Phân lập và xác định cấu trúc hợp chất từ rễ cây vối (Cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr et Perry) ở Nghệ An

MỤC LỤC

Cây sắn thuyền (Syzygium resinosum)

Sắn thuyền là cây mọc hoang và đợc trồng hầu hết khắp các tỉnh miền Bắc nớc ta. Hà Nội cũng có, ngoài ra còn có ở Hoà Bình, Hà Tây, Nam Định, Thái Bình, Ninh Bình, Thanh Hóa, Nghệ An. Cụm hoa mọc ở kẽ lá rụng hay cha rụng, thành chuỳ dài 2-3cm, tha hợp thành nhóm dài 20cm, trục gầy nhỏ, tận cùng bởi 3 hoa không có cuống.

Vào tháng 2 (nhân dân gọi là vụ chiêm, có ít hoa và khi quả. chín rất chát) và vào tháng 5 (nhân dân gọi là vụ mùa, cho năng suất rất cao và quả khi chín có vị ngọt hơi chát). Rễ cây có hình chân kiềng có 3 rễ to bò là là trên mặt đất, một rễ cọc và đợc phủ bằng một lớp bột màu trắng. Lá sắn thuyền tơi giã nhỏ đắp lên vết thơng có tác dụng làm se vết thơng, chống nhiễm trùng, tổ chức sẹo có điều kiện phát triển, làm cho vết thơng chóng lên da non.

Vỏ cây sắn thuyền sấy khô, tán bột dùng để chữa bệnh tiêu chảy cho trẻ em. Axit asiatic phân lập từ cây sắn thuyền có tác dụng lên vi khuẩn streptoccus mutans [16].

Cây ổi (Pridium guiava Linn)

Một nghiên cứu khác ghi nhận tác dụng ngăn chặn sự phát triển mụn trứng cá do các vi khuẩn loại Propioni becterium acnes gây ra. Tuy không thể bằng các kháng sinh doxycylin và clindamycin, nhng có thể hiệu nghiệm trong các trờng hợp mụn trứng cá lờn kháng sinh và không dùng đợc kháng sinh. Ngoài khả năng ức chế vi khuẩn thì trong lá và trong quả đều có tác dụng hạ đờng huyết nên đợc dùng để trị bệnh tiểu đờng.

Đông y cho rằng, bệnh tiểu đờng thuộc chứng tiêu khát, việc sử dụng những hợp chất thu sáp là hợp lý. Theo nghiên cứu của các nhà khoa học Hàn Quốc cũng ghi nhận hoạt tính ức chế men protein tyrosin hosphatase 1B của dịch chiết lá ổi. Hoạt tính này cho thấy dịch chiết lá ổi thử trên chuột có tác dụng trị tiểu đờng typ 2, còn các nhà khoa học Đài Loan (Trung Quốc) nghiên cứu trên chuột đã gây tiểu đ- ờng typ 2, lấy nớc ép quả ổi tơi chích qua màng phúc mạc với liều 1g/kg đã.

Các bộ phận của ổi thờng đợc dùng để chữa những bệnh nh tiết tả, cửu lị, viêm dạ dày cấp và mạn tính, thấp chẩn, sang thơng xuất huyết, tiểu đờng, băng huyết..[ 4 ]. Những chất này khi thủy phân cho genin (96) và quercetin (97) (quercetin có khả năng chống oxy hóa mạnh hơn vitamin E 9,8 lần).

Cây nghiên cứu

Thành phần hoá học

Các nhà hóa học Trung Quốc [20] đã nghiên cứu thành phần hoá học của tinh dầu lá, tinh dầu nụ Vối ở vùng Quảng Đông, Quảng Tây và Vân Nam. Tác giả Min BS và các cộng sự [22] đã tách đợc 4 flavonoit mới có hoạt tính chống oxy hoá từ nụ vối.

Sử dụng và hoạt tính sinh học

Khảo sát dợc lý nớc sắc từ lá vối cho thấy nó có tác dụng lên vi khuẩn gây ra bệnh đờng ruột, các vi khuẩn gây bệnh viêm da, có tác dụng trợ tim. Những nghiên cứu gần đây của các nhà khoa học Trung Quốc còn phát hiện khả.

