Tiêu chuẩn hạt điều và cách xác định độc tố Aflatoxin

XÁC ĐỊNH CHỈ TIÊU CẢM QUAN (theo TCVN 4850:2010)

XÁC ĐỊNH ĐỘ ẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHƯNG CẤT (theo TCVN 4850:2010)

Nước trong bình thu nhận có thể tách khỏi toluen bằng cách thỉnh thoảng dùng một cây đũa thủy tinh gạt cho các giọt nước còn bám vào thành ống ngưng chảy hết xuống sinh hàn và bình thu nhận, đồng thời để làm nước lắng xuống đáy bình thu nhận. Ngâm bình thu nhận vào trong nước ở nhiệt độ phòng ít nhất là 15 min hoặc cho đến khi lớp toluen tỏch rừ ràng, sau đú đọc thể tớch phần nước. Tiêu chuẩn này qui định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo có cột ái lực làm sạch miễn nhiễm và dẫn xuất sau cột để xác định aflatoxin trong ngũ cốc, các loại hạt và các sản phẩm của chúng.

Điều này có thể đạt được hiệu quả bằng cách sử dụng tấm hấp thụ tia cực tím (UV) qua cửa sổ kết hợp với ánh sáng dịu (không trực tiếp) hoặc tấm chắn hoặc che kết hợp với ánh sáng nhân tạo (có thể chấp nhận đèn huỳnh quang). Các hỗn hợp dung môi chiết khác thích hợp với pha động có thể cũng được sử dụng nếu chứng minh được có hiệu quả hơn hoặc được khuyến cáo bởi nhà sản xuất về cột ái lực miễn nhiễm (IA). Để xác định nồng độ chính xác của aflatoxin trong từng dung dịch gốc, thì ghi lại đường hấp thụ ở bước sóng từ 330 nm đến 370 nm trong cuvet thủy tinh thạch anh 1 cm sử dụng máy đo quang phổ với hỗn hợp toluen/axetonitril làm đối chứng.

Ngâm dụng cụ thủy tinh phòng thử nghiệm đã tiếp xúc với dung dịch aflatoxin trong axit sulfuric trong vài giờ, sau đó tráng kỹ (ví dụ ba lần) bằng nước để loại bỏ hết vết axit. Thu lấy chất rửa giải metanol hoặc axetonitril (tùy thuộc vào sản phẩm hoặc các hướng dẫn của nhà sản xuất) cho vào bình định mức 2 ml (hoặc thể tích khác theo qui định của nhà sản xuất). Phương pháp để nạp lên cột IA, rửa và rửa giải hơi khác nhau giữa các hãng sản xuất cột và các hướng dẫn cụ thể đối với các loại cột cần phải tuân thủ một cách chính xác.

CHÚ THÍCH: Nhìn chung các qui trình bao gồm việc chiết mẫu bằng hỗn hợp metanol và nước, lọc hoặc ly tâm, pha loãng mẫu bằng dung dịch đệm phosphat (PBS) hoặc nước, nạp dưới áp suất lên cột đã được rửa trước, rửa cột bằng nước cất. Nếu dung môi được sử dụng để rửa giải aflatoxin không thích hợp với pha động, thì sau đó chất rửa giải phải được làm bay hơi đến khô bằng khí. Lấy 200ml dung dịch chuẩn hoặc 200ml dịch chiết tinh khiết từ (e) để dẫn xuất vào lọ, sau đó sử dụng bơm tiêm tiêm 700ml dung dịch dẫn xuất. Đậy lọ bằng nút cao su và trộn đều dung dịch. là thời gian cần thiết để dẫn xuất hoàn toàn aflatoxin B1 và G1, và mực nước trong bồn phải cao hơn mực dung dịch trong lọ).

Khi dùng tích hợp, phải điều chỉnh thiết bị kiểm tra độ nhạy của đầu dò huỳnh quang để cung cấp điều kiện hợp lý cho phản ứng tích hợp (tín hiệu: nhiễu = 5:1) để nồng độ dung dịch chuẩn độ là thấp nhất. Nếu dùng dãi chuẩn và đỉnh tương ứng cho dẫn xuất dịch chiết không theo tỉ lệ, thì cần pha loãng dịch chiết với pha động và phân tích lại nó để các đỉnh theo đúng tỉ lệ. Để thoát nước bằng trọng lực (15-30 phút); hoặc rửa giải nhanh hơn ở đỉnh của cột trong lỗ của bóp cao su , giữ cột theo chiều dọc, và áp dụng áp suất không khí nhẹ để buộc dung môi qua cột với tốc độ 10 cm /phút cho đến khi dung môi xuất hiện ở đầu.

Other defects from external causes