MỤC LỤC
Nghiên cứu tổ chức học của tuyến sinh dục ủược thực hiện tại Trung tõm Quan trắc và Cảnh bỏo Mụi trường, Bệnh thuỷ sản - Viện nghiên cứu nuôi trồng Thủy Sản I. Phân tích tổ chức mô học tuyến sinh dục thông qua việc cắt lát tế bào tuyến sinh dục và phõn tớch ủồng thời giới tớnh và mức ủộ thành thục qua cỏc thỏng trong năm. Cỏ Chiờn ủược bắt lờn, ủể cỏ nằm ngửa, sau ủú dựng dao và kộo giải phẫu mổ bụng cỏ thẳng từ lỗ hậu mụn lờn ủến hết phần dưới miệng.
Phương phỏp làm tiờu bản tuyến sinh dục ủược thực hiện dựa trờn phương pháp của Sheckan và Hrapchak (1980) và quy trình làm tiêu bản mô học của Trung tâm Quan trắc và Cảnh báo Môi trường, Bệnh thuỷ sản - Viện nghiên cứu nuôi trồng Thủy Sản I. + Sử dụng mỏy ủể ủổ Parafin làm núng chảy vào khuụn ủó cú mẫu, sau ủú ủặt khuụn lờn dàn lạnh cho Parafin ủụng lại tạo ra khối Parafin cú chứa mẫu. Với cỏ ủực kiểm tra ủộ thành thục chủ yếu bằng quan sỏt hỡnh thỏi gai sinh dục, nếu thấy gai sinh dục dài cú màu hồng thỡ cỏ ủó thành thục.
Trứng ủược vuốt vào bỏt khụ, tinh sào ủược lấy sau ủú ủược cho vào cối nghiền, cụng việc thu trứng và lấy tinh phải ủược tiến hành ủồng thời. Cỏc giai ủoạn phỏt triển của phụi bắt ủầu từ giai ủoạn trứng bắt ủầu thụ tinh cho ủến khi cỏ nở ủược kiểm tra dưới kớnh hiển vi và chụp ảnh ủể ghi lại những hỡnh ảnh ủó quan sỏt ủược.
Như vậy, việc nghiên cứu hình thái ngoài tuyến sinh dục cá Chiên cho thấy về cơ bản chỳng giống với cỏc loài cỏ khỏc mà Hồ Thị Cỳc (1996) [5] ủó mụ tả. - Ở những con cỏi, tuyến sinh dục ở giai ủoạn II thỡ ủó cú thể quan sỏt thấy tuyến sinh dục cú màu hồng nhạt: Bao gồm một ủụi tuyến riờng biệt nhưng dính vào nhau, trên bề măt buồng trứng có những mạch máu nhỏ,ở giữa hai tuyến có một rãnh nhỏ. - Tuyến sinh dục ở giai ủoạn III, buồng trứng nhỏ cú màu vàng sẫm trờn buồng trứng thấy xuất hiện mạch mỏu, ủó quan sỏt thấy những hạt trứng nhỏ.(Hình 3.3).
Do thời tiết năm nay (2008) rột ủậm kộo dài nờn thời gian nuụi vỗ cỏ Chiờn ủược tiến hành muộn hơn so với dự kiến, tại Trung tõm giống Thủy sản miền Bắc- Phỳ Tảo- Hải Dương bắt ủầu ủưa cỏ vào nuụi vỗ từ thỏng 2/ 2008. - Khi thu tuyến sinh dục cá Chiên vào tháng 4 thì lúc này tuyến sinh dục chủ yếu ở giai ủoạn II, tuyến sinh dục ở giai ủoạn III cũng cú gặp nhưng khụng nhiều. Tuyến sinh dục cỏi ở giai ủoạn III cú màu xỏm nhạt, bằng mắt thường cú thể quan sỏt ủược cỏc hạt trứng nhỏ trong noón sào, cũn tuyến sinh dục ủực cú màu hồng thẫm trờn bề mặt xuất hiện nhiều vệt màu hồng ủú là dấu hiệu của sự phỏt triển mạch mỏu.
Qua theo dừi sự phỏt triển tuyến sinh dục của cỏ Chiờn trong ủiều kiện nuụi vỗ nhõn tạo, chỳng tụi nhận thấy: Mựa vụ sinh sản của cỏ Chiờn bắt ủầu từ thỏng 5 và kộo dài ủến cỏc thỏng tiếp theo. Tuy nhiờn vào thời gian cuối năm 2007 và ủầu năm 2008 rột ủậm kộo dài, nờn thời gian ủưa cỏ bố mẹ vào nuụi vỗ chậm, chớnh vỡ vậy mà cỏ trong ủiều kiện nuụi vỗ sinh sản muộn hơn so với ngoài tự nhiờn.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………31. - Khi thu tuyến sinh dục cá Chiên vào tháng 6, chúng tôi nhận thấy chủ yếu tuyến sinh dục ủó ở giai ủoạn IV. Tuyến sinh dục cỏi cỏ Chiờn cú màu xỏm xanh sẫm, cú thể quan sỏt ủược cỏc hạt trứng bằng mắt thường.
Noón sào ở giai ủoạn này cú kớch thước vượt hơn hẳn cỏc giai ủoạn trước, cỏc mạch máu phát triển mạnh. - Chúng tôi thu tuyến sinh dục vào tháng 7, tất cả các mẫu thu tuyến sinh dục ủều ở giai ủoạn IV. - Khi thu mẫu tuyến sinh dục vào thỏng 8, những cỏ thể ủó tham gia sinh sản thỡ tuyến sinh dục một số ủó chuyển về giai ủoạn II.
