đường kớnh vũng khỏng là 25 mm, cũn lại cỏc phõn đoạn khỏc đều cú khả năng khỏng ở mức trung bỡnh.
Từ kết quả trờn cũng cho ta thấy một điều là cỏc phõn đoạn dịch chiết từ vỏ quả măng cụt cú khả năng khỏng đối với nhiều chủng vi khuẩn hơn và mức độ khỏng mạnh hơn so với cỏc phõn đoạn dịch chiết từ lỏ măng cụt. Điều này hoàn toàn phự hợp với cỏc nghiờn cứu dược học về măng cụt.
a) b)
Hỡnh 3.11. Một số hỡnh ảnh về khả năng khỏng vi sinh vật của dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt
a) Khả năng khỏng vi khuẩn Staphylococcus aureus b) Khả năng khỏng vi khuẩn Salmonella
typhi
1- ethanol vỏ quả; 2- n-hexan vỏ quả; 3- chloroform vỏ quả; 4- ethylacetat vỏ quả; 4’- ethyl acetat lỏ lỏ
Bảng 3.14. Kết quả khỏng khuẩn của cỏc phõn đoạn dịch chiết từ vỏ quả và lỏ măng cụt
stt Phõn đoạn dịch chiết Loại vi khuẩn
E. Coli Staphylococcus aureus Salmonella typhi Bacillus subtilis
KNK D - d KNK D - d KNK D - d KNK D - d 1 Vỏ quả Ethanol +++ 30 mm - 0 mm +++ 25 mm ++ 10 mm n-Hexan ++ 20 mm - 0 mm +++ 22 mm ++ 8 mm Chloroform +++ 30 mm + 7 mm ++ 11 mm - 0 mm Ethylacetate +++ 32 mm ++ 15 mm ++ 12 mm +++ 35 mm 2 Lỏ Ethanol ++ 15 mm ++ 12 mm - 0 mm + 7 mm n-Hexan +++ 25 mm + 6 mm - 0 mm + 7 mm Chloroform ++ 15 mm - 0 mm - 0 mm - 0 mm Ethylacetate ++ 17 mm - 0 mm ++ 12 mm ++ 15 mm
Ghi chỳ: KNK: khả năng khỏng khuẩn. d = 10 mm. D – d: đường kớnh vũng khỏng
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận:
Từ kết qủa thu được trong quỏ trỡnh thực nghiệm, chỳng tụi đưa ra những kết luận sau:
1. Thành phần hoỏ học cơ bản của vỏ quả măng cụt là cỏc hợp chất polyphenol, trong đú cú nhiều tannin và flavonoid; hàm lượng polyphenol tổng số (trong 100 g nguyờn liệu) trong phõn đoạn ethanol là 13,152 g (13,152%), phõn đoạn ethyl acetat là 5,032 g (5,032%). Trong lỏ măng cụt cú chứa nhiều polyphenol, alkaloid; hàm lượng polyphenol (trong 100 g nguyờn liệu) trong phõn đoạn dịch chiết ethanol là 8,062 g (8,062%), phõn đoạn ethyl acetat là 4,352 g (4,352%).
2. Đó tạo được mụ hỡnh chuột bộo phỡ bằng thức ăn cú hàm lượng lipid cao sau 21 ngày nuụi, trong đú trọng lượng cơ thể của lụ chuột bộo phỡ tăng 2,1 lần so với lụ chuột ăn thức ăn bỡnh thường. Cỏc chỉ số hoỏ sinh trong mỏu chuột như lipid, glucose mỏu... của lụ chuột bộo phỡ đều tăng so với lụ chuột ăn thức ăn bỡnh thường: cholesterol (tăng 30,34%), triglycerid (tăng 18,58%), glucose (tăng 47,25%), LDL-C (tăng 33,34%), cũn HDL-C (giảm 9,09%).
3. Sau 10 ngày cho chuột bộo phỡ thực nghiệm uống phõn đoạn dịch chiết ethanol và ethylacetat từ vỏ quả và lỏ măng cụt, trọng lượng và cỏc chỉ số hoỏ sinh:cholesterol, triglycerid, glucose, LDL-C trong mỏu chuột đều giảm, cũn HDL- C thỡ tăng lờn. Tỏc dụng của cỏc phõn đoạn dịch chiết từ vỏ quả măng cụt lờn trọng lượng chuột, cỏc chỉ số hoỏ sinh trong mỏu chuột tốt hơn so với cỏc phõn đoạn dịch chiết từ lỏ măng cụt.
