3.1. Hoá chất, dụng cụ, thiết bị máy móc :3.1.1.Hoá chất : 3.1.1.Hoá chất :
Natri sunfat khan Na2SO4, axit sunfuric H2SO4, axeton 3.1.2.Dụng cụ ,thiết bị máy móc - ống sinh hàn thẳng - Bình đựng tinh dầu - Bình định mức, bình tam giác - Nồi áp suất - Bơm tiêm
- Các lọ tiêu chuẩn để bảo quản tinh dầu - Bếp điện
- Máy sắc ký khí khối phổ 3.2.Thu hái và bảo quản mẫu cây
3.2.1.Cách chọn mẫu và bảo quản
- Chọn cây đẹp vừa phải không sâu ép làm tiêu bản và xác định tiêu bản - Mẫu đợc lấy nguyên vẹn , không bị mốc , không bị dập nát
- Lấy vào buổi chiều tối , thời tiết đẹp 3.2.2. Địa điểm và thời gian lấy mẫu
Mẫu thí nghiệm đợc lấy ở hai địa điểm khác nhau ở Việt Nam
Mẫu thứ nhất ( ký hiệu BT1 ) lấy ở xã Ixà - KRông Năng - Đắc Lắc, vùng núi Tây nguyên vào ngày 10 – 10 –2003
Mẫu thứ hai ( ký hiệu BT2 ) lấy ở xã Nam Anh – Nam Đàn – Nghệ An, vùng đồng bằng vào ngày 12 – 11 – 2003
3.3. Thí nghiệm tách tinh dầu3.3.1. Bộ dụng cụ : 3.3.1. Bộ dụng cụ :
Có nhiều phơng pháp để tách tinh dầu , đối với bộ phận thân củ cây Gừng chúng tôi dùng phơng pháp cất kéo bằng hơi nớc. Dụng cụ cất tinh dầu gồm nồi cất ( nồi áp suất ), ống sinh hàn thẳng, bình tam giác đợc lắp nh hình vẽ :
( Hình vẽ ở trang sau) 3.3.2. Cách tiến hành
Cho 2,5 kg nguyên liệu tơi đã đợc thái nhỏ và một lít nớc cất vào nồi áp suất, dùng vĩ ngăn cách để cho nguyên liệu không tiếp xúc với đáy nồi .Vặn nắp nồi đủ kín ,dùng bbếp điện đun để cho hơi nớc và tinh dầu bat hơi sang bộ phận làm lạnh ng- ng lại chảy xuống bình định lợng , sau khi tinh dầu và nớc bắt đầu chảy xuống cần điều chỉnh nhiêt độ của bếp vừa phải. Tinh dầu thu đợc nhẹ hơn nớc nổi lên trên, dùng bơm tiêm lấy hết tinh dầu . Đọc thể tích tinh dầu và cho vào lọ.
3.4. Cách làm khô và bảo quản tinh dầu
Tinh dầu sau khi lấy ra từ bình định mức vẫn còn lẩn một ít nớc cho nên cần làm khô bằng cách cho vào lọ đựng tinh dầu một ít tinh thể Na2SO4 rồi để yên một thời gian sau đó dùng bơm tiêm hút sang lọ tiêu chuẩn và bảo quản trong tủ lạnh ở nhiêt độ dới 5°C trớc khi đa đi phân tích .
3.5. Xác định thành phần hoá học tinh đầu Gừng
Thành phần hoá học của tinh dầu Gừng đợc xác định bằng phơng pháp sắc ký khí (GC ) và sắc ký khí – khối phổ ký liên hợp (GC/MS)
+ Sắc ký khí (GC) : Máy Hewlet – Packer 6890 – cột HP – 5 MS (Dài 30 m, đờng kính trong 0,25 mm, lóp phim dày 0,25 àm )
Khí mang He
+ Sắc ký khí - khối phổ liên hợp (GC/MS) :các mẫu đợc phân tích trên máy Hewlet –Packerd 6890 – cột HP - 5 - MS (dài 30 m, đờng kính trong 0,25 mm, lớp phim dày 0,25 àm )
Ghép nối với máy Mass Selective Detector Agilent 5973 Khí mang He
Mẫu tinh dầu BT1 đựng trong 5% n- hexan Mẫu tinh dầu BT2 đựng trong MeOH
Chơng trình giữ nhiệt độ : giữ cột tách ở 60°C trong 2 phút . Sau đó chạy tốc độ 4° C / phút cho tới 220° C và giữ nhiệt độ này trong 20 phút. Rồi lại chạy với tốc độ 20° C/phút cho đến 260° C và giữ lại trong 3 phút .
Th viện khối phổ :NIST 98, dEMO. L, Hppsest. L.