5. Nội dung nghiên cứu
3.2.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng thí
cho việc tách lọc và định danh.
Một số chỉ tiêu phân loại giun tròn:
3.2.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng thí nghiệm nghiệm
Phương pháp nghiên cứu nhóm Chân bụng
Mẫu định lượng
tính mật độ trung bình theo mùa qua 4 đợt thu mẫu (các công thức tính toán xem mục 3.4.2)
cân trọng lượng các mẫu vật bằng cân điện tử MT
1066, sai số 0,01g và tính sinh khối trung bình theo mùa
qua 4 đợt thu mẫu (các công thức tính toán xem mục 3.4.2)
mẫu được lưu trữ trong dung dịch cồn 700 tại phòng
thí nghiệm Động vật – Khoa Sinh học – ĐHSP Tp HCM
Mẫu định tính
Đo 4 chỉ tiêu kích thước: tầng thân, tháp vỏ, chiều
cao vỏ, chiều rộng vỏ từng loài bằng thước cặp đồng hồ.
Một số chỉ tiêu chính trong việc định loại Chân bụng.
Hình dạng, màu sắc vỏ.
Kích thước tháp vỏ, tầng thân, chiều cao vỏ, chiều
rộng vỏ.
Số vòng xoắn
Đặc điểm đường suture.
Phương pháp nghiên cứu nhóm Hai mảnh vỏ
Một số chỉ tiêu sử dụng trong định loại lớp Hai mảnh vỏ:
+ Hình dạng và hình thái vỏ.
+ Hình thái vết cơ khép vỏ trước và vỏ sau.
+ Kích thước chiều rộng, dài, cao.
+ Đặc điểm khớp bản lề có răng hay không có răng,
hình thái của răng.
+ Có dây chằng ở trong hay ngoài.
Tài liệu dùng để phân loại nhóm chân bụng và hai
mảnh vỏ
Đối với Chân bụng và Hai mảnh vỏ:
R. Tecker abbott, Herbert S. Zim & Marita Sandstom,
1955, “Sea Shells of the world”.[38]
R. Tecker abbott & Perter Dance, 1998, “ Compendium of
the world” American Malacolo Gists, INC.[39]
Phương pháp nghiên cứu Giun tròn (Tuyến trùng)
• Phương pháp xử lí mẫu
Lọc bỏ cặn thô: Cho mẫu đất vào xô nhựa, bóp vụn đất và khấy đều, sau đó thêm 1,5-2 lit nước, tiếp tục khấy đều.
- Khấy mạnh tay rồi đổ qua rây lọc số 1 (đường kính
20cm, cao 5cm, kích thước lỗ rây 0,5mm)
- Rửa qua phần cặn còn lại sau đó khuấy mạnh nước
trong xô nhựa và điếm từ 1-10 rồi gạn lọc, làm 8-9 lần cho hết đất, cát trong mẫu.
- Đổ mẫu qua rây lọc (đường kính lỗ 45µ) trên 1 xô
nhựa sạch rồi tách mẫu bằng dung dịch Ludox 1.18.
- Rót phần trên của ống qua rây lọc (đường kính lỗ
45µ) và rửa bằng nước sạch để loại bỏ Ludox
- Phần lắng cặn trong ống thêm Ludox vào khuấy
đều tiếp làm thêm 2 lần nữa
Phương pháp đếm
- Cho toàn bộ mẫu Giun Tròn sau khi tách lọc qua rây 45μm, rửa
sạch formaline và cho vào đĩa đếm.
- Đếm hết toàn bộ số lượng giun có trong đĩa đếm và đếm cho hết số mẫu thu sau mỗi lần tách.
Phương pháp làm tiêu bản cố định - Dụng cụ:
Đĩa đếm, Staining blook (giếng), que gắp, thuốc nhuộm Bengal rose, tủ ấm, bình hút ẩm, đèn cồn, ống đồng, lam, lame và pippet
- Các dung dịch
- Dung dịch I: Foomol (4%) 99ml, Glycerine 1ml - Dung dịch II: Ethanol (96%) 95ml, Glycerine 5ml - Dung dịch III: Ethanol (96%) 50ml, Glycerine 50ml
Phương pháp làm tiêu bản
- Các dụng cụ cần thiết phục vụ cho việc lên tiêu bản: đĩa paraffin,
ống đồng, đèn cồn, que gắp, lọ glycerin tinh khiết, lam, lamen, kẹp gỗ, kính lúp
Một số chỉ tiêu phân loại giun tròn
MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM CHÍNH KIỂU MIỆNG Miệng nhỏ Miệng rộng Miệng có răng Miệng có hàm
CUTICUN Trơn Có vân Chấm Kiểu khác
DẠ DÀY Thiếu dạ
dày
Dạ dày
hình củ Dạ dày kép Kiểu khác
hành
AMPHID Tròn Móc Xoắn Hình túi (hình cốc)
CƠ QUAN SINH DỤC Đặc điểm cơ quan giao cấu Trợ sinh dục Phụ sinh dục
Cấu tạo buồng trứng hay tinh
hoàn.
Phân loại dựa vào các tài liệu sau:
Platt, H. M. and Warwick, R. M. (1983). Free-living Marine
Nematodes. Part I. British Enoplids. Synopses of the British Fauna. No. 28. Linnean Society of London/Estuarine & Brackish Water Society. 307 pp [40]
Platt, H. M. & Warwick, R. M. (1988). Free-living Marine
Nematodes. Part II. British Chromadorids. Kermack DM & Barnes R. S. K., eds. Brill, E. J, Dr Backhuys, W. Leiden. 502pp.[41]