giao nạp amp tái tổ hợp

... này, người ta sử dụng dạng tái tổ hợp protease 3C từ rhinovirus người Protease có kích thước nhỏ (20 kDa) có tính đặc hiệu hạn chế Nó biểu protein tái tổ hợp dung hợp với glutathione-Stransferase ... vật chủ thể vai trị quan trọng Cấu trúc xác protein tái tổ hợp ảnh hưởng tạo thành thể vùi Một nghiên cứu thực với -interferon người tái tổ hợp cho thấy vài thay đổi amino acid ảnh hưởng đến chuyển ... thúc tR Công nghệ DNA tái tổ hợp 165 : - 16S rRNA eukaryote định vị - (Hình 7.8) Vector pAS1 mang promoter PL RBS gen cII bacteriophage E coli thích hợp Sàng lọc thể biến nạp để thu khuẩn lạc...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... acid khác chuỗi polypeptide amino acid chuỗi polypeptide polypeptide Ampicillin (Amp) (tái tổ hợp) Công nghệ DNA tái tổ hợp đ tạo 176 BAC (bacteria artificial chromosome) Nhiễm sắc thể nhân ... công nghệ DNA tái tổ hợp (công nghệ sinh học ) Trong công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp ( , bia, , chăn nuôi ) trước tiên thích hợp 179 phương pháp ) … cơng nghệ DNA thích hợp hơn, cơng ... Công nghệ DNA tái tổ hợp (DNA recombinant technology) Hệ thống phương pháp phịng thí nghiệm cho phép cắt đoạn DNA từ sinh vật để ghép nối vào DNA sinh vật khác tạo phân tử DNA tái tổ hợp Phân tử...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... nhiệt cao phù hợp với điều kiện phản ứng của PCR, và nó có thể tổng hợp một sợi DNA dài 1 kb trong vòng 30 giây ở 72 o C. enzyme Mg 2+ enzyme Mg 2+ Công nghệ DNA tái tổ hợp 12 - Một ... SP6-infected Salmonella typhimurium 3-infected E. coli) enzyme Mg 2+ Công nghệ DNA tái tổ hợp 13 . Quá trình tổng hợp này không cần mồi. 5’ 3’ RNA polymerase dsDNA + nrNTP RNA ... 3’-OH - Ứng dụng chính enzyme Mg 2+ hoặc Mn 2+ enzyme Công nghệ DNA tái tổ hợp 15 + Thêm đuôi đồng trùng hợp (homopolymer) để tạo ra đầu so le cho phân tử DNA dùng trong tạo dòng (xem...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... gen kiểu cắt hạn chế (restriction patterns) Thể tái tổ hợp (recombinant) Các cá thể tế bào mang tổ hợp gen khác với cha mẹ chúng q trình tái tổ hợp di truyền sinh Thơng tin di truyền (genetic ... gene) vi sinh vật chủ Khác với protein dung hợp, protein nguyên thể tổng hợp từ đầu N khơng phải từ đầu N vector Công nghệ DNA tái tổ hợp 195 Purine Một hợp chất dị vịng, kiềm, có nitrogen, thành ... polymerase để tổng hợp mRNA từ khuôn mẫu DNA Phiên mã ngược (reverse transcription) Quá trình tổng hợp DNA từ khuôn mẫu mRNA nhờ enzyme phiên mã ngược (reverse transcriptase) Cơng nghệ DNA tái tổ hợp 193...