Hướng Dẫn Sử Dụng Thiết Bị Phòng Thí Nghiệm Vi Sinh Đại Cương Mức An Toàn Cấp 1

MỤC LỤC

Cách sử dụng pipetman và một số thiết bị trong phòng thí nghiệm Vi sinh vật mức độ an toàn cấp 1(theo tình hình thực tế thiết bị của phòng thực hành)

(1) mục đích của việc sử dụng; kiểm tra thiết bị trước khi sử dụng; cách sử dụng thiết bị; vệ sinh và kiểm tra thiết bị sau khi sử dụng. Bước 2: Cho nước cất (hoặc vô khoáng) vào nồi hấp sao cho ngập đầu cảm ứng mực nước (mực nước bằng với tấm đỡ inox ở đáy nồi) khoảng 2 cm. Bước 4: Kiểm tra ống xả khí phải chìm trong mực nước của bình nhựa chứa nước và khóa valve xả đáy, valve xả khí (nếu có).

Bước 6: Sau khi hấp xong, đèn báo Complete chớp chớp màu đỏ, thì mở nồi hấp ra, chờ vài phút cho bớt nóng và lấy dụng cụ và môi trường ra. Bước 3: Sau khi cân đã ổn định thì đọc ngay kết quả, như vậy sẽ có kết quả chính xác Bước 4: Sau khi cân xong làm sạch mặt cân, khi vệ sinh cần tắt và lấy bàn cân khỏi đế đỡ mặt bàn cân. Bước 1: Cầm micropipette ở tư thế thẳng đứng, móc treo trên ngón trỏ, mặt hiển thị số dung tích hướng về phía người sử dụng.

Bước 3: Ấn nút nhấn đến nấc thứ nhất thì dừng lại, đặt đầu típ chìm vào 3-4mm dung dịch Bước 4: Nhả nút nhấn ra từ từ để pittong hút dịch lên đầu típ. Bước 5: Nhấc đầu típ ra khỏi dung dịch, quan sát có bọt khí hay không( nếu có thì đẩy dịch ra và hút lại) và chờ vài giây không có giọt dư đầu tip thì chuyển qua dụng cụ cần chứa Bước 6: Hạ đầu tip xuống và nhấn nút đẩy dịch ra vật cần chứa đến nấc thứ nhất, khi dịch bị đẩy hết thì mới nhấn nút sang nấc thứ hai để đẩy hết dịch còn mao dẫn trên đầu tip.

Trả lời câu hỏi

Bước 4: Phụ thuộc vào mẫu và lượng mẫu cần sấy để điều chỉnh thời gian sấy cho phù hợp Bước 5: Lấy mẫu ra. Tại sao sử dụng giấy báo để bao gói dụng cụ thí nghiệm như đĩa petri, ống nghiệm…?Trong trường hợp không có giấy báo để bao gói, đề xuất giải pháp thay thế phù hợp. Vì giấy báo ngăn ngừa vi sinh vật nhiễm vào môi trường trước và sau khi cấy để tránh vỡ dụng cụ bằng thủy tinh trong quá trình thao tác, không bị rách trong quá trình hấp lần đầu.

Tại sao phải khử trùng dụng cụ thí nghiệm đã được làm nút bông và bao gói (ví dụ như ống nghiệm thuỷ tinh, bình tam giác thuỷ tinh, đĩa petri thuỷ tinh…) trước khi sử dụng để nuôi cấy vi sinh vật?. - Phải khử trùng dụng cụ thí nghiệm đã được làm nút bông và bao gói trước khi sử dụng vì trước nuôi cấy phải rửa hấp khử trùng để tạo không gian vô trùng tiêu diệt VSV xung quanh thành dụng cụ giúp kết quả nuôi cấy không bị nhiễm VSV không mong muốn. Tại sao người ta thường áp dụng khử trùng dụng cụ và môi trường nuôi cấy vi sinh trong nồi hấp cao áp mà không sử dụng phương pháp khử trùng khác?.

- Vỡ khi khử trựng trong nồi hấp cao ỏp dễ kiểm soỏt và theo dừi hơn, đồng thời không độc hại không ăn mòn dụng cụ kim loại, dễ điều khiển và khả năng diệt khuẩn nhanh chóng. Băng dớnh vặt( dỏn ở bờn ngoài cỏc ống nghiệm hay dụng cụ thớ nghiệm chuyển màu rừ ràng, tất cả các dụng cụ đã được bao gói và sau khi hấp khử trùng thì không bị rách.

