Đậu Ma chịu hạn tốt nên thường đư c dùng làm cây thức ăn xanh ở mùa khô, có giá trị inh ưỡng ca , hông độc và có thể chế biến thành bột c . Nó thường đư c trồng chung với c S để tăng kh năng chăn th tr ng điều kiện ở miền Đông.
Bảng 2.6: Thành phần hóa học của Đậu Ma
Tác giả % DM
% theo DM
CP CF Ash
Dương Thanh Liêm (1981) 19,6 23,5 30,0 -
Ngô Văn ận (1981) 22,23 14,48 29,83 6,64
Đậu Ma giàu protein, vitamin và khoáng với năng suất 34 tấn/ha/năm th s n suất đư c 8,5 tấn bột c tương đương với 1,4 tấn. Trong bột c chứa Ca 0,37%, P 0,43%, và h áng vi ư ng (ppm): Fe 218, Mn 29, Zn 25, Cu 5 và caroten 297 mg/kg (Nguyễn Thị Hồng Nhân, 2010).
Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian và địa điểm thí nghiệm
Thí nghiệm đư c tiến hành từ tháng 9 đến tháng 11 ở phòng thí nghiệm Thức ăn gia s c, h a Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, hu II, trường Đại học Cần Thơ.
3.2 Phương tiện và điều kiện thí nghiệm 3.2.1 Phương tiện
Bộ chưng cất Kjeldahl, bộ công phá mẫu, bình Kjeldahl, bộ chuẩn độ Tủ sấy, tủ nung, cân phân tích
Crusible, cốc nung, bình tam giác, dao, kéo, và các dụng cụ khác...
3.2.2 Hóa chất
Nước cất
H2SO4 đậm đặc (Trung Quốc), H2SO4 0,1N (ống chuẩn)
NaOH (Trung Quốc)
Axit Boric (Merck)
Chỉ thị màu: Phenolphtalein, Methyl Red, Bromocresol green (Merck)
3.3 Phương pháp thí nghiệm 3.3.1 Bố trí thí nghiệm:
Thí nghiệm đư c tiến hành trên 5 mẫu c Đậu: Đậu Rồng h ang, Đậu Biếc, Đậu Ma, Siratro và Kudzu.
Mẫu đư c thu c t từ những đám c y, ụi Đậu mọc hoang ở hu II Đại học Cần Thơ (v ng đất tốt) và hu a An (v ng đất phèn).
Mẫu đư c lấy hoàn toàn ngẫu nhiên để điều tra năng suất và thành phần hóa học với ba lần lặp lại cho m i loại mẫu.
3.4 Điều tra năng suất của các giống cỏ Đậu thí nghiệm
Phương pháp: Năng suất của các giống c Đậu đư c xác định bằng cách thu hoạch và cân khối ư ng thu đư c của 1m2 c t đư c (lấy phần n n ăn đư c). Tiến hành lấy mẫu ba lần lặp lại cân và tính khối ư ng trung bình.
3.5 Phân tích thành phần hóa học
Mẫu bình quân: Mẫu c Đậu an đầu sẽ đư c c t nh , sau đ tr i đều trên khay hình chữ nhật, lấy ngẫu nhiên th phương pháp đường chéo kho ng 200g mẫu.
Mẫu phân tích: Mẫu nh u n đư c sấy ở 650 đến khi khô giòn, cân khối ư ng mẫu ở trạng thái gần khô rồi đ m nghiền mịn ta đư c mẫu phân tích. Mẫu ph n t ch đư c chứa trong hộp nhựa có n p đậy kín.
Tiến hành phân tích thành phần hóa học DM, CP, CF, Ash theo quy trình tiêu chuẩn của AOAC (1990).
3.5.1 Xác định hàm lượng vật chất khô (DM)
Nguyên tắc
Dùng sức n ng để làm bay hết nước trong mẫu. Cân trọng ư ng mẫu trước và sau khi sấy khô từ đ t nh ra phần trăm nước có trong mẫu.
Xác định hàm lượng nước ban đầu (h1)
Mẫu trước khi sấy ph i đư c c t nh
Sấy khai nhôm ở 90 – 1000 tr ng 30 ph t và c n đến khối ư ng hông đổi
Cân kho ng 100 – 500g (tùy thuộc vào từng loại mẫu) cho vào tủ sấy ở 650C trong vòng 6 – 8h, có thể sấy u hơn nếu mẫu nhiều nước, lấy ra để nguội và c n đến khi khối ư ng hông đổi.
