Tác dụng điều trị bệnh đái tháo đường type 2 của hoạt chất sinh học chiết xuất từ dây thìa canh

Kếtquảtáchchiếtmẫu

Qua bảng 3.1 cho thấy các mẫu thực vật khác nhau cho phần trăm hàm lượngcao khác nhau. Lược vàng và hạt đu đủ có phần trăm hàm lượngcaotươngđối thấplần lượtlà và11,25%và9,25%.

KếtquảgâychuộtnhắtĐTĐtype2thựcnghiệm 1. Gâychuộtnhắtbéophì

Nhóm nghiên cứu Trần Văn Ơn đã sử dụng chuộtbình thường và chuột tăng đường huyết bởi STZ để cho uống dịch chiết thìa canhtrong một thời gian ngắn (tính theo giờ), trong khi đó, chúng tôi đã thử nghiệm trênchuột nhắt ĐTĐ type 2, trong 21 ngày và thấy rằng cao chiết dây thìa canh có tácdụng hạ đường huyết ổn định trong thời gian đã nghiên cứu. Ở Việt Nam hiện naydây thìa canh được sử dụng như một loại thực phẩm chức năng được sử dụng trongviệchỗtrợđiềutrịbệnhĐTĐ.Hơnnữa,cáctácgiảtrênthếgiớiđãnghiêncứutươngđối đầy đủ cả về hoạt tính hạ đường huyết, thành phần hóa học cũng như cơ chế tácdụngcủadâythìacanhnhưứcchếhấpthuglucosequathànhruột,giảmđángkểhàmlượng cholesterol và triglyceride, kích thích tiết insulin đảo tụyin vitrovàin vivo[32], [68]. Ngoài ra, giảo cổ lam đãcho thấy giảm cả tăng đường huyết và tăng lipid máu ở chuột béo phì Zucker [104].Các phần phân đoạn saponin thu được từ giảo cổ lam giảm đáng kể nồng độ đườnghuyếtởchuộtĐTĐ,phanosideđượcphânlậptừgiảocổlamkíchthíchsựgiảiphónginsulin từ các đảo tụy [83].

Chuột bị bệnhĐTĐ type 2 cho uống nước cất (B), các tế bào gan có biểu hiện thoái hóa, tạo thànhcác đám hỗn độn với nhiều hình dạng khác nhau, các tế bào biến dạng méo mó rờirác, một số tế bào có nhân và tế bào chất bắt màu đậm hơn, dây tế bào gan bị biếndạng trầm trọng. Chúng tôi tiến hành phân lập, xác định cấu trúc của một số hợp chất từ phânđoạncóhoạttínhhạđườnghuyếttốtnhấtđểtừđógópphầnchứngminhtácdụnghạđườnghu yếtcủachèdây.Quathựcnghiệm,chúngtôiđãxácđịnhđượccaoCEtOAccho thấy hoạt tính hạ đường huyết tốt hơn so với các cao còn lại. Hợp chất CDE5 được phân lập dưới dạng bột màu vàng nhạt, công thức phântử của hợp chất đã được dự đoán là C15H10O7dựa trên kết quả phổ ESI-glucosidaseMS ở cả haikiểuionhóadươngvàionhóaâmvớipícionphântử[M+H]+thuđượcởgiátrịm/z302,9và[M-glucosidase H]-glucosidaseởgiátrịm/z300,8.Phổ13C-glucosidaseNMRcủahợpchấtCDE5xuấthiệntínhiệu của 15 carbon, bao gồm một nhóm carbonyl có độ dịch chuyển hóa học ở δC177,34; năm nhóm methine ở δC99,27; 94,44; 116,03 116, 25 và121,07 ppm, và chín carbon bậc bốn.

Để tìm hiểu sâu hơn về hoạt tính hạ đường huyết của cao chiết lá chè dây và láđắng, chúng tôi tiếp tục nghiên cứu khả năng ức chế enzyme α-glucosidaseamylase và α-glucosidaseglucosidase của các hợp chất đã được tinh sạch để xác định cơ chế hạ đường huyếtcủachúng.Kếtquảđượctrìnhbàyởbảng3.11. Mức độ sản sinh TNF-glucosidaseα trong các tế bào saukhi được điều trị bằng hợp chất phloretin và vernonioside E từ 250,63 và 310,49pg/mlởnồngđộ5μgg/mlgiảmxuốngcòn72,89và119,56pg/mlởnồngđộ30μgg/ml.Sau khi điều trị phloretin và vernonioside E, quá trình sinh IL-glucosidase6 giảm xuống còn211,53và219,86pg/mlởnồngđộ30μgg/mlvàcũngchothấytácdụngức chếtếbàosản sinh IL-glucosidase8 ở nồng độ 30 μgg/ml (166,58 và 170,18 pg/ml). Tác dụng chống viêm của phloretin đã được nghiên cứu trên thế giới,với liều 10 μgM phloretin ức chế đáng kể nồng độ NO, PGE2, IL-glucosidase6, TNF-glucosidaseα, iNOS vàCOX-glucosidase2 [53], trong khi đó vernonioside E là lần đầu tiên được báo cáo về hoạt tínhchống viêm.

