Xác định các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ lợn con bị tiêu chảy tại Trung tâm nghiên cứu lợn Thụy Phương

Tỡnh hỡnh mắc bệnh của lợn con từ sơ sinh ủến 21 ngày tuổi nuụi tại TTNC lợn Thụy Phương

Kết quả này cũng phự hợp với cỏc tài liệu ủó cụng bố trước ủú. Như vậy, cỏc số liệu ủiều tra thu thập ủược trong 3 năm gần ủõy về tỷ lệ mắc một số bệnh thường gặp trờn ủối tượng là lợn con từ sơ sinh ủến 21 ngày tuổi, ủó cho thấy xu hướng chung là tỷ lệ mắc cỏc bệnh cú sự giảm, tuy khụng nhiều qua cỏc năm. Bờn cạnh ủú, cụng tỏc thỳ y ủó ủược chỳ trọng hơn, ủội ngũ cỏn bộ thỳ y ủó ủược nõng cao trỡnh ủộ về kiến thức chuyên môn, tay nghề vững vàng, có thêm nhiều kinh nghiệm trong chẩn đốn và điều trị bệnh.

Tuy nhiên, hội chứng tiêu chảy ở lợn con theo mẹ vẫn xảy ra khỏ thường xuyờn với tỷ lệ mắc cao, nhiều trường hợp cả ủàn lợn con (10 - 12 lợn) bị mắc tiờu chảy ngay trong 1 - 3 ngày ủầu sau khi sinh, gõy thiệt hại ủỏng kể về kinh tế do phải dựng thuốc ủiều trị, lợn con khỏi bệnh cũi cọc, chậm lớn. Do vậy, việc tỡm hiểu bản chất của nguyờn nhõn gõy bệnh, ủể từ ủú cú thờ ủề ra cỏc biện phỏp phũng trị bệnh thớch hợp là một trong những yêu cầu cấp bách của thực tiễn sản xuất.

Kết quả phân lập vi khuẩn E. coli từ các mẫu bệnh phẩm của lợn con theo mẹ mắc tiêu chảy

+ Trong quá trình mổ khám và kiểm tra bệnh tích của 25 lợn tị tiêu chảy ở cỏc nhúm tuổi khỏc nhau, chỳng tụi cũng ủó tiến hành lấy mẫu là một số cơ quan phủ tạng của cỏc lợn này ủể xột nghiệm và phõn lập vi khuẩn E. Kết quả cho thấy: khi lợn bị tiờu chảy ở gan, lỏch và ruột ủều xỏc ủịnh ủược sự cú mặt của vi khuẩn E. Kết quả này cũng tương ủương với kết quả nghiờn cứu của một số tỏc giả ủó cụng bố trước ủõy.

Mỗi loại vi khuẩn cú một số ủặc tớnh sinh học riờng như: tớnh chất mọc của vi khuẩn trờn cỏc mụi trường nuụi cấy thụng thường và ủặc hiệu, ủặc tớnh chuyển húa cỏc loại ủường và khả năng sinh sản cỏc hợp chất sinh học trung gian trong mụi trường nuụi cấy. Trờn tiờu bản nhuộm Gram, kiểm tra hỡnh thỏi cho thấy hỡnh ảnh ủặc trưng của vi khuẩn E. Từ cỏc kết quả trờn cho thấy: Cỏc chủng vikhuẩn phõn lập ủược ủều thể hiện ủầy ủủ cỏc ủặc tớnh sinh vật, húa học ủặc trưng của vi khuẩn E.

Kết quả xỏc ủịnh cỏc yếu tố gõy bệnh của cỏc chủng vi khuẩn E. coli phõn lập ủược

Fairbrother (1992) [71] cho rằng yếu tố bỏm dớnh là yếu tố quan trọng, chỉ sau ủộc tố ủường ruột trong việc xỏc ủịnh cỏc yếu tố gõy bệnh của vi khuẩn E. Không có chủng nào mang kháng nguyên F6, F41, F18 như một số nghiên cứu của cỏc tỏc giả ở một số nước khỏc trờn thế giới ủó cụng bố. Sự khỏc biệt này, nhiều khả năng là do yếu tố vị trớ ủịa lý hoặc do ủộ tuổi của lợn khỏc nhau nên các yếu tố bám dính có mang trong các chủng vi khuẩn E.