Xác định hàm lượng nước ở trạng thái gần khô
Xác định trọng lượng vật chứa: chén sứ
Đánh số và tráng bằng nước cất Sấy ở 1050C trong 2 giờ
Cân ngay có khối ư ng P1
Sấy tiếp 30 phút và cân ta có trọng ư ng P2. Nếu P1 - P2 ≤ 0,003 gam ta có trọng ư ng P’2 của chén sứ
Cân mẫu
Cân kho ng 1 gam mẫu (W) cho vào chén sứ đ xác định trọng ư ng Sấy ở 1050C trong vòng 4 – 5 giờ, cân có khối ư ng P’1
Sấy tiếp 30 phút cân ta có khối ư ng P’2. Nếu P’1 – P’2 ≤ 0,003 ta có trọng ư ng P’2 của chén và mẫu ở trạng thái khô hoàn toàn
Tính kết quả
'
àm ư ng nước toàn phần H = 100 ) 100 ( 1 2 1 h h h
: hàm ư ng nước toàn phần của mẫu thức ăn (%) h1 hàm ư ng nước an đầu (%)
h2 hàm ư ng nước còn lại (%)
3.5.2 Xác định hàm lượng Protein thô (CP)
Nguyên tắc
Mẫu đư c vô cơ h a ằng axit sulfuaric đun n ng với sự có mặt của chất xúc tác nitrogen, protein bị phân gi i thành NH3, NH3 lập tức biến thành (NH4)2SO4. Tác dụng với một chất kiềm mạnh NH3 lại đư c gi i phóng kh i dung dịch axit. ăn cứ và ư ng axit tiêu hao khi trung hòa NH3 ta sẽ tính đư c ư ng nitrogen tổng số và suy ra ư ng protein thô.
Ph n ứng x y ra như sau:
Ví dụ với axit amin glycin NH2-CH2-COOH
NH2-CH2-COOH + 3H2SO4 →2CO2↑ + 3 O2↑ + 4 2O + NH3 NH3 + H2SO4 → (N 4)2SO4 (NH4)2SO4 + 2NaO → Na2SO4 + 2NH3↑ + 2 2O NH3 + H3BO3 → N 4H2BO3 NH4H2BO3 + H2SO4 → 3BO3 + NH4HSO4 Cân mẫu
Cân kho ng 0,1 gam mẫu cho vào bình công phá. Hiệu số giữa bình có chứa mẫu và bình không có chứa mẫu là khối ư ng của mẫu (W)
Cho lần ư t vào bình 0,3 gam chất xúc tác 0,7 ml H2O2, để yên 3 – 4 phút. Rót tiếp 5 – 7 ml H2SO4 đậm đặc, nếu mẫu chứa nhiều béo thì thêm 1 ml cồn tuyệt đối để tránh sôi trào.
Công phá trong lò công phá có bộ điều nhiệt, hi đun thấy có khói tr ng bay lên, mẫu chuyển sang màu đ n và sôi đều. Đun đến khi mẫu tr ng ra (45 ph t đến 2 giờ tùy loại mẫu). Việc công phá tiến hành trong tủ h t h độc.
Chưng cất
Rửa sạch hệ thống sinh hơi ằng nước cất, hút 10 ml axit boric 2% (có thuốc thử Methyl red + Bromocresol green) vào bình tam giác 50 ml. Đặt bình nhận sa ch đầu mút của ống ngưng ngập trong axit boric.
Cho NaOH 33% vào bình Kjeldahl có mẫu chưng cất, mở khóa bình sinh hơi. hưng cất ch đến khi dung dịch trong bình mẫu chuyển sang màu hồng, và dung dịch trong bình hứng ngập xấp xỉ 50 ml.
Lấy bình tam giác ra. Chờ nước ở ống b t khí vừa xuống hết, lấy bình Kjeldahl chứa mẫu ra.
Dùng dung dịch H2SO4 0,1N để định ph n ch đến khi dung dịch axit boric chuyển từ màu xanh sang màu đ cam thì dừng lại. Ghi nhận thể tích H2SO4.
