MỤC LỤC
Quan sát và mô tả đặc điểm hình thái thực vật về: dạng sống, thân rễ, thân khí sinh, lá (hình dạng phiến, chóp, gân, gốc, cuống, kích thước), hoa (dạng hoa, kích thước, lá bao, bộ nhị, bộ nhụy), quả và hạt (hình dạng, màu sắc, kích thước), của các mẫu giống. Trỡnh tự sau khi xử lý thụ sẽ được sử dụng để so sánh với trình tự tương ứng đã được công bố và các loài thân thuộc trên GenBank (Http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore) nhằm loại bỏ các vị trí lỗi do giải trình tự và phát hiện đa hình nucleotide đơn. - Vật liệu nghiên cứu: Quả cây Bảy lá một hoa mẫu giốngParis2, cây 5 năm tuổi, sau khi chín (vỏ hạt chuyển sang màu đỏ tươi, vỏ quả đã mở ra), thuhái, loại bỏ vỏ quả, vỏ hạt trước khi gieo.
Hạt sau khiđượcxử lý theo các côngthứcthí nghiệm (ở các thí nghiệm 2, 3 và 4), được gieo trongvườnươm, giáthểgieo trồng là 100% mùn núi,sửdụng túi bầu kíchthước8 x 12 cm. Các yếu tố được ápdụngđồng nhất ở các thí nghiệm 10, 11, 12 và13, gồm:sửdụngthânrễcâyBảylámộthoa4nămtuổi,cóítnhất4-5mầm/homrễ,được cắt thành các phần, mỗi phần có 2 mầm (thínghiệmmầm áp dụng theo công thức đãxây dựng)và được nhúng vào GA3 60 ppm trongthờigian 5 phút (riêng thí nghiệm nồng độ GA3 xử lý theo các côngthứcđãxây dựng).Thời vụ trồng vào tháng 12.Sửdụng giáthểlà đất mùn rừng tự nhiên bổ sung trichoderma (riêng thí nghiệm giá thể, theo các công thức đãxâydựng). Các thí nghiệm nghiên cứu kỹ thuật trồng (thời vụ, mật độ, phân bón) được bốtrítheokiểukhốiđầyđủngẫunhiên,diệntíchôthínghiệmlà50m2chưakểdải bảo vệ bao gồm cả các diện tích che phủ.
Quy trìnhkỹthuật trồng, chăm sóc bón phân được thực hiện theo Quy trình kỹthuậtcủaViệnNghiêncứuvàpháttriểnVùngnăm2015(Phụlục2).Riêngthí nghiệm về mật độ, phân bón, trồng và bón theo các công thức đã xâydựng. * Cỏc chỉ tiờu theo dừi:. *) Chỉ tiêu đặc điểm thực vật của cây Bảy lá một hoa. - Chiều dài cuống hoa (cm): đo từ nách lá đến đàihoa. *) Chỉ tiêu về gieo ươm hạt giống của cây Bảy lá một hoa. *) Chỉ tiờu theo dừi về sinh trưởng của cõy con Bảy lỏ một hoa.
Trong đó: X%: hàm lượng saponin tổng số trong dược liệu (tính theo dược liệu khô tuyệt đối). Địa điểm phân tích mẫu đất nước và phân tích chất lượng dược liệu tại Viện Nghiên cứu và phát triển Vùng, Bộ Khoa học và Công nghệ.
Ghi chú: a: hình trụ, màu nâu mẫu giốngParis1; b: hình trụ màu nâu vàng mẫu giốngParis2.; c: hình trụ màu nâu mẫu giốngParis3. Nghiên cứu các đặc điểm hình thái thân cây Bảy lá một hoa có ý nghĩa rất quantrọnggiúpphânbiệtdượcliệuthật,giảvàtránhnhầmlẫntrongquátrìnhkhai. Các mẫu giống Bảy lá một hoa đều có sự đồng nhất vềcấutrúccâyvàcácđặcđiểmcủacơquansinhdưỡng,cơquansinhsảnvàhình thức sinh trưởng trong năm.