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... gel T4 DNA ligase Biến nạp vào E.coli bằng xung điện Dàn mỏng trên môi trường có CM + IPTG Not I Khuẩn lạc trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp [...]... 5’-GATC-3’ ... bước sau: Công nghệ DNA tái tổ hợp 97 Hình 4.16. Tạo dòng trong BAC vector Bảo quản riêng rẽ các dòng tái tổ hợp Sac I Sac I cosN ... P1 (P1-derived artificial chromosome) 10 Công nghệ DNA tái tổ hợp 99 (phosphoribosyl-aminoimidazole) cho ra các dòng tái tổ hợp màu đỏ để phân biệt BamHI Tế... AB1380 (trp–, ura–,...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... [...]... nạp vector tái tổ hợp vào vi khuẩn/tế bào vật chủ Sau khi tạo được vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc tiếp theo là biến nạp nó vào tế bào vật chủ Trong trường hợp này ... tái tổ hợp 82 được sử dụng là vi khuẩn E coli để khuếch đại một lượng lớn DNA plasmid tái tổ hợp dùng cho các phân tích về sau Hai phương pháp được dùng để biến nạp vector tái ... tái tổ hợp phát triển thành khuẩn lạc... thức khử hoạt tính bằng chèn đoạn Ampr: gen kháng ampicillin, lacZ: gen mã hóa enzyme β-galactosidase Công nghệ DNA tái tổ hợp 81 Amp r HindIII...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... với 50% GC thường có giá trị T m [...]... mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự như giai đoạn thứ nhất và thứ hai của quá trình tổng hợp cDNA-xem chương 6) Giai đoạn thứ hai Dùng ... cho quá trình tạo dòng để phân tích trình tự gen (gene sequencing) hay tái tổ hợp (recombination)... 67 hợp chuẩn Kỹ thuật này ặc hiệu A khuôn mẫu (dT) ược 2.2 ư ư tương ứng , tiếp ... các ười ta thư đ - , tạo thành sợi đôi ổn định trong tổng hợp DNA. Thông thư 28-35 mer cần cho việc khuếch đại các trình tự có mức độ dị hợp cao. Đối với những primer ngắn hơn 20 mer, có thể...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... nghệ DNA tái tổ hợp 130 - - . Hình 6.1. Sơ đồ quy trình tinh sạch mRNA từ RNA tổng số Mô hoặc tế bào Tách chiết RNA tổng số Chuyển RNA tổng số ... tái tổ hợp 136 E coli - DNA vector thức đuôi dA:dT 1.2 Đuôi dC:dG đuôi Enzyme Pst plasmid vector 5’…CTGCAG…3’ t PstI Pst 6.5) :dG E coli 3’ - ) (Hình 6.6) Công nghệ DNA tái tổ hợp ... P Công nghệ DNA tái tổ hợp 3 có một số thuận lợi sau: 140 - Không cần - - E coli đ 6 .8) promoter vector được phát triển -adapter - 6.9) Công nghệ DNA tái tổ hợp 141 ... gắn vào...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:20