Tính kết quả
àm ư ng nitơ tổng số đư c tính theo công thức sau:
N% = 100 W 0,014 N ) V - (V ' = N tổng số N%: tỉ lệ phần trăm của N có trong mẫu
V: thể tích H2SO4 ng ch định phân mẫu (ml) V’: thể tích H2SO4 ng ch định phân mẫu tr ng (ml) N: độ nguyên chuẩn của dung dịch H2SO4
W: trọng ư ng mẫu (g) 0,014 hệ số tính ra N
àm ư ng protein thô sẽ đư c uy đổi tương đương CP% = N% x 6,25
3.5.3 Xác định hàm lượng xơ thô (CF)
Nguyên tắc
Mẫu thức ăn nghiền nh đư c xử lí lần ư t bằng H2SO4 và azơ loãng đư c đun n ng sau đ rửa bằng cồn và ether. Sau khi xử đ m nung, trọng ư ng phần đ mất đi à chất xơ thô
Phân tích
Cân kho ng 1 gam (W) mẫu cho vào becher 250 ml. Cho vào 100 ml H2SO4 0,765N, đun sôi nhẹ tr ng 10 ph t, để nguội và lọc qua crusible, rửa vài lần bằng nước cất
Tiếp tục chuyển mẫu và ch r, ch và 10 m NaO 25% và nước cất đến 100 ml. Tiếp tục đung tr ng 10 ph t, để nguội lọc rửa bằng nước cất ch đến khi sạch xút. Cuối cùng rửa bằng cồn và ether.
Cho crusible có chứa mẫu vào tủ sấy, sấy ở 1050C trong vòng 5 giờ, đ m c n c hối ư ng P1. Sấy tiếp tục ch đến khi sai số giữa hay lần c n hông vư t uá 0,03 à đư c.
Đặt crusible và tủ nung, chỉnh nhiệt độ 5000
C và nung trong 3 giờ. Để nguội và cân có trọng ư ng P2 Tính kết quả % Xơ thô = 100 W P P1 2
P1: trọng ư ng chén và mẫu sau khi sấy (g) P2: trọng ư ng chén và mẫu sau khi nung (g) W: khối ư ng mẫu đ m ph n t ch (g)
3.5.4 Xác định hàm lượng khoáng tổng số (Ash)
Nguyên tắc
Mẫu thức ăn sau hi thiêu cháy ở nhiệt độ cao 550 – 6000C chất hữu cơ sẽ bị hủy hết, chất còn lại là tro thô (khoáng toàn phần)
Phân tích
Đánh số chén nung bằng dung dịch clorua s t III, tráng bằng nước cất. Sấy ít nhất 2 giờ trong tủ sấy 100 – 1050C
Cân có trọng ư ng P1
Cân kho ng 1 gam mẫu ở trạng thái khô không khí (W) cho vào chén nung đ iết trọng ư ng.
Nung mẫu ở 550 – 6000C trong 2 giờ, để nguội và cân có trọng ư ng P2 (làm nhẹ nhàng tránh tro có thể bốc bay) Tính kết quả % Tro = 100 W P P1 2
P1: khối ư ng chén và mẫu khi sấy (g) P2: khối ư ng chén và mẫu khi nung (g) W: khối ư ng mẫu đ m ph n t ch (g)
3.6 Xử lí số liệu
Số liệu thu thập đư c tính giá trị trung bình các lần lặp lại, độ lệch chuẩn. Xử lí số liệu bằng chương tr nh inita R as 13.2 (2000) để so sánh
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết quả năng suất
Năng suất và thành phần hóa học của các loại c Đậu thí nghiệm so sánh giữa hai v ng đất tốt và đất phèn Hòa An
Bảng 4.1: Năng suất và thành phần hóa học của các loại cỏ Đậu theo vùng
Chỉ tiêu Đất tốt Đất phèn P Năng suất (tấn/ha/ ứa) 26,33±4,19 22,67±5,41 0,047 VCK (%) 23,87±1,13 23,90±1,17 0,951 CP (%) 22,61±4,24 22,53±4,20 0,959 CF (%) 22,85±5,04 22,31±4,92 0,766 Ash (%) 7,78±0,448 7,41±0,616 0,068 Năng suất 20 21 22 23 24 25 26 27 Đất tốt Đất phèn T ấ n /h a /lứ a Năng suất
Hình 4.1: Năng suất các loại cỏ Đậu theo từng vùng
Năng suất chất xanh là một trong những yếu tố quan trọng nhất đánh giá hiệu qu khi trồng cây thức ăn gia s c. Th ết qu cho thấy các giống họ
trị pH của đất. Năng suất xanh thu đư c ở v ng đất tốt ca hơn nhiều so với năng suất c y v ng đất phèn. Sự khác biệt này c nghĩa thống kê (P < 0,05).
