L ỜI MỞ ĐẦU
2.3.2Cô lập và tinh chế các hợp chất
Trong khóa luận này, chúng tôi khảo sát cao Hexan.
Thực hiện SKC cao Hexan (m=171g) trên silica gel với hệ dung môi rửa giải là H:EA lần lượt là Hexan 100%, 100H:1EA, 50H:1EA, 20H:1EA, 10H:1EA, 1H:1EA và EA 100% các phân đoạn giống nhau trên SKLM ( thuốc thử hiện diện là H2SO4 10%/EtOH) gom chung lại được 7 phân đoạn, mã hóa thành H1 – H7. Kết quả được tóm tắt trong bảng 2.1.
Bột lá khô 1,4 kg
− Ngâm dầm với EtOH 960
− Lọc, cô quay thu hồi dung môi
Cao ethanol 300g
Cao nước 76,1g Cao ethyl acetate
9,8g Cao hexan
171g
− Trích pha lỏng với các dung môi: hexan, ethyl acetate, nước.
Bảng 2.1: Kết quả sắc kí cột cao Hexan
Phân đoạn Tên mã hóa Khối lượng (g) Kết quả SKLM Ghi chú 1 H1 112,33g Nhiều vết Không khảo sát
2 H2 13,70g Rõ vết Khảo sát
3 H3 3,93g Nhiều vết Không khảo sát 4 H4 3,90g Nhiều vết Không khảo sát
5 H5 5,20g Rõ vết Khảo sát
6 H6 10,16g Nhiều vết Không khảo sát 7 H7 23,50g Nhiều vết Không khảo sát
Khảo sát phân đoạn H5 (5,2g)
Phân đoạn H5 được SKC silica gel với hệ dung môi H:EA có độ phân cực tăng dần: 50H:1EA, 20H:1EA, 10H:1EA, 5H:1EA và cuối cùng là MeOH. Dựa vào SKLM gom các đoạn giống nhau thành 8 phân đoạn được mã hóa thành H5.1 – H5.8. Kết quả được tóm tắt trong bảng 2.2.
Bảng 2.2: Kết quả SKC trên phân đoạn H5
Phân đoạn Tên mã hóa Khối lượng (mg)
Kết quả SKLM Ghi chú 1 H5.1 380mg Nhiều vết Không khảo sát 2 H5.2 390mg Nhiều vết Không khảo sát 3 H5.3 477,5mg Nhiều vết Không khảo sát 4 H5.4 400mg Nhiều vết Không khảo sát 5 H5.5 250mg Nhiều vết Không khảo sát
6 H5.6 742mg Rõ vết Khảo sát
7 H5.7 960mg Nhiều vết Không khảo sát 8 H5.8 974,6mg Nhiều vết Không khảo sát
Khảo sát phân đoạn H5.6 (m=742mg)
Phân đoạn này tiếp tục được SKC silica gel pha thường với hệ dung môi H:EA theo tỉ lệ 15H:1EA, 10H:1EA, 7H:1EA và MeOH dựa vào SKLM thu được 3 phân đoạn từ H5.6.1 – H5.6.3.
Phân đoạn H5.6.2 (m=199mg) được SKC silica gel pha thường với hệ dung môi H:AC tăng dần độ phân cực theo tỉ lệ 15:1, 10:1, 7:1 và AC100% thì thu được 4 phân đoạn mã hóa thành H5.6.2.1 – H5.6.2.4.
Tiếp tục khảo sát H5.6.2.3 (m=103mg) với SKC silica gel pha thường với hệ dung môi H:C theo tỉ lệ 5:1, 3:1 và AC 100% thu được 3 phân đoạn dựa vào SKLM, mã hóa thành H5.6.2.3.1 – H5.6.2.3.3.
Phân đoạn H5.6.2.3.2 thu được với m=20mg thực hiện SKLM thì có vết màu nâu đen nhúng vào H2SO4/EtOH và nung với bếp hồng ngoại thì xuất hiện màu xanh lá và kèm theo nhiều vết mờ. Từ đây tiến hành cạo bảng với hệ dung môi H:C tỉ lệ 2:1 thu được hợp chất BBH7 (m=1.5mg).