Nghiên cứu thành phần loài nấm hại hạt thóc bảo quản tại Hà Nội và vùng phụ cận

MỤC LỤC

MỞ ðẦU

Tớnh cấp thiết của ủề tài

Nguyễn Thuỳ Chõu và CTV (1996) ủó nghiờn cứu tỡnh hỡnh nhiễm ủộc tố nấm ngụ: aflatoxin, fumonixin, Ochotoxin A, deoxynivalenol và nivalenol,v.v và các biện pháp phòng trừ. Hạt thúc trong bảo quản là ủối tượng tấn cụng của nhiều loài nấm, chúng gây hại làm giảm giá trị dinh dưỡng của hạt mặt khác lưu ý một số loài nấm trong quỏ trỡnh gõy hại chỳng cú thể sinh ra cỏc loại ủộc tố gõy hại ủến sức khỏe con người và vật nuụi khi sử dụng.

Mục ủớch và yờu cầu của ủề tài 1. Mục ủớch

Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………. Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……….

VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

    Tiến hành nghiờn cứu, giỏm ủịnh cỏc loài nấm hại hạt thúc dựa theo tài liệu của Nguyễn Văn Tuất (1997) và tài liệu giỏm ủịnh nấm bệnh hạt giống của Viện nghiên cứu bệnh hạt giống ðan Mạch (DGISP, 1998). Sau ủú tiến hành ủặt ẩm, mỗi mẫu nhắc lại 3 lần, mỗi lần 400 hạt và mỗi mẫu hạt ủều cú cụng thức ủối chứng khụng xử lý chế phẩm nấm ủối khỏng(Cụng thức ủối chứng tiến hành xỏc ủịnh tỷ lệ nhiễm nấm bằng phương phỏp giỏm ủịnh thành phần nấm trỡnh bày ở mục 3.5.2).

    KẾT QỦA NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

    Xỏc ủịnh thành phần và mức ủộ nhiễm cỏc loại nấm gõy hại trờn thóc bảo quản vùng Hà Nội và phụ cận

    Qua bảng 4.1 chỳng tụi xỏc ủịnh ủược thành phần nấm gõy hại thúc trong bảo quản khá phong phú gồm 15 loài nấm (Aspergillus niger, Alternaria padwickii, Bipolaris oryzae, Tilletia barclayana, Aspergillus flavus,. STT Tên khoa học Họ Bộ MðPB. 3 Aspergillus niger Tiegh Trichocomaceae Eurotiales +++. 4 Tilletia barclayana Sacc and Syd Tilletiaceae Ustilaginales ++. 8 Bipolaris oryzae Shoem Dematiaceae Moniliales ++. 9 Cladosporium oryzae Vries Moniliaceae Moniliales + 10 Fusarium moniliforme Sheld Nectriaceae Hyrocreales + 11 Micodochium oryzae Gam and Haw Moniliaceae Moniliales + 12 Pyricularia oryzae Cavara Moniliaceae Moniliales + 13 Rhizoctonia solani Palo Corticiaceae Polyporales + 14 Sarocladium oryzae Gam and Haw Moniliaceae Moniliales + 15 Ustilaginoides virens Tak Ustilaginaceae Ustilaginales +. Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ………. Penicillium islandicum, Curvularia lunata, Fusarium moniliforme, Micodochium oryzae, Pyricularia oryzae, Rhizoctonia solani, Sarocladium oryzae, Ustilaginoides virens, Cladosporium oryzae), thuộc 7 họ (Dematiaceae, Trichocomaceae, Tilletiaceae, Nectriaceae, Moniliaceae, Corticiaceae và Ustilaginaceae), 5 bộ (Moniliales, Eurotiales, Ustilaginales, Hypocreales, Polyporales) và mức ủộ nhiễm của cỏc loài nấm trờn cỏc mẫu hạt thúc là khỏc nhau. Loài Aspergillus niger cú mức ủộ nhiễm trờn hạt thúc cao (tỷ lệ hạt nhiễm >15%), tỷ lệ nhiễm của các loài nấm: Alternaria padwickii, Bipolaris oryzae, Tilletia barclayana, Aspergillus flavus ở mức trung bình (tỷ lệ hạt nhiễm từ 5 – 15%). Còn lại các loài nấm Penicillium islandicum, Curvularia lunata, Fusarium moniliforme, Micodochium oryzae, Pyricularia oryzae, Rhizoctonia solani, Sarocladium oryzae, Ustilaginoides virens, Cladosporium oryzae có tỷ lệ nhiễm thấp (tỷ lệ hạt nhiễm < 5%).