Nhưng sự khác biệt về thành phần hóa học của các loại cây giữa hai vùng có (P > 0,05) nên đ y à sự khác biệt hông c nghĩa.
0 5 10 15 20 25 30 DM CP CF Ash % Đất tốt Đất phèn
Hình 4.2: Thành phần hóa học của các loại cỏ Đậu theo từng vùng
Tiến hành trên cùng những loại c y như nhau và thực hiện các phương pháp phân tích hoàn toàn giống nhau cho tất c các mẫu. Từ kết qu phân tích cho thấy năng suất có sự chênh lệch nhưng thành phần hóa học của các cây ít có sự chênh lệch giữa hai vùng. Từ đ có thể rút ra kết luận rằng nếu muốn tăng giá trị inh ưỡng của cây thức ăn th ta ph i tăng đư c năng suất của chúng.
4.2 Thành phần hóa học cây vùng đất tốt
sánh hàm ư ng DM ta thấy u zu c hàm ư ng DM cao nhất 25,07% kế đến à Đậu Biếc 25,25%, Đậu Ma và Đậu Rồng hoang có DM tương đương nhau ần ư t à 23,33% và 23,19%, iratr c hàm ư ng DM thấp nhất 22,53%.
àm ư ng xơ thô của Kudzu là cao nhất 29,38% kế đến là Siratro 27,83%, Đậu Biếc 20,74%, Đậu Ma 18,62% và thấp nhất à Đậu Rồng hoang 17,09%. àm ư ng khoáng tổng số không chênh lệch nhiều a động từ 7,22
Bảng 4.2: Thành phần hóa học của các loại cỏ Đậu ở vùng đất tốt Nghiệm thức %DM % theo DM CP CF Ash ĐRH 23,19±0,05 25,58±0,97 17,69±1,12 8,24±0,32 Đậu Biếc 25,25±0,19 27,01±0,39 20,74±1,22 7,92±0,33 Đậu a 23,33±0,23 21,54±0,33 18,62±0,47 7,58±0,24 Siratro 22,53±0,03 23,53±1,14 27,83±0,40 7,94±0,28 Kudzu 25,07±0,09 15,39±0,50 29,38±0,42 7,22±0,37
Kết qu hàm ư ng P. Đối với cây họ Đậu hàm ư ng protein có ý nghĩa uan trọng trong việc cung cấp protein cho gia súc. Đậu Biếc có hàm ư ng CP cao nhất 27,01% kế đ à Đậu Rồng hoang 25,58%, Siratro 23,53%, Đậu Ma 21,54% và thấp nhất là Kudzu 15,39%.
4.3 Thành phần hóa học cây vùng đất phèn
àm ư ng DM của u zu và Đậu Biếc gần bằng nhau lần ư t là 25,20 và 25,30%, kế đến à iratr 23,26%, Đậu Rồng h ang và Đậu Ma có hàm ư ng DM lần ư t là 22,78% và 22,96%
sánh hàm ư ng xơ thô ta thấy Kudzu có hàm ư ng CF cao nhất 29,07% và thấp nhất à Đậu Biếc 17,45%.
Tương tự với kết qu ở trên ta thấy hàm ư ng CP của Đậu Biếc là cao nhất 26,70% kế đ à Đậu Rồng h ang 25,49%, iratr 23,13% , Đậu Ma 21,96% và thấp nhất là Kudzu 15,38%.