4. Đó xỏc định được khả năng ức chế một số chủng vi khuẩn thụng thường:
E. Coli, Salmonella typhi, Bacillus subtilis , Staphylococcus aureus từ cỏc phõn
đoạn dịch chiết vỏ quả và lỏ măng cụt. Trong đú phõn đoạn Ettyl acetat vỏ quả
măng cụt cú khả năng khỏng mạnh nhất với cỏc chủng vi khuẩn E.Coli (D - d = 32mm), Staphylococcus aureus (D – d = 15mm), Bacillus subtilis (D – d = 35mm);
phõn đoạn Ethanol vỏ quả măng cụt cú khả năng khỏng mạnh nhất với cỏc chủng vi
khuẩn Salmonella typhi (D – d = 25mm).
Kiến nghị:
1. Tiếp tục nghiờn cứu tỡm hiểu sõu hơn về thành phần hoỏ học của cỏc hợp chất tự nhiờn cú trong vỏ quả và lỏ măng cụt, đặc biệt là xỏc định cấu trỳc hoỏ học của một số hợp chất từ phõn đoạn ethyl acetat vỏ quả măng cụt cú tỏc dụng giảm trọng lượng chuột bộo phỡ và giảm cỏc chỉ số hoỏ sinh trong mỏu chuột bộo phỡ như glucose huyết, cholesterol, triglycerid...
2. Tiếp tục nghiờn cứu tỏc dụng chống rối loạn trao đổi glucid – lipid của cỏc phõn đoạn dịch chiết từ vỏ quả và lỏ măng cụt trờn cỏc hệ dung mụi khỏc.
3. Tiếp tục nghiờn cứu tạo mụ hỡnh đỏi thỏo đường type 2 và nghiờn cứu tỏc dụng hạ đường huyết của cỏc phõn đoạn dịch chiết từ lỏ và vỏ quả măng cụt trờn cỏc hệ dung mụi khỏc nhau.
DANH MỤC CÁC BẢNG, HèNH, SƠ ĐỒ
Trang Bảng 1.1. Phõn loại BMI của người trưởng thành Chõu Âu và Chõu Á 17 Bảng 1.2. Phõn loại rối loạn lipid mỏu theo Fredickson 22 Bảng 1.3. Chi phớ điều trị bệnh bộo phỡ ở một số nước trờn thế giới 25 Bảng 2.1. Bảng kết quả xõy dựng đường chuẩn acid gallic 36 Bảng 3.1. Hiệu suất điều chế cỏc phõn đoạn từ lỏ và vỏ quả măng cụt 42
Bảng 3.2. Kết quả thử định tớnh cỏc lớp chất của dịch chiết từ lỏ và vỏ quả măng cụt
45 Bảng 3.3. Kết quả định lượng polyphenol tổng số 47 Bảng 3.4. Kết quả thử độc tớnh cấp theo đường uống 48 Bảng 3.5. Thành phần thức ăn cú hàm lượng lipid và cholesterol cao 49 Bảng 3.6. Trọng lượng trung bỡnh cỏc lụ chuột sau 3 tuần nuụi theo mụ hỡnh gõy bộo phỡ thực nghiệm
49
Bảng 3.7. Một số chỉ số hoỏ sinh của cỏc lụ chuột thớ nghiệm 52 Bảng 3.8. Trọng lượng chuột trước và sau 10 ngày điều trị 54 Bảng 3.9. Chỉ số glucose huyết (mmol/l) trước và sau 10 ngày điều trị 57 Bảng 3.10. Chỉ số cholesterol (mmol/l) trước và sau 10 ngày điều trị 59 Bảng 3.11. Chỉ số triglycerid (mmol/l) trước và sau 10 ngày điều trị 61 Bảng 3.12. Chỉ số HDL (mmol/l) trước và sau 10 ngày điều trị 63 Bảng 3.13. Chỉ số LDL (mmol/l) trước và sau 10 ngày điều trị 65 Bảng 3.14. Kết quả khỏng khuẩn của cỏc phõn đoạn dịch chiết từ vỏ quả và lỏ măng cụt
69
Hỡnh 1.1. Khung cacbon của flavonoid 7
Hỡnh 1.2. Cấu trỳc chung của flavonoid(A), izoflavonoid(B) và neoflavonoid(C)
7
Hỡnh 2.1. Cõy măng cụt non 30
Hỡnh 2.2. Quả và vỏ quả Măng cụt 30