    Trờn cơ sở xỏc ủịnh ủược cỏc loài nấm gây hại trên hạt thóc bảo quản chúng tôi tiến hành nghiên cứu tỷ lệ nhiễm của từng loài nấm trên các mẫu hạt thóc thu thập tại vùng Hà Nội và phụ cận. Tiến hành thớ nghiệm nghiờn cứu mưc ủộ nhiễm trờn tất cả cỏc mẫu hạt thúc, mỗi mẫu lấy 400 hạt tiến hành ủặt ẩm theo phương phỏp giấy thấm và nhắc lại 3 lần. Kết quả nghiờn cứu xỏc ủịnh mức ủộ nhiễm một số loài nấm tiờu biểu trờn cỏc mẫu hạt thúc ủược trỡnh bày ở bảng 4.2a và 4.2b.

    Trong cỏc ủiều kiện bảo quản, thời gian bảo quản khỏc nhau thỡ sự gõy hại của các loài nấm trên hạt thóc cũng khác nhau. Kết quả ở bảng 4.2a và bảng 4.2b cho thấy: tỷ lệ nhiễm từng loài nấm trên các mẫu hạt thóc ở các kho bảo quản khác nhau là không giống nhau, ngay cả tại cùng một kho tỷ lệ nhiễm cũng không giống nhau. Kết quả ở bảng 4.2a, 4.2b cho thấy tỷ lệ nhiễm của các loài nấm khác nhau trên từng mẫu: với mẫu KT2 tỷ lệ nhiễm cao nhất là nấm A.

    Bảng 4.2 a. Mức ủộ nhiễm một số loài nấm trờn cỏc mẫu hạt   thóc bảo quản vùng Hà Nội và phụ cận
    Bảng 4.2 a. Mức ủộ nhiễm một số loài nấm trờn cỏc mẫu hạt thóc bảo quản vùng Hà Nội và phụ cận

    Nghiờn cứu ủặc ủiểm hỡnh thỏi, sinh học của một số loài nấm hại hạt thóc bảo quản

    Nếu cú nhiệt ủộ thớch hợp cho sự phỏt sinh, phỏt triển của nấm gõy bệnh kết hợp với cỏc yếu tố khỏc cũng thuận lợi sẽ tạo ủiều kiện thuận lợi cho nấm gây hại mạnh trong hạt thóc bảo quản. Do vậy chúng tôi tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của yếu tố nhiệt ủộ ủến sự phỏt triển của 4 loài nấm ủại diện là Alternaria padwickii, Bipolaris oryzae, Fusarium moniliforme và Aspergillus flavus. Trong khi ủú ở ngưỡng nghiệt ủộ 35ºC nấm phỏt triển rất chậm, ủường kớnh tản nấm sau 5 ngày cấy chỉ ủạt 12.3mm, 20ºC phỏt triển tốt hơn ủo ủường kớnh tản nấm 5 ngày sau cấy là 61.7mm và ở cỏc ngày khỏc nhau chúng tôi cũng có kết quả nấm Fusarium moniliforme phát triển tốt nhất trong phạm vi nhiệt ủộ 25 - 30ºC.

    Như vậy, từ cỏc kết quả nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt ủộ ủến sự phỏt triển của 3 loài nấm cho thấy 3 loài nấm Alternaria padwickii, Fusarium moniliforme, Bipolaris oryzae ủều phỏt triển thớch hợp nhất ở ngưỡng nhiệt ủộ từ 25 - 300C và thuận lợi nhất ở 300C. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt ủộ ủến nấm Aspergillus flavus chỳng tôi tiến hành nuôi cấy trên môi trường Czapek – Dox, là môi trường thuận lợi cho nấm phỏt triển. Sự phát triển của các Isolates nấm Aspergilus flavus phân lập trên một số mẫu hạt thóc bảo uản ở cỏc ngưỡng nhiệt ủộ khỏc nhau trờn mụi trường Czapek – Dox.

    Từ kết quả bảng 4.7 chúng tôi thấy các Isolates nấm Aspergilus flavus có thể phỏt triển trong phạm vi nhiệt ủộ rộng từ 20 - 300C, nhưng ở nhiệt ủộ 28 – 300C nấm phỏt triển thuận lợi nhất, sau 7 ngày nuụi cấy ủường kớnh tản nấm ủó ủạt tối ủa là 85mm. Cỏc nghiờn cứu về ảnh hưởng của yếu tố mụi trường ủều ủược tiến hành ủặt ẩm ở 300C, là ủiều kiện nhiệt ủộ tốt nhất cho nấm hại hạt thúc phỏt triển. Qua bảng 4.8 chúng tôi thấy môi trường PGA thích hợp nhất cho sự sinh trưởng và phỏt triển của nấm Alternaria pacdwickii, sau 5 ngày nuụi cấy ủường kớnh tản nấm trờn mụi trường PGA là 65.5mm.