Từ kết quả hình 3.23 cho thấy cả hai protein (IRS-glucosidase1 và Y20) được biểu hiện rừràng (sau khi ủ với phloretin và rosiglitazone-glucosidaseRM) hoặc khụng biểu hiện (khụng ủvớiphloretin)ởtếbàokhánginsulin(IR),điềunàychỉra rằngcó sựgiánđoạntrongcon đường truyền tớn hiệu insulin như bỏo cỏo trước đõy của Solomon và cộng sự[141]. mL)và rosiglitazone(120𝜇M)đãchothấy làm tăng biểu hiện của cả hai protein Y20 và IRS-glucosidase1 ở các tế bào kháng insulin.Biểu hiện của Y20 mạnh sau khi ủ với phloretin đã cung cấp cơ sở chứng minh chokhảnăngtiềmtàngcủaphloretintrongtăngkhảnăngnhạycảmcủatếbàođốivớitínhiệu insulin. Nhiều công trình nghiên cứu cũng đã chứngminh rằng các chất trung gian gây viêm hoạt hóa kinase serine bao gồm IκBB kinase(IKK-glucosidaseβ),c-glucosidase JunkinaseNH2ởđầutậncùng(c-glucosidaseJunNH2-glucosidaseterminalkinase-glucosidase. JNK),nhữngkinasenàyứcchếhoạtđộngcủainsulinbằngcáchthúcđẩysựphosphorylhóaserinecủ a con đường truyền tín hiệu insulin, bao gồm protein IR và IRS-glucosidase1 làm suy yếu tínhiệuinsulinvàgâykhánginsulin[125].Các hoạtđộngchốngviêmcủaflavon oid. Hoạt động chống viêm của các hợpchất phân lập từ chè dây và lá đắng đã được chúng tôi nghiên cứu, trong đó chỉ cóhợp chất phloretin và vernonioside E có hoạt tính chống viêm thông qua ức chế cáccytokine tiền viêm: IL-glucosidase6; IL-glucosidase8 và TNF–α.

Vì vậy, để giúp hiểu thêm về cơ chế hạ đường huyết củacáchợpchấtnày,chúngtôitiếptụcnghiêncứutácdụnghạđườnghuyếtcủacáchợpchất này thông qua khả năng làm giảm tính kháng insulin bằng cách tăng cường hấpthu đường và biểu hiện của hai protein Y20 và p-glucosidaseIRS-glucosidase1. Từ đó chúng tôi tiếp tục nghiên cứu tác động củaphloretin đối với biểu hiện p-glucosidaseIRS1 và Y20 (đây là hai protein rất cần thiết cho conđườngtruyềntínhiệuinsulin).Từkếtquảthí nghiệmchothấy,phloretincóhiệuquảtrongconđườngtruyềntín hiệu insulin thông quaphụchồibiểu hiện củahai protein. Như vậy, có thể khẳng định rằng các hợp chất phân lập được từ chè dây và láđắng có tác dụng trị bệnh ĐTĐ thông qua các cơ chế hạ đường huyết sau: làm chậmquátrìnhhấpthuglucosevàomáuthôngquaứcchếenzymeenzymα-glucosidaseglucosidasevàα-glucosidaseamylase (myricitrin; quercetin; myricetin; phloretin và cynaroside); hoạt độngchống viêm liên quan đến ức chế tổng hợp và hoạt động của các chất trung gian gâyviêm (phloretin và vernonioside E) và đã cải thiện khả năng hấp thu đường đáng kểcủa tế bào thông qua tăng cường biểu hiện của hai protein Y20 và IRS-glucosidase1 (phloretin).Kếtquả về khả năngđiềutrịĐTĐcủacáchợpchất nàygópphầnvào việcpháttriểndượcphẩmmới từnhữngnguồn nguyênliệusẵncóởmiền Trung.