Hỡnh 3.1. Ảnh chạy sắc kớ đồ dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt 43 Hỡnh 3.2. Trọng lượng trung bỡnh của cỏc lụ chuột trước và sau 21 ngày nuụi
50
Hỡnh 3.3. Chuột thường và chuột bộo phỡ sau 21 ngày nuụi với 2 chế độ ăn khỏc nhau
50
nghiệm
Hỡnh 3.5. Tỏc dụng làm giảm trọng lượng cơ thể của một số phõn đoạn dịch chiết vỏ quảvà lỏ măng cụt đối với chuột bộo phỡ thực nghiệm
55
Hỡnh 3.6. Tỏc dụng của phõn đoạn dịch chiết lờn glucose trong mỏu chuột 57 Hỡnh 3.7.Tỏc dụng của phõn đoạn dịch chiết lờn cholesterol trong mỏu chuột
60
Hỡnh 3.8. Tỏc dụng của phõn đoạn dịch chiết lờn triglyxerit trong mỏu chuột
62
Hỡnh 3.9. Tỏc dụng của phõn đoạn dịch chiết lờn HDL trong mỏu chuột 64 Hỡnh 3.10. Tỏc dụng của phõn đoạn dịch chiết lờn HDL trong mỏu chuột 66 Hỡnh 3.11. Một số hỡnh ảnh về khả năng khỏng vi sinh vật của dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt
68
Sơ đồ 3.1. Qui trỡnh tỏch, chiết lỏ măng cụt khụ (Garcinia mangostana L.) 40
Sơ đồ 3.2. Qui trỡnh tỏch, chiết vỏ quả măng cụt tươi(Garcinia mangostana L.)
41
DANH MỤC CÁC Kí HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT
BMI: chỉ số khối lượng cơ thể HDL: Hight density lipoprotein
HDLC: Hight density lipoprotein – cholesterol LDL: Low Density lipoprotein
LDLC: Low Density lipoprotein – cholesterol LD50: Liều độc cấp
VLDL:Very Low Density lipoprotein
VLDLC:Very Low Density lipoprotein – cholesterol MỤC LỤC
Trang Phụ bỡa
Lời cỏm ơn Lời cam đoan Mục lục
Danh mục cỏc ký hiệu, cỏc chữ viết tắt Danh mục cỏc bảng, hỡnh, sơ đồ
Mở đầu 1
Nội dung 5
Chương 1. Tổng quan tài liệu 5
1.1. Cỏc hợp chất phenol và polyphenol 5
1.1.1. Cấu tạo và phõn loại 5
1.1.2. Vai trũ của cỏc hợp chất phenol và polyphenol thực vật 5 1.1.3. Một số polyphenol quan trọng trong thực vật 6
1.1.3.1. Flavonoid 6
1.1.3.2. Tannin 15
1.2. Bệnh bộo phỡ 17
1.2.1. Bệnh bộo phỡ và tỡnh hỡnh nghiờn cứu trong và ngoài nước 17 1.2.2. Cỏc yếu tố gõy bệnh thừa cõn và bộo phỡ 19 1.2.3. Một số chỉ số hoỏ sinh liờn quan dến rối loạn trao đổi chất lipid
và glucid
21
1.2.4. Rối loạn lipid mỏu và thuốc điều trị 22 1.2.5. Bệnh lý phỏt sinh do bộo phỡ và chiếnlược điều trị 23 1.3. Đặc điểm một số chủng vi sinh vật nuụi trong phũng thớ nghiệm 26
1.3.1. Bacillus subtilis 26
1.3.2. E. coli 26
1.3.3. Samonella typhi 26
1.3.4. Staphylococcus aureus 27
1.4.1. Đặc điểm thực vật học 27
1.4.2. Phõn bố hỡnh thỏi 27
1.4.3. Tỏc dụng dược lý 27
1.4.4. Tớnh vị và cụng năng 28
1.4.5. Thành phần hoỏ học 28
Chương 2. Đối tượng và phương phỏp nghiờn cứu 30
2.1. Đối tượng nghiờn cứu 30
2.1.1. Mẫu thực vật 30 2.1.1. Mẫu động vật 30 2.1.3. Mẫu vi sinh vật 30 2.2. Dụng cụ và hoỏ chất 31 2.2.1. Dụng cụ 31 2.2.2 Hoỏ chất 31