... với vector biến nạp vào E coli Cơng nghệ DNA tái tổ hợp 142 Cấu trúc chóp 5’ mRNA Tổng hợp cDNA sợi thứ primer-adapter sợi đơn cDNA sợi thứ Thủy phân RNA bổ sung đuôi đồng trùng hợp vào đầu 3’ ... cDNA RE thích hợp gắn vào vector pTCGAC(G)n (A)nG G(C)n (T)nCAGCTp 6.9 -adapter tổng hợp theo phương pháp gắn lacZ đư vector vector biểu bacteriophage gt11 Vector Công nghệ DNA tái tổ hợp 143 , ... DNA tái tổ hợp mẫu dị mẫu dò mẫu 147 dò d (5-10 ic lai n Mục đích hai mẫu dị cho cDNA quan tâm - mẫu dò đoạn nucleotide mẫu dò mẫu dò in vitro biến (degene : + biến Công nghệ DNA tái tổ hợp...

Ngày tải lên: 31/07/2014, 23:21

... DNA tái tổ hợp (DNA recombinant technology) Hệ thống các phương pháp phòng thí nghiệm cho phép cắt đoạn DNA từ một sinh vật để ghép nối vào DNA của một sinh vật khác tạo ra phân tử DNA tái tổ hợp ... RNA Biến nạp (transformation) Là quá trình truyền DNA ngoại lai vào một tế bào nhận, chẳng hạn sphaeroplast hoặc protoplast, và có thể hợp nhất trong nhiễm sắc thể nhờ sự tái tổ hợp tương đồng ... thể sinh vật eukaryote sự biến nạp chỉ có thể xuất hiện ở những tế bào “thấm” được DNA bằng các phương pháp nhân tạo như: hóa biến nạp, điện biến nạp Trang 3Biến nạp bằng điện (electroporation)...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi là kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan ... năng chịu nhiệt cao phù hợp với điều kiện phản ứng của PCR, và nó có thể tổng hợp một sợi DNA dài 1 kb trong vòng 30 giây ở 72oC Công nghệ DNA tái tổ hợp 11 - Một trong ... nghệ DNA tái tổ hợp 19 +... các DNA sợi đôi đầu bằng mang nhóm 5’-PO4 và enzyme ATP, Mg2+ 3’-OH 5’ .pCpGpApCpGpTpA 3’ 3’ GpCpTpGpCpApTp 5’ Công nghệ DNA tái tổ hợp 15 2...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... polymerase (gọi tắt là Taq pol) bắt đ tổng hợp (synthetic oligonucleotide) có khoảng 10-20 nucleotide hoặc hơn Nếu biết trình tự của đoạn gen cần khuếch đại thì có thể tổng hợp nhân tạo các primer tương ... DNA thứ nhất, sau đó dùng sợi này làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự như giai đoạn thứ nhất và thứ hai của quá trình tổng hợp cDNA-xem chương 6) Giai đoạn thứ hai Dùng DNA sợi ... primer tối thiểu cho hầu -, tạo thành sợi đôi ổn định trong tổng hợp DNA Thông thư 28-35 mer cần cho việc khuếch đại các trình tự có mức độ dị hợp cao Đối với những primer ngắn hơn 20 mer, có thể sử...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... tính 2.3 Biến nạp vector tái tổ hợp vào vi khuẩn/tế bào vật chủ Sau khi tạo được vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc tiếp theo là biến nạp nó vào tế bào vật chủ Trong trường hợp này tế bào ... DNA plasmid tái tổ hợp dùng cho các phân tích về sau Hai phương pháp được dùng để biến nạp vector tái tổ hợp vào E coli là điện biến nạp (electroporation transformantion) và hóa biến nạp (chemical ... ligase, sau đó biến nạp vào E coli bằng xung điện - Chọn lọc thể tái tổ hợp trên môi trường nuôi cấy có bổ sung CM và IPTG Các khuẩn lạc có màu trắng là khuẩn lạc mang thể tái tổ hợp, còn các khuẩn...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... cách đếm số lượng cá thể hệ • P abc x Hợp tử +++ ++ + a b c Giảm phân Các bào tử đơn bội dạng cha mẹ dạng tái tổ hợp 01/04/11 MaMH: DTH Vi tảo & vi nấm 7 • Khi hợp tử phân chia giảm phân sinh hai ... Nhưng có trao đổi chéo đơn kép diễn đoạn có kiểu tái tổ hợp tạo thành: a + +, + b c + + c, a b + a + c , + b + Kết  thể đơn bội, giao tử t /hợp phân tích cá thể lưỡng bội Cho nên kiểu gen đơn ... nấm 4 Neurospora crassa có hai giới tính A a • ss hữu tính khi nhân có giới tính ≠  hợp tử lưỡng bội A/a • Hợp tử tồn không lâu  GP c/ trúc hình ống dài nang GP I II diễn liên tiếp bên nang...

Ngày tải lên: 07/08/2014, 18:22

... trình tự gen (3) Thiết kế vector chuyển gen (4) Biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào chủ (5) Phân tích sinh vật chuyển gen 01/20/14 Hệ thống tái sinh  Phương pháp kỹ thuật   Tạo đa chồi Phôi ... tính toàn năng” Phương pháp như: (i) nuôi cấy mô tế bào thực vật, vi nhân giống in vitro, dung hợp tế bào trần, cấy truyền phôi, tế bào gốc 01/20/14 Cách tiếp cận đại Nghiên cứu tính đa dạng ... xét tượng kết luận Đột biến thực nghiệm  Xử lý đột biến đặt thí nghiệm   Xử lý giai đoạn thích hợp sinh trưởng & phát triển   Thăm dò nồng độ hoá chất liều lượng tia phóng xạ Sử dụng phần mẫu...

