Quy trình nhân giống địa hồng Hoàng Sapa bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

Tình hình sản xuất hoa lan trong và ngoài nớc 1. Tình hình sản xuất hoa trên thế giới

Hiện nay sở công nghệ và môi trờng của tất cả các tỉnh thành phố phía Bắc đều có phòng nuôi cấy mô tế bào, chức năng chính là để phục vụ cho nghiên cứu khoa học, một phần sản xuất giống cung cấp cho thị trờng trong đó có hoa lan. Ví dụ, Hải Phòng xây dựng khu nông nghiệp công nghệ cao (xã Mỹ. Đức, huyện An Lão) với mục tiêu cụ thể: Sản xuất 300.000 cây giống hoa lan bằng công nghệ của Viện Công nghệ Sinh học - Trờng Đại học Nông nghiêp 1 và của Hiệp hội hoa lan Thái Lan (xây dựng khu nông- lâm nghiệp công nghệ cao tại trung tâm phát triển lâm nghiệp Hải Phòng năm 2003[7].

Các nghiên cứu về nhân giống địa lan bằng phơng pháp nuôi cấy mô tế bào

Tại các Viện nghiên cứu hình thành những quy trinh nhân giống hoàn chỉnh với những cây trồng cụ thể để chuyển giao cho các đơn vị, địa phơng, đồng thời tham gia sản xuất lợng cây giống nhất định phục vụ kịp thời cho sản xuất. Năm 2005, Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga “ Xây dựng quy trình nhân nhanh một số giống địa lan bản địa bằng công nghệ nuôi cấy mô tế bào’’, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh và.

Quy trình kỹ thuật về nuôi cấy mô tế bào

+ Cây trong ống nghiệm đã đạt đợc những tiêu chuẩn hình thái nhất định( số lá, số rễ, chiều cao cây). + phải chủ động điều chỉnh đợc ẩm độ, sự chiếu sáng của vờn ơm cũng nh có chế độ dinh dỡng phù hợp [17].

Các vấn đề cần quan tâm trong nhân giống in - vitro 1. Tính bất định về mặt di truyền (genetic in stability)

Tuy nhiên than hoạt tính có thể làm chậm quá trình nhân nhanh cây do hấp phụ một số chất điều tiết sinh trởng và dinh dỡng cần thiết khác. Cây in - vitro thờng có mật độ khí khổng cao, khí khổng có dạng tròn chứ không elip, khí khổng mở liên tục trong quá trình nuôi cấy nên khi đa ra môi trờng tự nhiên dễ mất nớc.

Quy trình trồng và chăm sóc cây Địa lan nhân bằng nuôi cấy mô

Sau khi rửa sạch cây, dùng nớc sạch có pha thêm một ít thuốc trừ nấm, thuốc sát khuẩn với nồng độ loãng (khoảng 1g/lít) nhúng cây con vào mục đích. Chất liệu trồng là ba phần vỏ thông xay nhuyễn, với một phần cát, hoặc tám phần Osmunda (một chất liệu nh rễ dớn của ta) xay nhuyễn, một phần cát và một phần than vụn. Pha loãng dung dịch phân bón, một phần t muỗng cà phê phân bón với một ga-lông (bằng 4,5 lít nớc) ngay tức khắc sau khi trồng phun vào cây.

“Orchideen, Pilezen, Vermehren, Zuchten” thì viết nh sau: “Để trồng cây từ ống nghiệm ra ngời ta chuẩn bị chất nuôi cây gồm than bùn, than củi và cát với tỉ lệ ngang nhau, hạt khá nhỏ, độ ẩm bình thờng. - Khi trồng vào chậu cây con sống bình thờng nh cây lớn (tất nhiên phải che nắng thích hợp, tránh cho cây bị nắng quá làm cháy lá và không để ma to làm long gốc). Khi chuyển cây không đợc căn cứ vào tháng tuổi của cây ở trong giai đoạn chậu nhỏ mà phải căn cứ vào tình trạng của từng cây mà quyết định.

Sau thời gian chuyển chậu đợc một tuần trở ra mới đợc bón các chất dinh dỡng cho cây vì trong quá trình chuyển chậu, ít nhiều bộ rễ bị xây xát nhẹ, nếu bón phân hóa học ngay, có thể làm hỏng bộ rễ. Có thể với một số cây Địa lan phát triển thành cụm lớn ta có thể chuyển sang loại chậu to hơn nữa hoặc tách cụm thành những chậu bé hơn.

