy chuyển sang môi
trường thạch đĩa TSA, tăng sinh không chọn lọc và ủ ở 37 ± 0,5oC trong 24 giờ