Sang thỏng 8 tuyến sinh dục vẫn con thấy tuyến sinh dục ở giai ủoạn IV, nhưng chủ yếu ủó chuyển sang giai ủoạn II. Trong ủiều kiện nuụi vỗ thỡ hệ số thành thục của cỏ Chiờn cao hơn nhiều so với ngoài tự nhiờn.
Sức sinh sản là một trong những chỉ tiêu quan trọng trong sinh sản nhân tạo. Dựa vào ủú người ta cú thể lập ủược kế hoạch sản xuất cho phự hợp như xác định được lượng đàn cá bố mẹ cần được nuơi vỗ, dự đốn số lượng cá bột từ ủú cú kế hoạch chuẩn bị thức ăn v.v…. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………36.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………37.
Trờn tiờu bản mụ học ta khụng thể nhận biết ủược cỏc giai ủoạn của tiền kỳ Meiosis 1, nhưng cú thể nhận biết ủựơc chỳng nhờ trong nhõn cú các nhiễm sắc thể dạng sợi mảnh cuộn xoắn lại với nhau. Ở giai ủoạn này, tế bào sinh dục là cỏc noón nguyờn bào ủang phỏt triển, buồng trứng ở giai ủoạn này cú hai giai ủoạn khỏc nhau ủú là vựng mầm và vựng cỏc trứng thuộc giai ủoạn lớn ớt ủang xảy ra sự biến ủổi về nhõn. Vựng mầm nằm ở phần ủầu của cỏc nếp sinh dục, nhỡn trờn toàn bộ tiờu bản thì chúng phân bố ở vùng trung tâm của buồng trứng, nơi tiếp giáp giữa hai tuyến.
Trên tiêu bản mô học ta có thể thấy kích thước của tiểu hạch tăng lên cựng với kớch thước của noón bào, ủiều này chứng tỏ nhõn của noón bào ủang ở trong thời kỳ biến ủổi mạnh. Giai ủoạn này thường kộo dài do noón bào cú nhiều biến ủổi phức tạp, từ sự xuất hiện của cỏc khụng bào cho ủến sự hỡnh thành cỏc hạt noón hoàng rồi thành khối noón hoàng. Chưa cú nghiờn cứu nào về cỏc chất dự trữ có trong không bào nhưng có lẽ sự xuất hiện của các không bào trong noãn bào cú thể ủược coi là sự tớch luỹ của cỏc chất dự trữ trong trứng hay cũn gọi là noón hoàng ủể chuẩn bị cho giai ủoạn phỏt triển phụi sau này.
Noón bào giai ủoạn này cú sự xuất hiện của hai yếu tố là hỡnh thành rừ cỏc nang bào bao quanh noãn bào (còn gọi là màng phóng xạ) và các không bào có trong tế bào chất cú lẽ là ủể chuẩn bị cho giai ủoạn tiếp theo là giai ủoạn ủầy noón hoàng. Các quá trình phát triển buồng trứng cá Chiên cũng theo những quy luật chung ủú là cũng phải trải qua tuần tự cỏc giai ủoạn phỏt triển từ thấp ủến cao và ủược biểu hiện ở cỏc giai ủoạn phỏt triển của noón bào.
Chỳng tụi thiết nghĩ cú thể trong ủiều kiện nuụi vỗ và kớch thớch cỏ ủẻ bằng thuốc kớch dục tố sẽ ảnh hưởng ủến quỏ trỡnh phỏt dục của cỏ Chiờn nhanh hơn so với ngoài tự nhiên. Ngay sau khi cỏ cỏi ủẻ trứng ta tiến hành thụ tinh nhõn tạo bằng cỏch dựng lụng gà khuấy nhẹ, sau ủú cho thờm 1 ớt nước ủể làm tăng ủộ hoạt ủộng của tinh trựng. Ngay sau khi trứng tiếp xỳc với nước thỡ quỏ trỡnh hoạt hoỏ bắt ủầu, ủú là sự hình thành màng thụ tinh bằng cách làm dày màng noãn hoàng ngoài cùng bởi chất từ nang vỏ.
Sự tăng kớch thước sau khi thụ tinh ủược rất nhiều tỏc giả cho là hiện tượng có lợi vì nó tạo ra khoảng không gian rộng cho phôi phỏt triển, giỳp cho phụi cử ủộng một cỏch tự do, tăng cường sự xỏo trộn chất dịch quanh noón hoàng và cải thiện quỏ trỡnh trao ủổi khớ trong quỏ trỡnh trứng phát triển. Quá trình phân cắt tế bào trứng cá Chiên cũng theo quy luật chung như ở cỏc loài cỏ xương ủú là kiểu phõn cắt ủoạn noón hoàng hay là kiểu phõn cắt không hoàn toàn. Chúng tôi thiết nghĩ vì ủõy là loài cỏ sống ở tầng ủỏy trong mụi trường nước chảy nơi cú nhiệt ủộ thấp, khi ấp ở nhiệt ủộ cao thỡ quỏ trỡnh phỏt triển của phụi rất thấp.
Qua biểu ủồ trờn chỳng tụi nhận thấy, nhiệt ủộ khụng ảnh hưởng nhiều ủến tỷ lệ thụ tinh, nhưng lại ảnh hưởng rừ rệt ủến tỷ lệ nở của cỏ bột. Như vậy qua quỏ trỡnh theo dừi sự phỏt triển của phụi cỏ Chiờn, chỳng tụi nhận thấy nhiệt ủộ thớch hợp nhất cho phụi phỏt triển là từ 23,5- 25 oC.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………71. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………72. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………73.