    Nấm Bipolaris oryzae phát triển tốt nhất trên môi trường PGA, sau 5 ngày nuụi cấy ủường kớnh nấm ủạt 85.0mm (kớn hộp), trờn mụi trường WA do nghốo dinh dưỡng nờn nấm phỏt triển rất chậm, sau 5 ngày nuụi cấy ủường kớnh nấm chỉ ủạt 23.4mm. Qua bảng 4.10 chúng tôi thấy môi trường PGA thuận lợi nhất cho nấm Fusarium moniliforme phỏt triển, ủường kớnh tản nấm 5 ngày sau cấy ủạt tối ủa 85mm và môi trường WA do nghèo dinh dưỡng nên nấm phát triển rất chậm, sau 5 ngày nuụi cấy ủường kớnh nấm chỉ ủạt 45.9mm.

    Bảng 4.3. Triệu chứng gây bệnh trên hạt thóc bảo quản của một số loài nấm tiêu biểu
    Bảng 4.3. Triệu chứng gây bệnh trên hạt thóc bảo quản của một số loài nấm tiêu biểu

    Xỏc ủịnh thành phần và mức ủộ nhiễm của một số loài nấm cú khả năng sinh ủộc tố trờn hạt thúc vựng Hà Nội và phụ cận

    Ảnh hưởng của mụi trường nuụi cấy ủến sự phỏt triển của nấm Aspergilus flavus. Qua bảng 4.11 chúng tôi thấy Aspergilus flavus phát triển khá tốt trên các môi trường thí nghiệm nhưng môi trường phù hợp nhất là Czapek – Dox, 7 ngày sau cấy ủường kớnh ủạt tối ủa 85mm, PGA ủạt 72.1mm, con PCA chậm nhất ( 72.6mm). Như vậy riêng với nấm Aspergilus flavus thì môi trường nhân tạo thuận lợi nhất là Czapek – Dox.

    Xỏc ủịnh thành phần và mức ủộ nhiễm của một số loài nấm cú khả năng. Thành phần và tỷ lệ nhiễm của một số loài nấm có khả năng sinh ủộc tố trờn cỏc mẫu hạt thúc bảo quản. Qua bảng 4.12 chúng tôi thấy loài nấm Aspergillus niger có tỷ lệ hạt thóc nhiễm cao nhất 16.17%, còn loài nấm Aspergillus flavus tỷ lệ hạt nhiễm thấp hơn (9.64%), loài nấm Alternaria padwickii tỷ lệ hạt nhiễm nấm là 10.33%.

    Cỏc loài nấm hại trờn ủều cú khả năng sinh ủộc tố, cỏc ủộc tố ủú cú ảnh hưởng trực tiếp ủến chất lượng hạt thúc bảo quản cũng như ủến sức khỏe của con người và gia súc khi sử dụng. Khảo sát hiệu lực phòng trừ các loài nấm hại hạt thóc bảo quản bằng và.

    Khảo sát hiệu lực phòng trừ các loài nấm hại hạt thóc bảo quản bằng và chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng Trichoderma viride và nước Javel

    Hiệu lực ủối khỏng của nấm Trichoderma viride ủối với nấm Alternaria padwickii hại hạt thóc trên môi trường PGA. Hiệu lực của chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng T.viride với nấm Bipolaris oryzae trên môi trường PGA. Hiệu lực chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng của nấm Trichoderma viride với nấm Bipolaris oryzae hại hạt thóc trên môi trường PGA.

    Hiệu lực của chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng T.viride với nấm Aspergillus flavus trên môi trường PGA. Hiệu lực của chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng T.viride với nấm Aspergillus flavus trên môi trường PGA. Tiến hành thớ nghiệm lấy 5 mẫu hạt thúc ủại diện là: VT1, VT2, VT3, ðC1, ðC2.Cỏc mẫu hạt thúc ủem ngõm trong dung dịch chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng Trichoderma viride nồng ủộ 108 bào tử/ml trong thời gian 10 phỳt.

    Hiệu lực phòng trừ của chế phẩm T.viride với các loài nấm hại trên các mẫu hạt thóc bảo quản cũng cho chúng tôi những nhận xét tương tự. Hiệu lực phòng trừ của xử lý nước Javel 0.3% với các loài nấm hại khác một số mẫu hạt thóc có tỷ lệ thấp hơn, nhưng hiệu lực phũng trừ cỏc loài nấm hại hạt vẫn ủạt trờn 70%. Qua ủú chỳng tụi thấy rằng khi xử lý cỏc mẫu hạt thúc bảo quản bằng nước Javel 0.3% ủó cú hiệu quả cao trong việc phòng trừ hạn chế rất lớn sự phát sinh gây hại của một số loài nấm hại hạt thóc bảo quản.

    Bảng 4.14. Hiệu lực của chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng T.viride   với nấm Bipolaris oryzae trên môi trường PGA
    Bảng 4.14. Hiệu lực của chế phẩm sinh học nấm ủối khỏng T.viride với nấm Bipolaris oryzae trên môi trường PGA