Ngày tải lên: 20/01/2014, 11:20

... trường hợp Đây xem số đáng báo động thách thức lớn lao Y học nước nhà Hiện nay, giới ung thư đại trực tràng chiếm khoảng 11,5% tổng số trường hợp ung thư chiếm tới 15,2% tổng số trường hợp tử ... sai hỏng, mạch mạch mang mã gốc Sau phức hợp truyền thông tin tới enzym sửa chữa phía sau bao gồm enzym có vai trò cắt bỏ vùng ADN, tái tổng hợp phần bị tổn thương nối với mạch sửa chữa Còn sai ... dị hợp HET Đây phương pháp phát đột biến tương đối hiệu dựa vào sai khác độ dịch chuyển sợi kép dị hợp so với sợi kép đồng hợp Trong phương pháp này, sợi kép dị hợp tạo cách biến tính hỗn hợp...

Ngày tải lên: 08/01/2015, 08:32

... 17 Hình 1.1: Sơ ñ th hi n s tái t h p gi a nhi m s c th tương ñ ng x y trình gi m phân (Collard B Jahufer M., 2005) Giao t ñư c t o sau gi m phân t t b m l i (P) ho c tái t h p (R) Kho ng cách ... th ph n cá th F2 cho phép t o dòng c n giao tái t h p (RIL) ch a nh t s t h p ño n nhi m s c th t b m ban ñ u Qu n th ñơn b i kép (DH) ñư c t o b ng cách tái sinh tr ng b ng c m ng, làm cho b ... b m l i (P) ho c tái t h p (R) Kho ng cách gi a hai ch th nh , h i x y trình tái t h p gi a chúng th p Vì v y, s tái t h p gi a ch th G H có th x y thư ng xuyên so v i gi a ch th E F ði u có...

Ngày tải lên: 01/09/2020, 12:00

... ADN tái tổ hợp  Biến nạp  Nhân chọn lọc dòng tế bào  Tinh dòng ADN tái tổ hợp Tạo phân tử ADN tái tổ hợp 05_05.jpg Nhân chọn lọc dòng tế bào 05_05_2.jpg Biến nạp Tinh dòng ADN tái tổ hợp Nguyen ... biến nạp vector, dựa vào: Nguyen Thi Hong Van Nguyen Thi Hong Van Department of Genetics-HUS Department of Genetics-HUS Sàng lọc thể tái tổ hợp Sàng lọc thể tái tổ hợp  Sàng lọc tổng quát thể tái ... Department of Genetics-HUS Sàng lọc thể tái tổ hợp Sàng lọc thể tái tổ hợp  Để phát tế bào chứa phân tử đích  Sàng lọc tổng quát : sàng lọc thư viện ADN từ tập hợp ADN chưa biết  Sàng lọc trực tiếp:...

Ngày tải lên: 05/09/2015, 11:24

... Song theo nhiều tài liệu tổng kết nước vùng có lượng mưa nằm giới hạn 1000 - 2000 mm/năm thích hợp Tuy nhiên người ta lại nhận thấy vùng có lượng mưa thấp cao giới hạn thích hợp điều sinh trưởng ... trường primer dễ tổng hợp Về trang thiết bị cần có máy PCR hệ thống điện di Cần quan tâm đến yếu tố nồng độ DNA, điều kiện thí nghiệm, chương trình chạy PCR cần lựa chọn primer thích hợp cho đa hình ... màng tế bào màng nhân Thơng thường người ta nghiền tế bào, mơ hỗn hợp chất tẩy (như SDS, Sarcosyl) proteinase (Proteinase K) Hỗn hợp phá vỡ màng tế bào màng nhân, giải phóng DNA mơi trường đồng...

Ngày tải lên: 21/11/2012, 08:19