2.3.1. Phương pháp bố trí thí nghiệm
Thí nghiê ̣m gồm 6 nghiệm thức tương ứng với 6 công thức tiêm, mỗi công thức được lă ̣p la ̣i 3 lần, các yếu tố phi thí nghiê ̣m được khống chế giống nhau. Thí nghiệm được bố trí theo phương pháp khối ngẫu nhiên hoàn toàn.
Bảng 2.1. Loại kích dục tố và liều lượng tiêm dùng trong thí nghiệm Công
thức Loại kích dục tố Liều lượng
Số lần lặp
1 LRHa + Dom 40µg +5mg Dom 3
2 LRHa + Dom 50µg +5mg Dom 3
3 HCG 2500 UI 3
4 HCG 3500 UI 3
5 LRHa + HCG 1500 UI HCG + 10µg LRHa +1mg Dom 3 6 LRHa + HCG 2000 UI HCG + 10µg LRHa +1mg Dom 3
Đợt 1
Đợt 2
Đợt 3
Hình 2.1. Sơ đồ bố trí thí nghiệm
Điều kiện thí nghiệm:
Cá bố mẹ kiểm tra thấy đã thành thục hoàn toàn thì cho vào bể, mực nước bể duy trì trong khoảng 1 - 2m, mỗi công thức thí nghiệm có 4 cặp cá Chim Trắng tham gia sinh sản. Các bể phải đảm bảo điều kiện môi trường ban đầu như nhau: Nhiệt độ biến động từ 27 - 32oC, pH từ 6,2 - 6,5 và hàm lượng oxy hòa tan từ 5,1 - 5,5 mg/l. Bể được lắp đặt sục khí để cung cấp hàm lượng oxy cho quá trình ấp trứng và tránh hiện tượng trứng chìm xuống đáy làm hỏng trứng.
Phương pháp thu cá và chọn cá bố mẹ
Cá bố mẹ được thu trong ao bằng lưới, số cá thu vào khoảng 35 - 40 con/đợt thí nghiệm. Bắt ngẫu nhiên và kiểm tra ngoại hình, màu sắc, lỗ sinh dục và hình dạng bụng của cá.
Chọn cá cái:Chọn những cá thể khỏe mạnh, bụng to, mềm, nếu ngửa bụng cá lên, buồng trứng xệ sang hai bên, lỗ sinh dục đỏ hồng. Lúc này sử dụng que thăm trứng để thử trứng. Tính đàn hồi của bụng cá mẹ là một trong những tiêu chuẩn đáng chú ý để chọn cá đẻ.
Thăm trứng: Sử dụng que thăm trứng có độ dài 45 cm, dạng ống dài, một đầu bịt kín và một đầu hở. Bắt ngửa cá nằm trong băng ca. Dùng que thăm trứng đưa vào lỗ sinh dục. Lấy trứng từ hai bên buồng trứng cho ra chén có nước sạch. Quan sát thấy trứng tròn căng, rời nhau và có màu trắng xanh là được.
B1 - CT4 B3 – CT1 B5 – CT6 B2 - CT2 B4 – CT3 B6 – CT5
B1 - CT1 B3 – CT2 B5 – CT6 B2 - CT5 B4 – CT4 B6 – CT3
Chọn cá đực: Chọn những cá thể khỏe mạnh. Khi vuốt nhẹ bụng cá gần phần phụ sinh dục có sẹ đặc chảy ra là được.
Phương pháp tiêm kích dục tố
Tiêm 2 lần: Liều sơ bộ sử dụng 1/3 tổng liều, liều quyết định sử dụng 2/3 tổng liều còn lại, đối với cá đực tiêm vào thời gian tiêm lần 2 của cá cái với liều bằng 1/5 liều tiêm lần 2. Thời gian giữa hai lần tiêm là 6 giờ.
Vị trí tiêm: Tiêm vào gốc vây ngực, chỗ không có vẩy, mũi kim hướng về phía trước và hợp với thân cá một góc45o, độ sâu của mũi kim 1,2 - 1,5cm.
2.3.2. Sơ đồ khối nghiên cứu
Hình 2.2. Sơ đồ khối nghiên cứu 2.4. Phương pháp thu thập số liệu
Xác định các chỉ tiêu môi trường
- Xác định nhiệt độ bằng nhiệt kế thủy ngân
Ảnh hưởng của loại kích dục tố và liều lượng tiêm đến sinh sản cá Chim Trắng (Colossoma brachypomum, Cuvier, 1818) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6
Kết luận và kiến nghị - Thời gian hiệu ứng thuốc - Tỷ lệ đẻ - Sức sinh sản thực tế - Tỷ lệ thụ tinh - Tỷ lệ nở - Tỷ lệ cá bột dị hình - Tỷ lệ ra bột - Năng suất cá bột
- Xác định oxy hòa tan bằng test oxy
Các yếu tố môi trường được đo 2 lần/ngày vào lúc 7h và 14h
Phương pháp xác định các chỉ tiêu sinh học sinh sản của cá Chim Trắng
- Thời gian hiệu ứng thuốc
Thời gian hiê ̣u ứng thuốc được xác định từ khi tiêm liều quyết định đến khi trứng rụng [Nguyễn Tường Anh, 1999].
- Tỷ lệ đẻ Tỷ lệ đẻ (%) = - Sức sinh sản thực tế SSSTT (ngàn trứng/kg cá cái) = - Tỷ lệ thụ tinh Tỷ lệ thụ tinh (%) = - Tỷ lệ nở Tỷ lệ nở (%) =
- Tỷ lê ̣ bô ̣t di ̣ hình
Tỷ lệ bột dị hình (%) = x 100 - Tỷ lệ ra bột Tỷ lệ ra bột (%) = - Năng suất cá bột NSCB (vạn con/kg cá cái) = Xác định tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở
Tổng số cá mới hết noãn hoàng (con) x 100 Tổng số cá nở (con)
Số ấu trùng mới nở (con) x 100 Số trứng đã thụ tinh
Số cá đẻ (con)
x 100 Số cá cái thí nghiệm (con)
Tổng số cá bột thu được (con) Tổng khối lượng cá thí nghiệm (kg) Số trứng thụ tinh
x 100 Số trứng được theo dõi
Số cá bị dị hình (con) Tổng số cá bột nở (con) Số lượng trứng thu được
Khi cá chim trắng đẻ xong ta tính tỷ lệ thụ tinh bằng cách dùng vợt vớt trứng ở tầng mặt, tầng giữa đáy, tầng đáy. Sau đó, tính số lượng trứng thụ tinh và không thụ tinh. Trứng không thụ tinh có màu trắng đực, nhân màu trắng dần dần bị nát. Trứng thụ tinh màu trắng trong, nhân có màu xanh đang phát triển dần. Từ đó ta rút ra được tỷ lệ thụ tinh của cá. Sau đó ta lấy những trứng đã thụ tinh cho vào 3 bát có nước, mỗi bát bỏ 100 trứng và theo dõi tỷ lệ nở của trứng.
Xác định tỷ lệ ra bột
Sau khi cá tiêu hết noãn hoàng ta lấy cốc định lượng bột. Để tính được lượng cá trong cốc ta sử dụng một silanh dung tích 10ml. Lấy nước vào xilanh khoảng 9ml, sau đó cho một lượng cá bột vào đến khi đủ 10ml và đếm số lượng cá bột có trong 1ml cá trên. Sau đó ta nhân lên với thể tích của chén sẽ ra được tỷ lệ ra bột.