Các phơng pháp phổ để xác định cấu trúc rễ cây vối 1. Phổ cộng hởng từ hạt nhân

Các phơng pháp sắc ký

    - Các ion mảnh luôn đợc hình thành từ ion phân tử trung hoà điện hoặc ion lớn, không bao giờ đợc hình thành từ phân tử trung hoà điện. Sau khi đã có khối phổ cần tiến hành viết các cơ chế phân mảnh của phân tử. Các cơ chế này phải dựa vào phổ khối, cụ thể là dựa vào các pic đặc trng của phổ khối, rồi tra bảng các số khối thờng gặp để dự đoán các mảnh đợc phân ra.

    Từ các cơ chế phân mảnh này kết hợp với khối lợng phân tử của chất mẫu có thể đa ra các cấu trúc dự báo của phân tử chất mẫu. Lợng chất đa lên bản mỏng phải đủ để hiện lên các vết, nhng cũng không quá nhiều vì nếu quá nhiều thì các vết sẽ trùng lên nhau. Lớp mỏng sau khi đã chấm chất, để ngoài không khí khoảng 2 phút cho dung môi bay hơi hết, sau đó cho vào bình sao cho chân bản mỏng đặt nghiêng với thành bình một góc 150 (Bình để chạy sắc ký có miệng rộng, nắp nhám, đáy phẳng, đợc bão hoà bằng hệ dung môi đã chọn).

    Do tác dụng của lực mao quản, dung môi thấm theo lớp mỏng qua điểm xuất phát, chờ cho tuyến dung môi chạy lên cách mép trên của lớp mỏng chừng 1,5 cm thì lấy ra. Nguyên tắc của phơng pháp này là dựa vào tính chất hấp phụ khác nhau của các cấu tử trong hỗn hợp cần tách vào một chất hấp phụ – pha tĩnh. - Cột chạy sắc ký thờng dùng đợc làm bằng thuỷ tinh (Cột lắp thẳng đứng).

    - Cácdung môi rửa giải thờng dùng là Cloroform, metanol, ête dầu hoả, etyl axetat, axeton. Thông thờng rửa giải liên tiếp bằng các hệ dung môi có khả năng giải hấp tăng dần (hay độ phân cực tăng dần). Nhồi silicagen vào cột (nhồi khô hoặc nhồi ớt), sau đó cho hỗn hợp chất cần tách (đã đợc trộn với silicagen khô theo tỉ lệ 1:1) vào, trên cùng cho tiếp một silicagen nữa và một lớp bông để tránh sự xáo trộn mẫu chất và silicagen khi rót dung môi vào.

    Cuối cùng tiến hành phân tích dung dịch chảy ra khỏi cột (lu ý: Khi rót dung môi phải luôn ngập ở trên lớp bông và không nên rót thẳng vào thành cột mà rót qua thành phễu, thời gian chạy cột không nên kéo dài vì các chất phân tích có thể bị biến tÝnh).

    Phơng pháp nghiên cứu 1. Phơng pháp lấy mẫu

    Phơng pháp phân tích, phân tách và phân lập các hợp chất

    Để phân tích và phân tách cũng nh phân lập các hợp chất, sử dụng các ph-.

    Nghiên cứu các hợp chất từ rễ cây vối 1. Phân lập các hợp chất

    Sau khi cho dung môi vào rửa giải thấy trên cột sắc ký xuất hiện bốn khoảng màu. Dới cùng có màu vàng nhạt, tiếp đến màu nâu đen, ở giữa màu vàng đậm và trên cùng có màu đen. Thử hoà tan chất này trong axeton thì thấy tan ít nên axeton đợc dùng để rửa chất bẩn.

    Sau khi đợc rửa nhiều lần với axeton, chất rắn đợc kết tinh lại trong dung môi metanol thu đợc một hợp chất tơng đối sạch có tinh thể hình rẽ quạt màu trắng, kí hiệu là hợp chất 150. Sau khi đợc rửa nhiều lần với axeton, chất rắn đợc kết tinh lại trong dung môi metanol thì thu đợc một hợp chất tơng đối sạch có tinh thể hình rẽ quạt màu trắng, ký hiệu là hợp chất 151. Chiết với các dung môi và cho bay hơi tự nhiên n-hexan clorofom etylaxetat butanol.

    Bảng 2.1:  Số liệu của quá trình chạy cột cao cloroform rễ  vối TT Hệ dung môi CHCl 3 /CH 3 OH Tỉ lệ Phân đoạn
    Bảng 2.1: Số liệu của quá trình chạy cột cao cloroform rễ vối TT Hệ dung môi CHCl 3 /CH 3 OH Tỉ lệ Phân đoạn