Lấy 1 ml dịch Methanol, cô cách thuỷ đến cắn, hoà tan trong 1 ml anhydride acetic, đun nóng. Thêm từ từ 1 ml H2SO4 đặc theo chiều dọc của thành ống nghiệm thấy xuất hiện một vòng nâu đỏ giữa bề mặt phân cách 2 chất lỏng (Phản ứng dương tính).
- Phản ứng Hirchshon
Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết Methanol, thêm 1 ml acid Tricloacetic, đun cách thuỷ khoảng 5 phút, thấy dung dịch chuyển từ vàng sang đỏ.(Phản ứng dương tính).
Nhận xét: qua các kết quả trên có thể sơ bộ kết luận trong dược liệu có Saponin Steroid.
■ Đinh tính Anthranoid
- Phản ứng Bontrager:
Cho 2 g bột dược liệu vào bình nón dung tích 100 ml, thêm 50 ml dd. H2SO4 10%, đun sôi cách thuỷ trong 15 phút. Lọc nóng vào bình gạn. Để nguội rồi lắc với 5 ml CHCL3. Gạn lấy phần CHCL3. cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống
Iml dịch chiết.
+ Ống 1: thêm 1 ml NH4OH 10% lắc kỹ để phân lớp, lớp kiềm không có màu hồng.
+ Ống 2: thêm 1 ml NaOH 10% lắc kỹ để phân lớp, lớp kiềm không có màu hồng.
- Vỉ thăng hoa:
Cho vào nút chai nhôm một ít bột dược liệu, đun nhẹ để bay hơi hết nước. Đậy một phiến kính trên có đặt miếng bông tẩm nước lạnh. Đun tiếp khoảng 10 phút. Lấy phiến kính ra, đem soi dưới kính hiển vi. Không thấy tinh thể hình kim màu vàng (Phản ứng âm tính).
Nhận xét: Từ các phản ứng trên có thể sơ bộ kết luận trong dược liệu không có Anthranoid.
■ Đinh tính Coumarỉn
Lấy 5 g bột dược liệu cho vào cốc, thêm 50 ml cồn 90^. Đun cách thuỷ sôi 5 phút, lọc nóng qua giấy lọc. Dịch lọc thu được làm các phản ứng:
- Phản ứng mở - đóng vòng lacton :
Cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 1 ml dịch chiết: + Ống 1: Thêm 0,5 ml dd. NaOH 10%.
+ Ống 2: Để nguyên.
Đun cả 2 ống nghiệm đến sôi, để nguội. Quan sát thấy: + Ống 1: Tủa đục màu vàng nâu.
+ Ống 2: Trong.
Thêm vào cả 2 ống nghiệm, mỗi ống 2 ml nước cất. Lắc đều, thấy: + Ống 1: Tủa không tan.
+ Ống 2: Xuất hiện tủa, dung dịch đục.
Thêm vào ống 1 vài giọt HCl đặc: Tủa tan, dung dịch trong. - Phản ứng dỉazo hoá:
Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết, thêm 2 ml dd.NaOH 10%. Đun cách thuỷ sôi 5 phút rồi để nguội. Thêm vài giọt TT. diazo mới pha. Không thấy xuất hiện màu đỏ gạch (Phản ứng âm tính).