2.3. Phương phỏp nghiờn cứu 31
2.3.1. Qui trỡnh chiết xuất 31
2.3.2. Khảo sỏt thành phần hoỏ học của lỏ và vỏ măng cụt 32
2.3.3. Sắc ký lớp mỏng 34
2.3.4. Định lượng polyphenol tổng số 35
2.3.5. Tạo mụ hỡnh chuột gõy bộo phỡ thực nghiệm 36 2.3.6. Nghiờn cứu tỏc dụng giảm trọng lượng cơ thể chuột bằng một số phõn đoạn dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt
36
2.3.6.1. Thử độc tớnh cấp, xỏc định LD50 bằng đường uống 36 2.3.6.2. Mụ hỡnh bố trớ thớ nghiệm nuụi chuột bộo phỡ thực nghiệm 36 2.3.6.3. Xỏc định một số chỉ số hoỏ sinh trong mỏu chuột trước và sau
khi điều trị bằng dịch chiết
37
2.3.7. Phương phỏp thử hoạt tớnh khỏng vi sinh vật kiểm định 38 2.3.8. Xỏc xuất thống kờ toỏn học xử lý số liệu 39
Chương 3. Kết quả và thảo luận 40
3.2. Khảo sỏt sơ bộ thành phần hoỏ học của phần chiết 44 3.3. Định lượng polyphenol tổng số từ cỏc phõn đoạn dịch chiết 46 3.4. Thử độc tớnh cấp,xỏc định LD50 của dịch chiết ethanol và ethylacetat
từ lỏ và vỏ quả măng cụt bằng đường uống
47
3.5. Tạo mụ hỡnh chuột bộo phỡ thực nghiệm 48
3.6. Tỏc dụng của một số phõn đoạn dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt lờn chuột gõy bộo phỡ thực nghiệm
53
3.6.1. Tỏc dụng giảm trọng lượng cơ thể 53
3.6.2. Tỏc động của dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt lờn một số chỉ số hoỏ sinh trong mỏu chuột.
56
3.6.2.1. Nồng độ glucose (mmol/l) mỏu chuột 56 3.6.2.2. Nồng độ cholesterol (mmol/l) mỏu chuột 58 3.6.2.3. Nồng độ triglycerid (mmol/l) mỏu chuột 60
3.6.2.4. Nồng độ HDL mỏu chuột 62
3.6.2.2. Nồng độ LDL mỏu chuột 64
3.7. Hoạt tớnh khỏng vi sinh vật kiểm định 66
Kết luận và kiến nghị 70
Tài liệu tham khảo Phụ lục
PHỤ LỤC
1. Một số hỡnh ảnh về khả năng khỏng vi sinh vật của dịch chiết lỏ và vỏ quả măng cụt
Ảnh 1. Khả năng khỏng Bacillus subtilis.
Ảnh 3. Khả năng khỏng Salmonella typhi
Ảnh 4. Khả năng khỏng Staphylococcus aureus
Ghi chỳ:
(1’) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết ethanol lỏ măng cụt
(2’) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết n-hexan lỏ măng cụt (3’) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết choroform lỏ măng cụt
(4’) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết ethylacetat lỏ măng cụt
(2) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết n-hexan vỏ quả măng cụt
(3) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết choroform vỏ quả măng
cụt
(4) Khả năng khỏng vi sinh vật của phõn đoạn dịch chiết ethylacetat vỏ quả măng
cụt ĐC: Đối chứng 2. Một số hỡnh ảnh về người mắc bệnh bộo phỡ A B C D Ảnh 5. Trẻ em bộo phỡ
Ghi chỳ: A,D. Một bộ trai Trung Quốc mới 3 thỏng tuổi nặng 11 kg B. Bộ Suman (Ấn Độ) 5 tuổi, cao 1m nặng 76 kg