Phân loại xạ khuẩn theo ISP

Một phần của tài liệu Góp phàn nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh nhờ streptomyces 183 (Trang 29)

- Chuẩn bị ống giống: giống gốc được nuôi cấy trong ống thạch nghiêng đủ 6-10 ngày.

- Xác định đặc điểm hình thái và sắc tố hòa tan:

 Môi trường xác định: ISP1, ISP2, ISP3, ISP4, ISP5 đã được hấp tiệt trùng, đổ

vào hộp petri, mỗi môi trường làm 4 đĩa. Cấy zigzac bào tử Streptomyces 183.24

lên bề mặt thạch. Ủ ở 28-29°C, tiến hành quan sát sau khi nuôi cấy 7, 14, 21 ngày.

 Màu của khuẩn ty khí sinh: quan sát trực tiếp trên bề mặt khuẩn lạc, có thể có:

màu đỏ (R), màu vàng (Y), xanh lá cây (G), xanh da trời (B), tím (V), xám (Gy), trắng (W). Trường hợp có các màu xen kẽ thì ghi các màu liền nhau.

 Màu của khuẩn ty cơ chất: quan sát mặt sau của khuẩn lạc (mặt dưới đĩa petri),

thường có các màu: vàng nâu, vàng nâu ánh đỏ hoặc da cam, vàng nâu ánh xanh da trời hoặc tím, vàng nâu lẫn xanh lá cây. Nếu thấy các màu trên thì kí hiệu là (1), nếu không thấy thì kí hiệu là (0).

 Chuỗi bào tử và bề mặt bào tử được quan sát dưới kính hiển vi điện tử có độ

 Dạng chuỗi bào tử: thẳng (R), uốn cong (Rf), móc câu (RA), lò xo (S). Nếu chuỗi bào tử có nhiều đặc điểm thì ghi đầy đủ các đặc điểm.

 Bề mặt bào tử có thể có các dạng sau: phẳng nhẵn (sm), sần sùi mụn cơm (wa),

có gai (sp), có tóc (ha).

 Sắc tố hòa tan nằm ngay trong môi trường có các màu: vàng, xanh, đỏ, tím,…

Nếu có thì kí hiệu là (1), nếu không có thì kí hiệu là (0).

- Xác định sắc tố melaninoid (màu đen hoặc nâu đen): nuôi cấy xạ khuẩn trên các môi trường ISP6, ISP7 đã hấp tiệt trùng, quan sát ở ngày thứ 2, 4. Nếu có thì kí hiệu là (1), nếu không có thì kí hiệu là (0).

- Khả năng tiêu thụ nguồn carbon: nuôi cấy bào tử trên các môi trường có chứa các nguồn đường khác nhau (các ISP9), đánh giá ở ngày thứ 12, 14, 16. Nếu bào tử phát triển bằng hoặc mạnh hơn khi nuôi cấy trên môi trường ISP chứa các đường glucose (chứng dương) thì kí hiệu là (+), nếu không phát triển mạnh bằng khi nuôi cấy trên môi trường ISP không có nguồn đường (chứng âm) thì kí hiệu là (-), nếu phát triển không rõ ràng, mạnh hơn chứng âm và kém hơn chứng dương thì kí hiệu là (±).

Một phần của tài liệu Góp phàn nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh nhờ streptomyces 183 (Trang 29)