Đánh giá khả năng phòng trừ sinh học nhện đỏ hai đốm Tetranychus urticae của chủng vi khuẩn Bacillus subtilis
MỤC LỤC
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Sau khi nhận giống vi sinh vật từ phòng thí nghiệm Công nghệ vi sinh Trường Đại học Mở Tp.HCM chúng tôi tiến hành hoạt hóa trên đĩa môi trường NA để kiểm tra hình thái đại thể và nhuộm Gram để kiểm tra hình thái vi thể. Các vi sinh vật này có khả năng biến dưỡng năng lượng theo phương thức theo với oxi là chất nhận điện tử cuối cùng trong chuỗi truyền điện tử, tạo H2O2. Đồng thời, thực hiện phương pháp phun, sau khi nhện đỏ đã được đặt vào lá, dịch chiết thực vật được phun với khoảng cách 25 - 30 cm với một bình phun phun tay có dung tích 5 ml cho đến khi bề mặt lá được làm ướt bằng những giọt rất mịn.
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 20 Sau khi tiến hành thử nghiệm sàng lọc các loại thực vật có khả năng tiêu diệt nhện đỏ, tiến hành thử nghiệm loại thực vật có khả năng tiêu diệt nhện đỏ tốt nhất ở các nồng độ (0,5 %, 1 %, 2 %). Đồng thời, thực hiện phương pháp phun, sau khi nhện đỏ đã được đặt vào lá, các chủng vi khuẩn được phun với khoảng cách 25 - 30 cm với một bình phun phun tay có dung tích 5 ml cho đến khi bề mặt lá được làm ướt bằng những giọt rất mịn. Lên men vi sinh vật: 100ml hỗn hợp dịch dịch chiết thực vật được tiệt trùng trong 10 phút ở 121°C và được làm nguội đến 37°C trước khi thêm vi khuẩn.
Lá đậu được ngâm trong dịch vi khuẩn đã lên men trong dịch chiết thực vật trong 20 giây ở các nồng độ (3, 6, 12 %) với thể tích bằng nhau và để khô ở nhiệt độ phòng, đối chứng ngâm trong 20 giây trong nước cất. Đồng thời, thực hiện phương pháp phun, sau khi nhện đỏ đã được đặt vào lá, dịch vi khuẩn đã lên men trong dịch chiết thực vật của mỗi chủng vi khuẩn được phun với khoảng cách 25 - 30 cm với một bình phun phun tay có dung tích 5 ml cho đến khi bề mặt lá được làm ướt bằng những giọt rất mịn. Sau khi tiến hành thử nghiệm sàng lọc các chủng vi khuẩn lên men trong dịch chiết thực vật có khả năng tiêu diệt nhện đỏ, tiến hành thử nghiệm chủng vi khuẩn lên men có khả năng tiêu diệt nhện đỏ tốt nhất ở các nồng độ (0,5 %, 1 %, 2 %) cùng với loại thực vật tốt nhất đã được khảo sát ở mục 2.8.1.
Đồng thời, thực hiện phương pháp phun, sau khi nhện đỏ đã được đặt vào lá, dịch vi khuẩn tăng sinh kết hợp với dịch chiết thực được phun với khoảng cách 25 - 30 cm với một bình phun phun tay có dung tích 5 ml cho đến khi bề mặt lá được làm ướt bằng những giọt rất mịn. Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, 9 chủng vi khuẩn được thực hiện với mỗi chủng có 4 nghiệm thức: ĐC, 3%, 6%, 12% với 3 lần lặp lại NT1: dịch vi khuẩn tăng sinh kết hợp với dịch chiết thực vật, hỗn hợp được pha loãng 3%. Sau khi tiến hành thử nghiệm sàng lọc các chủng vi khuẩn tăng sinh kết hợp với dịch chiết thực vật có khả năng diệt nhện đỏ, tiến hành thử nghiệm chủng vi khuẩn tăng sinh có khả năng diệt nhện đỏ tốt nhất ở các nồng độ (0,5 %, 1 %, 2 %) cùng với loại thực vật tốt nhất đã được khảo sát ở mục 2.8.1.