Ở các lứa tuổi khác nhau của lợn, tỷ lệ vi khuẩn mang từng loại kháng nguyờn bỏm dớnh cũng ớt nhiều cú sự khỏc biệt. Sự sai khỏc này cú thể ủược giải thớch là do: nguồn gốc mẫu lấy ở cỏc ủịa phương khỏc nhau, thời ủiểm lấy mẫu khỏc nhau, ủộ tuổi lợn con khỏc nhau, việc sử dụng vacxin phũng bệnh khỏc nhau và phương phỏp xỏc ủịnh cũng khác nhau, dẫn tới tỷ lệ các chủng mang các loại kháng nguyên bám dính cũng khác nhau. Cỏc yếu tố này giỳp vi khuẩn bỏm vào tế bào nhung mao ruột non ủể xõm nhập vào lớp tế bào biểu mụ, rồi từ ủú sản sinh ra cỏc loại ủộc tố ủường ruột khỏc nhau (STa, Stb, LT) làm thay ủổi cõn bằng trao ủổi muối - nước và chất ủiện giải, dẫn ủến tiờu chảy.

Tổ hợp các yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E. coli ph©n lập ủược

Những dẫn liệu trờn ủó cho thấy thực tế cú sự khỏc nhau về số lượng số loại các yếu tố bám dính trong các serotyp E. Tổ hợp cỏc gen quy ủịnh cỏc yếu tố gõy bệnh cú trong cỏc chủng E. Kết quả này cũng phự hợp với cỏc nghiờn cứu ủó ủược cụng bố trước ủõy.

Khi nghiờn cứu về ủặc tớnh khỏng nguyờn và vai trũ gõy bệnh của vi khuẩn ETEC gây bệnh tiêu chảy lợn con ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, ðỗ Ngọc Thỳy và cộng sự (2003) [58] cũng ủó kết luận số chủng mang tổ hợp các yếu tố gây bệnh F4/STa/STb/LT là phổ biến nhất trong số các chủng ETEC gây bệnh tiêu chảy lợn con trước cai sữa.

Kết quả xỏc ủịnh serotyp khỏng nguyờn O của cỏc chủng vi khuẩn E

Kết quả của nghiờn cứu này cũng phự hợp với một số nghiờn cứu ủó tiến hành trước ủõy. Phần lớn cỏc nghiờn cứu ủeuf chỉ ra rằng serotyp khỏng nguyen O149 chiếm tỷ lệ cao và là một serotyp chính gây bệnh lợn ở các lứa tuổi.

Kết quả kiểm tra ủộc lực của một số chủng vi khuẩn E. coli phõn lập ủược trờn chuột bạch

Cỏc chuột chết ủều ủược mổ khỏm ủể kiểm tra bệnh tớch, ở cỏc chuột này ủều quan sỏt thấy cỏc bệnh tớch ủiển hỡnh như: bụng chướng to, ủường tiêu hóa chướng hơi nặng có mùi chua thối, viêm phổi, gan sưng, tụ huyết, ruột xuất huyết, tim nhóo. Lấy mỏu tim, ria cấy trờn ủĩa thạch mỏu, thạch MacConkey thỡ ủều phõn lập lại ủược vi khuẩn thuần khiết từ mỏu tim. Kết quả xỏc ủịnh khả năng mẫn cảm với khỏng sinh của cỏc chủng vi.

Kết quả xỏc ủịnh khả năng mẫn cảm với khỏng sinh của cỏc chủng vi khuẩn E. coli phõn lập ủược

Khi so sỏnh kết quả ủạt ủược với một số tỏc giả trong nước nghiờn cứu về khả năng kháng kháng sinh và mẫn cảm của vi khuẩn E. Những giống vi khuẩn khỏng nhiều loại kháng sinh không chỉ lan truyền trong hệ sinh thái của cơ sở chăn nuôi mà còn xuất hiện ở các nguồn nước tự nhiên, gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng ủến hiệu quả ủiều trị và sức khỏe con người, vật nuụi. Nguyờn nhõn là do con người sử dụng thuốc khụng ủỳng kỹ thuật, gen sản sinh yếu tố khỏng khỏng sinh nằm trong plasmid R (Resistance).

