Một số đặc điểm dịch tễ học bệnh sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên địa bàn tỉnh Hải Dương và biện pháp phòng trừ

Nội dung nghiên cứu

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..35 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis ở ký chủ trung gian là ốc nước ngọt.

Vật liệu nghiên cứu

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..37 1 gam phõn, nú cho phộp ủỏnh giỏ mức ủộ cảm nhiễm của sỏn. Do ủặc tớnh ký sinh của Clonorchis sinensis tại ủường tiờu hoỏ của gia súc,.chúng tôi mổ khám chó, mèo tìm sán ở gan và túi mật. Gan ủược cắt thành miếng nhỏ ủem ngõm trong dung dịch nước muối 0,9% trong khoảng 10 phỳt, sau ủú búp nỏt lọc ủến khi nước trong tìm sán lá.

- Chuẩn bị dung dịch thuốc nhuộm carmine- axit Clohidric (HCl): lấy 5 gam carmine nghiền nhỏ cho vào bình tam giác chứa 5ml HCl và 5ml nước cất, ủể yờn sau 1 giờ, cho thờm 200ml cồn 90º, lắc ủều, ủậy nỳt bụng, ủun. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..38 cỏch thủy cho tới khi carmine tan hết,ủể một ngày sau lọc. - Nhuộm mẫu trong carmine axit: tựy thuộc vào ủộ lớn của mẫu mà thời gian mẫu ủể trong dung dịch nhuộm cú thể từ 5 phỳt ủến 1 giờ.

Cuối cùng lên tiêu bản bằng cách nhỏ lên tiêu bản bằng ỏch nhỏ lờn lam kớnh 1 giọt bom Canada, ủặt mẫu ngay ngắn , nhỏ tiếp một giọt bom lờn trờn rồi ủậy lamen lại, ðể tiờu bản ở vị trớ nằm cho tới khi bom khụ thỡ tiờu bản ủó ủảm bảo hoàn toàn.[21]. - Dụng cụ thu lượm ốc: dùng tấm gỗ nhỏ, mặt dưới phết một lần mỡ bò - Cỏch thu mẫu: ủối với ao, hồ, vựng nước sõu thu thập mẫu cỏch bờ. Dùng tấm gỗ, mặt dưới bôi lớp mỡ bò thả xuống nước, sau khoảng 24 giờ vớt tấm gỗ lờn ủể thu thập mẫu ốc.

Mẫu thu ủược ủựng trong lọ nhựa chứa một ớt nước cú ghi nhón và chuyển về phòng thí nghiệm Bộ môn ký sinh trùng trường ðại Học Nông nghiệp Hà Nội ủể xột nghiệm. + Phương phỏp ộp: phương phỏp này cú thể nhận biết cỏc giai ủoạn phỏt triển từ Redia ủến Cercaria non trong cơ thể ốc. + Phương phỏp cắt ốc: phương phỏp này cú thể nhận biết ủược cỏc giai ủoạn từ Redia ủến Cercaria cũn non trong cơ thể ốc.

Dùng kéo sắc cắt 1/3 từ phần chóp ốc, chấm phần cơ thể ốc cũn lại vào giọt nước sinh lý ủể lấy dịch cơ thể ốc tiến hành làm riờng rẽ mỗi ốc với một giọt nước sinh lý. Phương phỏp này sẽ thiếu chớnh xỏc nếu xột nghiệm vào mựa ủụng, khi Cercaria cũn non không thể chui ra ngoài. Khi phát hiện có ấu trùng sán lá trong ốc, dùng pipet hút ra làm chết dưới ngọn lửa ủốn cồn làm tiờu bản tạm thời, ủo, vẽ và chụp ảnh dưới kớnh hiển vi ủể ủịnh loại theo khúa phõn loại của Sumatcovic (1957).

Bố trí thí nghiệm

Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..41 Thớ nghiệm 3. Xỏc ủịnh thành phần loài ốc nước ngọt và vật chủ trung gian của sán lá gan nhỏ. - Xỏc ủịnh thành phần ốc làm ký chủ trung gian của sỏn lỏ gan nhỏ.

Nghiờn cứu ủặc ủiểm sinh học của ốc vật chủ trung gian của sán lá gan nhỏ trong phòng thí nghiệm. - Thu thập ốc ủó xỏc ủịnh là vật chủ trung gian của sỏn lỏ gan nhỏ - Nuôi trong phòng thí nghiệm. Praziquantel là dẫn xuất Pyrazino-Isoquinolein do nhiều hãng thuốc trên thế giới sản xuất.

Theo dừi một số chỉ tiờu của chú, mốo: trạng thỏi phõn, trạng thỏi thần kinh trước và sau khi tẩy. - Số liệu thu ủược trong nghiờn cứu ủược xử lý theo phương phỏp thống kê sinh học trên Excel của máy tính.

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

Theo ủiều tra cua Viện Sốt rột - ký sinh trựng - cụn trựng Trung Ương ủó xỏc ủịnh cỏc loài cỏ như cỏ mố, cỏ chộp, cỏ diếc, cỏ rụ phi, cỏ trắm, cỏ trụi ủều bị nhiễm ấu trựng sỏn lỏ gan nhỏ. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..47 Qua bảng 4.3 và biểu ủồ 4.3 (trang 46), chỳng tụi nhận xột tỷ lệ nhiễm sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis trên mèo cao hơn tỷ lệ nhiễm trên chó. Chỳng tụi nhận thấy khụng cú sự khỏc biệt nhiều về tỷ lệ nhiễm sỏn trờn ủàn chú, mốo tại cỏc khu vực nghiờn cứu trờn ủịa bàn huyện và cường ủộ nhiễm sỏn lỏ gan nhỏ trờn ủàn chú, mốo trờn ủịa bàn Thanh Hà ở mức thấp.