KỸ THUẬT PHA CHẾ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT

    Trả lời câu hỏi

    Mục đích: đếm số vi khuẩn hiếu khí trên đĩa và phân biệt màu sắc giữa chúng. Dựa vào mẫu có số lượng cao hay thấp có thể thông qua màu sắc đậm nhạt để chọ tỉ lệ pha loãng cho phù hợp. Vì các loại nấm men dễ dàng đồng hóa rose bengal làm xuất hiện màu hồng tạo thuận lợi cho việc đếm.

    - Nấm men: Nấm men thường xuất hiện dưới dạng một mảng màu xanh đậm hoặc đen trên môi trường DRBC. Nấm men có khả năng phát triển tốt trong môi trường này và tạo ra các mầm bào tử (conidia) màu đen. Mầm bào tử của nấm men thường có hình dạng đặc trưng, như hình trụ, hình cầu hoặc hình nón.

    - Nấm mốc: Nấm mốc thường xuất hiện dưới dạng các mảng màu hồng hoặc đỏ trên môi trường DRBC. Nấm mốc cũng có khả năng phát triển trong môi trường này, nhưng thường ít phát triển hơn so với nấm men. Mầm bào tử của nấm mốc thường có hình dạng đa dạng, từ hình cầu đến hình trụ, hình cánh hoặc hình dẹp.

    QUAN SÁT HÌNH THÁI VI SINH VẬT

    • Thực hành

      Kích thước: Lớn hơn so với khuẩn, có thể từ vài micromet đến khoảng 100 micromet hoặc lớn hơn, tùy thuộc vào loại cụ thể. Cấu trúc: Tế bào nấm men thường có các cấu trúc bên trong, như hạt trung bình, mạnh mẽ, và có thể chứa nhiều hạt. Kích thước: Lớn hơn so với khuẩn, có thể từ vài micromet đến khoảng 100 micromet hoặc lớn hơn, tùy thuộc vào loại cụ thể.

      Cấu trúc: Tế bào nấm men thường có các cấu trúc bên trong, như hạt trung bình, mạnh mẽ, và có thể chứa nhiều hạt. Kích thước: Lớn hơn so với khuẩn, có thể từ vài micromet đến khoảng 100 micromet hoặc lớn hơn, tùy thuộc vào loại cụ thể. Cấu trúc: Tế bào nấm men thường có các cấu trúc bên trong, như hạt trung bình, mạnh mẽ, và có thể chứa nhiều hạt.

      Khuẩn lạc có hình cầu, màu xanh trắng , bề mặt nhẵn, mật độ khuẩn lạc dày,rìa đều, có sợi nấm xung quanh. Khuẩn lạc có hình cầu, màu xanh trắng , bề mặt nhẵn, mật độ khuẩn lạc dày,rìa đều, có sợi nấm xung quanh. Quan sát hình thái khuẩn lạc giúp chúng ta xác định và phân loại vi khuẩn dựa vào đặc điểm hình thái đặc trưng như vi khuẩn hình cầu,que,trục,xoắn,.Các kích thích cũng có sự khác nhau từ nhỏ đến lớn.Thông qua việc quan sát chúng ta có thể phân loại chúng vào các nhóm khác nhau như vi khuẩn cầu(coccus), que(bacillus), vi khuẩn xoắn(spirilla), điều này giỳp chỳng ta hiểu rừ được hỡnh dạng và sự khỏc biệt của cỏc loại vi khuẩn áp dungj vào việc điểu trị các bệnh do vi khuẩn gây ra.

      Kỹ thuật nhuộm Gram có vai trò quan trọng trong phân loại vi khuẩn, giúp phân biệt vi khuẩn thành hai nhóm chính là vi khuẩn Gram dương và Gram âm. Sự phân loại vi khuẩn thành hai nhóm dựa trên kỹ thuật nhuộm Gram có ý nghĩa quan trọng trong chẩn đoán vi sinh học. Dựa vào kết quả nhuộm Gram, các bác sĩ có thể xác định được loại vi khuẩn gây bệnh, từ đó có biện pháp điều trị phù hợp.

      Thời gian nhuộm không đúng: Thời gian nhuộm quá ngắn hoặc quá dài có thể làm thay đổi màu sắc của vi khuẩn và dẫn đến sai kết quả. Việc nhuộm quá ngắn có thể làm cho vi khuẩn không đủ màu để phân biệt, trong khi nhuộm quá lâu có thể làm mất màu của vi khuẩn. Nêu những yêu cầu cần lưu ý khi làm tiêu bản quan sát vi khuẩn, nấm men và nấm mốc và khi quan sát dưới kính hiển vi quang học?.

      Bảng 5.1. Ghi nhận hình thái vi khuẩn
      Bảng 5.1. Ghi nhận hình thái vi khuẩn