- Điều kiện khối phổ: Sử dụng chế độ MS/MS với điều kiện khối phổ dựa vào tối ưu hoá cụ thể trên máy.
2.2.4.1. Xác định các thông số DĐH
Dựa vào chương trình phần mềm WinNonlin 5.2 và chương trình phần mềm Excel để tính toán, xử lý kết quả thực nghiệm và xây dựng đường cong dược động học.
- Sử dụng chương trình phần mềm Excel để tính các số liệu: Giá trị trung bình, độ lệch chuẩn tương đối, khoảng tin cậy, phương trình hồi quy giữa đáp ứng phân tích và nồng độ AZI.
- Nồng độ AZI trong huyết tương được tính dựa vào phương trình hồi quy xây dựng từ mẫu trắng cho thêm AZI theo từng ngày phân tích.
- Tmax, Cmax xác định từ số liệu thực nghiệm.
- AUC0−t xác định bằng phương pháp tính diện tích hình thang:
[ ] ∑− ( ) ( ) = + + × − + = 1 0 1 1 0 2 n i i i i i t C C t t AUC
Với Ci là nồng độ AZI tại thời điểm lấy mẫu i - AUC0−∞ = AUC0-t + Cn/λz
Trong đó : Cn là nồng độ AZI tại thời điểm lấy mẫu cuối cùng.
λz là hệ số thải trừ, λ2 = 2 / 1 2 ln T
2.2.4.2. Đánh giá tương đương sinh học
Đánh giá TĐSH của chế phẩm bằng cách so sánh tỷ số các thông số AUC0-∞, Cmax, Tmax của chế phẩm thử và chế phẩm đối chiếu:
- Với Cmax và AUC: Phân tích phương sai bằng chương trình 32
WinNonlin 5.2, xác định khoảng tin cậy 90% (Ci) của sự sai khác giữa hai giá trị trung bình của chế phẩm thử và chế phẩm đối chiếu (số liệu chuyển sang dạng logarit).
Ci = Log10AUC(T) − Log10AUC(R) ± t0,1; N’
NEMS 2 EMS 2
Trong đó:
T: Giá trị Cmax hoặc AUC0-∞ của chế phẩm thử.
R: Giá trị Cmax hoặc AUC0-∞ của chế phẩm đối chiếu. N’: Bậc tự do của sai số (N’=N-2)
EMS: Trung bình bình phương của sai số. N: Tổng số NTN tham gia đánh giá TĐSH.