Cường ủộ nhiễm sỏn lỏ gan nhỏ trờn chú, mốo qua mổ khỏm Chúng tôi nhận xét có sự sai khác về tỷ lệ nhiễm sán qua phương pháp mổ khỏm và xột nghiệm phõn trước ủú tại cỏc khu vực nghiờn cứu trờn ủịa bàn huyện. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ..51 Thanh Hà Nam, Thanh Hà Bắc có tỉ lệ nhiễm trứng trong phân ít hơn, có tỉ lệ nhiễm sán thấp hơn theo phương pháp mổ khám tìm sán trưởng thành. Theo Nguyễn Viết Không, Trần Quang Thắng, ðỗ Thị Thu Thủy, ðoàn Hữu Hoàn, Nguyễn Thị Lan Anh (Viện Thú y), kết hợp với ðặng Thi Cẩm Thạch, Nguyễn Bá Nên, Nguyễn Thị Nhung, Lê Khánh Thuần (Viện sốt rét, Ký sinh trùng và côn trùng Trung Ương), cho biết 9 loài cá kiểm tra ở tân Thanh-Kim Sơn-Ninh Bình thì có 8 loài cá nhiễm Metacercaria của Clonor- chis sinensis, riờng ở cỏ mố cú tỷ lệ và cường ủộ nhiễm cao hơn và nhiễm quanh năm.

Chỳng tụi ủó xỏc ủịnh ủược 12 loài ốc nước ngọt tại ủịa ủiểm nghiờn cứu trong tổng số 23 loài ốc sinh sống phổ biến ở khu vực ủồng bằng Bắc bộ - Việt Nam mà ủó ủược cỏc tỏc giả ðặng Ngọc Thanh, Thỏi Trần Bỏ, Phạm Văn Miờn ủịnh loại và cụng bố. Vỡ vậy, trong bất kỳ thủy vực nào tại ủịa phương ủều thuận lợi cho cỏc loài ốc và cỏ nước ngọt phỏt triển.Trong cỏc loài ốc ủó phỏt hiện thấy ở vựng nghiờn cứu cú loài Bithynia misella là vật chủ trung gian của Clonorchis sinensis. Tại Triều Tiên, ốc Parafossarulus manchoricus trong vùng lưu hành bệnh mang ấu trùng Clonorchis sinensis là 0,08 – 0,1%, tại vựng nhiễm nặng mật ủộ ốc này là 200- 500 con/m2 .Vật chủ trung gian thứ hai là cá nước ngọt.

Theo nguyên lý ký sinh trùng: Ở nơi nào vật chủ trung gian phong phú, số loài cảm nhiễm nhiều, tỉ lệ nhiễm cao thì tình hình bệnh ký sinh trùng ở ký chủ cuối cùng càng nghiêm trọng và ngược lại. Trờn cơ sở ủú ủề ra cỏc biện phỏp phòng trị bệnh có hiệu quả hơn kết quả nghiên cứu trình bày ở bảng 4.10 Qua bảng 4.10 (trang 60) chỳng ta thấy trong 12 loài ốc thu thập ủược, cú 11 loài nhiễm Cercaria của sỏn lỏ, trong ủú cú Bithynia mysella nhiễm Cercaria của Clonorchis sinensis, riêng ốc Pila conica không nhiễm Cercaria. Mưa rào, làm cho trứng sỏn Clonorchis sinensis phõn tỏn rộng, tạo ủiều kiện thuận lợi cho ốc tiếp cận trứng sỏn, tỷ lệ ốc bị mhiễm ấu trùng sán cũng tăng lên vào tháng 5.

Chúng tôi nhận xét rằng: ốc Bithynia misella nhiễm ấu trùng sán lá Clonorchis sinensis trong tự nhiờn cú liờn quan ủến sự thay ủổi thời tiết, ủặc biệt là nhiệt ủộ mụi trường. Theo chỳng tụi, ủể phũng bệnh do Clonorchis sinensis gõy ra cho ký chủ cuối cùng có hiệu quả cần: tiêu diệt ốc ký chủ trung gian vào các tháng 1, 2, 3 trong năm, trước mùa mưa rào, nóng ẩm nhằm hạn chế sự tiếp xúc của ấu trùng với ốc. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với kết quả nghiên cứu của Hứa Bằng Như 1964, Khi nghiờn cứu ủặc tớnh sinh học của ốc ký chủ trung gian của sỏn tại Quảng Chõu - Trung Quốc: “Ốc hoạt ủộng và phỏt triển mạnh nhất ở nhiệt ủộ mụi trường từ 25-30oC.

Sau khi ủiều tra cụ thể tỡnh hỡnh nhiễm Clonorchis sinensis trờn ủàn chú, mốo tại ủịa ủiểm nghiờn cứu, chỳng tụi thấy tỷ lệ nhiễm sỏn trờn ủàn chú, mốo ở mức ủộ trung bỡnh. Chỳng tụi nhận xột, mặc dự praziquantel là thuốc ủặc hiệu, cú hiệu lực cao trong ủiều trị bệnh sỏn lỏ gan nhỏ ở ủộng vật, nhưng một số chó vẫn chưa sạch sán ở liều 25mg/kgP, thậm chí mèo dùng thuốc với liều 34mg/kgP, vẫn còn 30% chưa sạch sán.