Dựa vào kết quả phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn, thực vật tiềm năng có khả năng diệt nhện đỏ, tiến hành thử nghiệm đánh giả hiệu quả diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn, thực vật tiềm năng ở mô hình nhà lưới.
KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN
Thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng
Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt của nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng nồng độ 106. Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt của nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng nồng độ 2.106. Trong cùng một cột, các trị số có cùng mẫu tự không có sự khác biệt ở mức ý nghĩa 0,05 qua phép thử Duncan.
Sau 96h cho thấy, nghiệm thức BT và Q16 cho hiệu lực tiêu diệt nhện cao nhất, thấp nhất là PH3 và có khác biệt so với đối chứng. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 39 Kết quả thu được cho thấy hiệu lực tiêu diệt nhện của các chủng Bacillus sp. 9 Kết quả tác động dịch lên men của chủng vi khuẩn BT1 đến khả năng tiêu diệt nhện đỏ.
Qua quá trình thử nghiệm cho thấy: tiến hành thử nghiệm đánh giá khả năng tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn nồng độ 5 x 107 ở quy mô nhà lưới trên cây đậu. Qua trình thử nghiệm: Tiến hành thử nghiệm đánh giá hiệu lực tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn PH3 nồng độ 5 x 107 ở quy mô nhà lưới trên cây đậu.
Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn được lên men trong dịch chiết thực vật
Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 6%. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 44 Sau 96h cho thấy, nghiệm thức PH3, BT và P20 cho hiệu lực tiêu diệt nhện cao nhất, thấp nhất là KT2 và có khác biệt so với đối chứng. Tiến hành thử nghiệm đánh giá khả năng tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn BT1 được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 3% ở quy mô nhà lưới trên cây đậu.
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 45 Bảng 3.15 Kết quả tác động của chủng vi khuẩn PH3 được lên men trong. Tiến hành thử nghiệm đánh giá khả năng tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn PH3được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 3% ở quy mô nhà lưới trên cây đậu. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 46 3.7 Kết quả thử nghiệm khả năng diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật.
Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật kết hợp vi khuẩn lên men nồng độ 3%. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 49 3.7.1 Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật và 2. Tiến hành thử nghiệm đánh giá khả năng tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn BT1 được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 3% ở quy mô nhà lưới trên cây đậu.
Tiến hành thử nghiệm đánh giá khả năng tiêu diệt nhện đỏ của vi khuẩn BTlđược lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 3% ở quy mô nhà lưới trên cây đậu.
Kết quả xửa lý số liệu
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 62 Bảng Kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt của nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng nồng độ 106 (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 63 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt của nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng nồng độ 2.106 (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 64 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt của nhện đỏ của dịch lên men một số chủng vi khuẩn tiềm năng nồng độ 3.106 (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi).
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 65 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 3% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 66 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 6% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 67 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng tiêu diệt nhện đỏ của các chủng vi khuẩn được lên men trong dịch chiết thực vật nồng độ 12% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi).
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 68 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật kết hợp vi khuẩn lên men 3% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 69 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật kết hợp vi khuẩn lên men 6% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi). SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 70 Bảng kết quả thử nghiệm khả năng diệt nhện đỏ của dịch chiết thực vật kết hợp vi khuẩn lên men 12% (bao gồm số liệu trước và sau chuyển đổi).
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 71 Kết quả sàng lọc các loại thực vật, vi khuẩn có khả năng tiêu diệt nhện đỏ Tetranychus uricae. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 72 Thử nghiệm ảnh hưởng của các vi khuẩn đến khả năng tiêu diệt nhện đỏ sau 96h. SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 74 Thử nghiệm ảnh hưởng của các vi khuẩn lên men trong dịch chiết thực vật đến khả năng tiêu diệt nhện đỏ sau 96h.
SVTH: PHẠM THỊ PHƯƠNG THẢO 75 Thử nghiệm ảnh hưởng của các vi khuẩn đã lên men và dịch chiết thực vật đến khả năng tiêu diệt nhện đỏ sau 96h.