Plasmid này có thể di truyền dọc và truyền ngang cho tất cả quần thể vi khuẩn thích hợp (Falkow, 1975) [72]. Vì vậy, một số kháng sinh có tác dụng mạnh như Ceftiofur, Amikacin và Apramycin là những kháng sinh mới, hầu như chưa xuất hiện ở thị trường Việt Nam, nên vẫn mẫn cảm rất cao với cỏc chủng vi khuẩn ủược thử; cũn một số khỏng ớnh khỏc hiện ủang ủược sử dụng trong phũng và trị bệnh cho lợn thỡ cú tớnh mẫn cảm trung bỡnh hoặc thấp hoặc khỏng theo từng ủịa phương khỏc nhau. Chớnh vỡ vậy, việc sử dụng thuốc khỏng sinh cần phải ủặt ra một quy ủịnh hợp lý ủể kịp thời ngăn chặn hiện tượng này khỏi ảnh hưởng trực tiếp tới con người và môi trường.

Kết quả thử nghiệm phỏc ủồ ủiều trị tiờu chảy cho lợn

Dựa trờn kết quả kiểm tra khỏng sinh ủồ như ủó trỡnh bày ở phần 4.8 và ủể ủỏp ứng yờu cầu thực tế sản xuất là phải chọn ủược loại khỏng sinh cú tớnh chất phổ thụng, giỏ thành hợp lý và cú hiệu quả cao khi ủiều trị tiờu chảy cho ủàn lợn, chỳng tụi ủó chọn và thử nghiệm 3 loại khỏng sinh dựng cho 3 phỏc ủồ: Gentamicin, Apramycin và Enrofloxacin, cỏc loại thuốc tăng cường sức ủề khỏng, ủiện giải với liều lượng và cỏch dựng giống nhau ở cả 3 phỏc ủồ B - complex, Glucose 30% Vitamin C, ủiện giải. Gentamycin là khỏng sinh thuộc nhúm Aminoglucoside, ủược chiết xuất từ nấm Micromonospora Purpurae có tác dụng rộng hơn cả Penicilin và Streptimycin, có tác dụng mạnh với cả vi khuẩn Gram dương và Gram âm, ủặc biệt cú tỏc dụng với vi khuẩn E. Apramycin và Enrofloxacin thuộc nhóm kháng sinh thế hệ mới có tác dụng ngăn cản và tiêu diệt vi khuẩn Gram dương và Gram âm, nhất là vi khuẩn gõy bệnh ủường tiờu húa, nờn hiện nay thuốc ủang sử dụng ủể ủiều trị tiờu chảy ủặc hiệu.

Theo kết quả nghiên cứu của Phạm Khắc Hiếu và Lê Thị Ngọc Diệp, (1999) [16] ủó cho biết: Gentamycin, Enrofloxacin là loại khỏng sinh cú hoạt phổ rộng, không chỉ tác dụng với vi khuẩn Gram dương, Gram âm mà còn tác dụng với cả Mycoplasma, ủặc biệt mạnh với vi khuẩn E. Mức ủộ tiờu chảy cũng nhẹ hơn và sau khi khỏi bệnh khả năng phục hồi tốt hơn, trỏi lại ở lụ ủối chứng lợn con cú triệu trứng tiêu chảy sớm hơn, suy sụp nhanh hơn, trọng lượng cai sữa thấp hơn. Như vậy,theo kết quả của bảng 4.10b chúng tôi thấy nếu sử dụng kháng thể Hanvet K.T.E Hi ủể ủiều trị tiờu chảydo Ecoli gõy ra ở lợn, thỡ 3 ngày là lợn khỏi bệnh còn Sử dụng kháng sinh HamcoliS thì phải mất 5 ngày lợn mới khỏi.Chúng tôi khuyến cáo những nhà chăn nuôi lợn nái sinh sản,nên sử dụng khỏng thể KTEhi ủể ủiều trị bệnh tiờu chảy do Ecoli gõy ra ở lợn con theo mẹ vỡ giỏ thành rẻ,hiệu quả cao,thời gian ủiều trị ngắn lợn con ớt bị ảnh hưởng ủến khả năng sinh trưởng sau này.