Một số kỹ thuật trồng Địa lan cơ bản 1. Kĩ thuật trồng cây con vào chậu

- Tình hình thực tế về khí hậu trong từng tuần, từng tháng của nơi mình trồng lan (gồm khí hậu trong vùng và khí hậu của môi trờng, tức là khí hậu của vờn lan). Đây là biện pháp sử dụng các chất kích thích nh BAP thấm bông đắp lên giả hành hoặc chọc nhỏ thẳng vào đỉnh sinh trởng từ 3- 4 lần cách nhau tuần/lần. Trên thực tế, khi chúng ta trồng những cây lan con từ trong ống nghiệm ra (bằng phơng pháp nuôi cấy mô thực vật) là chúng ta đã loại đợc những bệnh nguy hiểm nhất cho lan là các bệnh do virus [15].

Bình thờng, nếu chúng ta dùng nớc sạch tới cho lan, và tạo cho các cây lan con một môi trờng riêng biệt, sạch sẽ không có điều kiện cho lan con bị lây chéo các bệnh khác của lan lớn hoặc cây khác thì lan con sống khỏe mạnh cho tới khi trởng thành. Tuy nhiên, để đảm bảo cho lan con không có bệnh, nhất là các bệnh do nấm, chúng ta nên áp dụng chế độ phun thuốc phòng bệnh nấm cho lan theo chế độ định kì tháng/lần. Nếu thấy lá lan bị vàng úa rất nhanh hàng loạt hoặc thối đọt hàng loạt việc đầu tiên là phải cách ly các cây đó ngay để tránh bệnh lây sang toàn bộ vờn lan, sau đó phun thuốc trừ bệnh phù hợp.

Ngoài các bệnh do nấm, vi khuẩn và sâu, chúng ta cũng cần đề phòng một số côn trùng khác nh cuốn chiếu, giun, gián (ăn rễ lan), dế và nhất là các loại ốc sên. Cây lan thờng bị một số bệnh nguy hiểm hại cây, bệnh nhiều khi gây thiệt hại rất lớn cho ngời trồng lan nh bệnh đốm than, bệnh đốm lá, bệnh thối hoa, bệnh thối mềm vi khuẩn, rệp sáp vàng, bệnh khảm lá [13].

Phần 3: vật liệu, nội dung và phơng pháp nghiên cứu

Phần 4: Kết quả và thảo luận

Nghiên cứu nhân nhanh bằng phơng pháp cát lát mỏng

Từ kết quả bảng 2 và 3 cho thấy việc bổ sung chất điều tiết sinh trởng vào môi trờng nuôi cấy đều có khả năng kích thích sự phát sinh hình thái của lát mỏng, tỷ lệ mẫu tạo protocorm đều cao hơn đối chứng. Thí nghiệm thuộc giai đoạn này nhằm tìm ra đợc môi trờng thích hợp nhất cho quá trình nhân nhanh thể protocorm. Đây là giai đoạn quyết định hiệu quả và tốc độ của công nghệ vi nhân giống.

Các protocorm tạo ra phải đồng nhất, các chồi tạo cây hoàn chình có tỉ lệ sống cao, phát triển mạnh, ít biến dị. Kinetin và BA thuộc nhóm Cytokinin có tác dụng kích thích tạo thể protocorm mạnh mẽ, đợc sử dụng trong các môi trờng nhân nhanh protocorm. Vì vậy kinetin, BA là những hợp chất không thể thay thế đợc trong quá trình nuôi cấy in - vitro.

Từ kết quả ở bảng 4 và 5 cho thấy việc bổ sung chất điều tiết sinh trởng vào môi trờng nuôi cấy đều có khả năng kích thích tạo protocorm và chồi. Qua theo dừi thớ nghiệm ở nồng độ 2ppm BA trở lờn đó xuất hiện các chồi nhỏ li ti biến dạng, không có khả năng phát sinh cây hoàn chỉnh, do vậy không đợc coi là chồi hữu hiệu, chất lợng chồi kém.

CTTD