II. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN VÀ CÔNG NGHỆ CHẾ TẠO
c) Vi sensơ glutamate
Glutamate là sản phẩm của sự chuyển hóa amin (tranxaminaza) oxaloacetic glutamic (GOT) và chuyển hóa amin pyruvic glutamic (GPT) mà hoạt tính cùa chúng đƣợc sử dụng để làm chỉ số y học. Sensơ glmamate gồm enzim đã đƣợc cố định và linh kiện điện hóa đƣợc sử dụng trong các ngành công nghiệp thực phẩm và lên men. Oxydaza glutamate làm xúc tác cho quá trình oxy hóa glutamate, là phản ứng tiêu thụ oxy. Vì vậy, sensơ oxy có thể dùng để làm sensơ glummate. Hình 18 là cấu trúc vi sensơ oxy dùng để đo glutamate.
Hình 18. Điện cực đo oxy dùng làm sensơ glutamate
(1) Au (5) SiO2
(2) Màng teflon (5) Si
(3) 0.1M-KOH (7) Cao su silicon. (4) Si304
Sensơ gồm có một màng teflon thẩm thấu khí, hai vi điện cực vàng và dung dịch 0,1M KOH dùng làm chắc điện ly. Men oxy hóa glutamate đƣợc cố định trong triaceoctane nhƣ sau: criacetate cellulose (250mg) đƣợc hòa tan trong 5ml dichloromethane, thêm vào 150ml 1,8-diamono - 4-aminomethvloctane và khuấy đều trong 20 phút. Sau đó, dung dịch đồng nhất đƣợc trải trên tấm kinh phẳng và giữ ở 200
Ctrong không khi khô trong hai ngày. Màng hình thành trên tâm kinh đƣợc cắt thành những mẫu nhò và bóc ra. Sau khi rửa sạch trong nƣớc cất, màng cho phản ứng với 1% glucaraldehyde ờ 250
C, thời gian 1 giờ trong dung dịch đệm phosphate (0,lM; pH 7,0). Lấy một mẫu màng đặt lên tấm kinh sạch và đổ dung dịch men oxy hóa (20 u ml-1) lên màng. Tâm kính đƣợc đậy lại bằng một tấm kính khác và giữ ờ 4°c trong một đêm. Sau đó, màng đƣợc ủ 30 phút trong dung dịch glycin 0,1M (pH 7,7) ờ 250C để chặn các nhóm aldehyde còn lại. Màng liên kết men oxy hóa glutamace đƣợc rửa 30 phút trong dung dịch đệm 0,5M NaCl, 30 phút trong 0,1M photsphate và cất giữ ở 40C. Màng men oxy hóa glucamace đƣợc đặt lên trên màng nylon cùa vi điện cực oxy và che, phủ bằng lƣới nylon, sau đó có thê đem ra sử dụng. Sử dụng sensơ trên có the đo đƣọ-c 110112 độ glutamate từ 5 đến 50mM.