Thân khí sinhlà phần thân ở trên mặt đất, được tính từ phần thân rễ đến điểm cuối là phần mang lá, cũng là điểm mọc cụm hoa của cây. Đặc điểm hình thái thân khí sinh của các mẫu cây Bảy lá một hoa TT Tính trạng Paris 1 Paris 2 Paris 3 LSD0,05 CV%. Thân rễ chính dạng hình trụ, đường kính khoảng 3 - 5 cm, có nhiều sẹo (mầm ngủ) do thân trên mặt đất tàn lụi đểlại,vàokhoảngcuốimùađôngđầumùaxuânhàngnămtừđầuthânrễnảymầm.
Do đócầnchú ý độ sâu đặt homcâycon khitrồngđể các thân rễ chính, thânrễphụ sinh ra ở các năm sauvẫncó đủ dinhdưỡngtrongđấtđể phát triển tốtnhất. Mắt mầm trên thân rễ phụ mọc ra từ thân rễ chính mẫuParis2 ĐặcđiểmhìnhtháithânkhísinhvàthânrễcủacâyBảylámộthoakhôngcó sự khác biệt giữa các mẫu giống.Tuynhiên về màu sắc thân khí sinh có sự khác biệt.ThânkhísinhmẫugiốngParis2cómàuxanhtím,cácmẫugiốngcònlạiđều. Thực vật có hạt nói chung từ khi nảy mầm đến khi trưởng thành thường có các kiểulỏkhỏcnhauvềhỡnhdạng,cấutạovàchứcnăng.ĐốivớicõyBảylỏmộthoa, theo dừi cỏc mẫu giống cho thấy trong chu trình sinh trưởng từ khi hạt nảy mầm đến khi cây trưởng thành có 3 loại lá đó là lá mầm, lá bao chồi, lá thật trên thân khí sinh với đặc điểm đặctrưng.
Theo dừi quỏ trỡnh nảy mầm của hạt giống cõy Bảy lỏ một hoa cho thấy, hạt giống hút nước và căng phồng, khi lá mầm đạt kích thước tối đa thì đỉnh sinh trưởng sẽ tăng kích thước và thoát khỏi ống cuốn lá mầm tại vị trí gốc. Về đặc điểm màu sắc lá, hai mẫu giốngParis1 vàParis3 đều có màu xanh, trong khi mẫu giốngParis2 có màu xanh đậm (nhìn chung lá giống câyParis2 có màu xanh đậm thể hiện lá có khả năng quang hợp tốt hơn). Lá bao chồi:là lớp vỏ bảo vệ mỏng, khi khô có màu nâu vàng, mặt ngoài thô cứng, mặt trong của lá bao chồi nhẵn bóng, mép lá nguyên.
Lá bao chồi trên thânrễngắnhơnsovớilábaochồithânkhísinh.Lábaochồicó5-9,thườnglà6, dài1- 5cm.Hìnhchuông,đáyrộng3-6cm.Cócácgândọcmờ.Lábaochồikhi rụng sẽ để lại 1 vòng nhỏ trên thân rễ, thường gọi là “sẹolá”. Quan sát đặc điểm hoa của 3 mẫu giống Bảy lá một hoa cho thấy, lá đài của hoa có màu sắc xanh, trong đóParis1 vàParis3 có màu xanh nhạt,Paris2 màu xanh đậm, màu xanh của lá đài tương đương với màu xanh của lá. Các mẫu giống đều có quả khi chín màu đỏ, hạt màu nâu sáng, hình dạnghạtbầudục.TuynhiênP1000hạtcủa3mẫugiốngcósựkhácbiệt,mẫugiốngParis2hạttohơ n2giốngcònlại.Cụthể,mẫugiốngParis2cóP1000hạtlà48,6.