Bảng 4.3: Thành phần hóa học của các loại cỏ Đậu ở vùng đất phèn
Nghiệm thức % DM % theo DM CP CF Ash ĐR 22,78±0,13 25,49±1,48 19,16±1,01 7,55±0,53 Đậu Biếc 25,30±0,03 26,70±0,57 17,45±1,00 6,59±0,19 Đậu a 22,96±0,19 21,96±0,79 19,03±0,24 7,95±0,33 Siratro 23,26±0,56 23,13±1,60 26,82±0,98 7.93±0,07 Kudzu 25,20±0,05 15,38±0,72 29,07±0,66 6,70±0,29
Từ đ y có thể thấy có một sự chênh lệch nh giữa thành phần hóa học giữa các cây ở hai v ng đất tuy nhiên sự chênh lệch là không nhiều.
4.4 Thành phần hóa học Đậu Rồng hoang
àm ư ng DM ở v ng đất tốt à 23,19% ca hơn ở v ng đất phèn 22,78%, F v ng đất tốt à 17,69%, v ng đất ph n ca hơn 19,16%. àm ư ng h áng v ng đất tốt ca hơn à 8,24% v ng đất phèn 7,55%.
Bảng 4.4: Kết quả thành phần hóa học Đậu Rồng hoang theo từng vùng
àm ư ng CP không có sự chênh lệch nhiều giữa hai vùng cụ thể hàm ư ng CP giữa hai v ng đất tốt và đất phèn lần ư t là 25,58% và 25,49%. àm ư ng P ph n t ch ca hơn ết qu của Nguyễn Văn Thu và Nguyễn Thị im Đông (2009) c P 23,1%, Vũ Thị Kim Anh (2011) là 22,1%. Thí nghiệm của các tác gi trên cây có sự tác động của phân bón và lứa c t khác nhau. 0 5 10 15 20 25 30 DM CP CF Ash % Đất tốt Đất phèn Vùng % DM % theo DM CP CF Ash Đất tốt 23,19±0,05 25,58±0,97 17,69±1,12 8,24±0,32 Đất phèn 22,78±0,13 25,49±1,48 19,16±1,01 7,55±0,53
4.5 Thành phần hóa học của Đậu Biếc
àm ư ng DM của Đậu Biếc ở hai v ng đất gần bằng nhau cụ thể ở v ng đất tốt có DM là 25,25% ở v ng đất phèn có DM là 25,30%.
Bảng 4.5: Kết quả thành phần hóa học Đậu Biếc theo từng vùng
àm ư ng xơ thô ở v ng đất tốt 20,74% ca hơn v ng đất phèn 17,45%. àm ư ng khoáng của v ng đất tốt cũng ca hơn v ng đất phèn.
0 5 10 15 20 25 30 DM CP CF Ash % Đất tốt Đất phèn
Hình 4.4: Thành phần hóa học Đậu Biếc theo từng vùng
sánh hàm ư ng CP với một số kết qu khác ta thấy kết qu ca hơn của Gomez and Kalamani (2003) có CP 21,6% và kết qu của Nguyễn Thiết (2012) là 19,36%. Vùng % DM % theo DM CP CF Ash Đất tốt 25,25±0,19 27,01±0,39 20,74±1,22 7,92±0,33 Đất phèn 25,30±0,03 26,70±0,57 17,45±1,00 6,59±0,19
4.6 Thành phần hóa học Đậu Ma
Thành phần hóa học của Đậu Ma không có sự chênh lệch quá lớn giữa hai vùng. DM ở v ng đất tốt ca hơn v ng đất phèn. Tuy nhiên CF và Ash của v ng đất phèn lại ca hơn.
Bảng 4.6: Kết quả thành phần hóa học Đậu Ma theo từng vùng
0 5 10 15 20 25 DM CP CF Ash % Đất tốt Đất phèn
Hình 4.5: Thành phần hóa học Đậu Ma theo từng vùng
àm ư ng CP của c y Đậu Ma ở v ng đất tốt là 21,54% của v ng đất phèn là 21,96% các kết qu này đều ca hơn của Odeyanka (2004) có CP 18,9%. àm ư ng D , F, Ash đều thấp hơn của tác gi này có các chỉ tiêu lần ư t là 25,8%, 30,7%, 7,6%. Vùng % DM % theo DM CP CF Ash Đất tốt 23,33±0,23 21,54±0,33 18,62±0,47 7,58±0,24 Đất phèn 22,96±0,19 21,96±0,79 19,03±0,24 7,95±0,33
4.7 Thành phần hóa học Siratro