MỤC LỤC
Hiện nay, những cụng trỡnh nghiờn cứu về cỏc giai ủoạn phỏt triển và sự phõn chia cỏc giai ủoạn phỏt triển noón bào cỏ song cũn ớt và chưa thống nhất. Khi nghiờn cứu cấu trỳc mụ học buồng trứng cỏ song ủỏ E.akaara, Wen- Young Tseng (1996), (Hình 1.6) cho thấy sự phát triển của noãn bào loài cá này chia làm 5 giai ủoạn. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp………13 + Giai ủoan 3: Noón bào cú ủường kớnh 60 - 120 àm, tế bào chất bắt màu sỏng lờn, nhõn lớn với cỏc tiểu hạch ngoại biờn, noón hoàng ủang hỡnh thành.
Cơ thể lỳc này ủó xuất hiện thể thoỏi hoỏ - khối màu nõu sẫm, màng phúng xạ của noón bào của giai ủoạn 4 phõn giải nhanh chúng, chỉ cũn lại duy nhất noãn hoàng và huyết cầu [24]. Cỏc noón bào ở giai ủoạn này lớn lờn khụng những chỉ do sự tăng về thể tích chất nguyên sinh mà còn do kết quả của việc tớch luỹ cỏc chất dinh dưỡng trong noón bào ủược tạo ra dưới dạng cỏc giọt mỡ và cỏc hạt noón hoàng cú từ màu vàng ủến da cam với những mức ủộ khỏc nhau. Cuối thời kỳ lớn nguyờn sinh dinh dưỡng, noón bào ủó cú vỏ phúng xạ ủược thụng với bờn ngoài bằng những kẽ rất nhỏ, qua cỏc lỗ ủú mà cỏc chất dinh dưỡng ủược chuyển vào tế bào, cỏc noón bào ủược bao quanh bằng nhiều lớp tế bào thực hiện chức năng vận chuyển chất dinh dưỡng vào trứng.
Khi cỏc noón bào bước sang giai ủoạn thành thục, cỏc tế bào biểu mụ nang sẽ tiết ra một chất làm tan, hấp thụ những mối liên kết giữa các bào nang và màng tế bào. Trong sinh sản nhân tạo, dưới tác dụng của cỏc hormon kớch dục, thời gian chuyển từ giai ủoạn 4 sang giai ủoạn 5 cú thể từ 10 - 20 giờ hoặc ớt hơn. Nói cách khác sự thành công của sự ủẻ trứng tự nhiờn hoặc nhõn tạo phụ thuộc vào sự hiểu biết chớnh xỏc cỏc giai ủoạn thành thục và thời gian ủẻ trứng của cỏ.
Cỏc giai ủoạn phỏt triển tuyến sinh dục và chuyển ủổi giới tớnh Thụng thường ở cỏc loài cỏ khụng cú sự chuyển ủổi giới tớnh từ cỏ ủực sang cỏ cỏi, nghĩa là tuyến sinh dục ủực và cỏi phỏt triển riờng lẻ khụng liờn quan gỡ ủến nhau thỡ cú thể xếp cỏc giai ủoạn phỏt triển tuyến sinh dục riêng biệt. + Giai ủoạn 5 và 6 (Chuyển ủổi giới tớnh và tinh hoàn non ): Những noón bào ở giai ủoạn 2 vẫn thấy trong phiến trứng, những hố lừm của mụ sinh tinh xuất hiện ở vựng ngoại vi. Trong cỏc bể ủẻ trứng thường ủược phõn thành 3 nhúm, nhúm trứng cá trôi nổi trên mặt nước là trứng thụ tinh tốt, nhóm trứng lơ lửng trong nước và nhúm trứng chỡm xuống ủỏy bể.
Phân tích tổ chức mô học tuyến sinh dục thụng qua việc cắt lỏt tế bào tuyến sinh dục và phõn tớch ủồng thời giới tớnh, mức ủộ thành thục. Cỏ song chuột ủược bắt lờn ủể nằm ngửa, sau ủú dựng dao và kộo giải phẫu mổ bụng cỏ thẳng từ lỗ hậu mụn lờn ủến hết phần dưới miệng. Trong khi mổ cố gắng khụng gõy tổn thương cho ruột, sau ủú tỡm tuyến sinh dục quan sỏt hỡnh thỏi, màu sắc và ủo kớch thước buồng trứng.
Xỏc ủịnh cỏc giai ủoạn phỏt triển tuyến sinh dục cỏ theo phõn loại của Sakun và Butskaia (1968) dựa trên lát cắt mô tế bào. Phương phỏp làm tiờu bản tuyến sinh dục ủược thực hiện dựa trờn phương pháp của Sheckan và Hrapchack (1980) và quy trình làm tiêu bản mô học của Trung tâm Quan trắc và Cảnh báo Môi trường, Bệnh thủy sản- Viện Nghiên cứu Nuôi trồng thủy sản I. + Sử dụng mỏy ủể ủổ Parafin ủó núng chảy vào khuụn ủó cú mẫu, sau ủú ủặt khuụn lờn dàn lạnh cho Parafin ủụng lại tạo ta khối Parafin chứa mẫu.
Cỏc yếu tố mụi trường như nhiệt ủộ, ủộ mặn và ỏnh sỏng luụn ủược duy trỡ ổn ủịnh tương ủương với ủiều kiện mụi trường tại bố nuụi vỗ. Hàng ngày, cỏ bố mẹ ủược cho ăn thức ăn cú chất lượng cao như mực, cỏ nục với khẩu phần là 3% khối lượng thân, cho ăn 1 lần/ngày. Quỏ trỡnh quan sỏt và theo dừi quỏ trỡnh phỏt triển phụi ủược tiến hành ngay từ khi trứng thụ tinh ủược thu ra bể thu trứng.
Quỏ trỡnh theo dừi và quan sỏt ủược tiến hành liờn tục từ khi trứng thụ tinh cho ủến khi trứng nở thành ấu trùng bằng kính hiển vi và kính giải phẫu. Việc quan sỏt sự phỏt triển của ấu trựng cỏ song Chuột trong giai ủoạn từ khi nở ủến khi tiờu thụ hết noón hoàng cũng ủược tiến hành tương tự như quan sát quá trình phát triển của phôi. Số liệu thu thập trong quỏ trỡnh nghiờn cứu thớ nghiệm ủược xử lý theo thống kê sinh học bằng chương trình Microsoft Excel.
- Ở những con cỏi cú tuyến sinh dục ở giai ủoạn III ủó cú thể quan sát thấy tuyến sinh dục có màu hồng nhạt, trên buồng trứng thấy xuất hiện mạch mỏu, ủó qua sỏt thấy những hạt trứng nhỏ. Thu mẫu tuyến sinh dục ở giai ủoạn IV nhận thấy khối lượng buồng trứng ủó phỏt triển cực ủại và ủó ở trạng thái căng phồng. Trờn những tiờu bản thu ủược, chỳng tụi ủó quan sỏt thấy một số cỏc giai ủoạn phỏt triển khỏc nhau của buồng trứng cỏ song chuột.
Cỏc giai ủoạn phỏt triển noón bào ở cỏ song chuột cũng cú 5 giai ủoạn tương ủương với phỏt triển noón bào cỏ song chấm nõu (E.coioides) và song ủỏ (E.akaara) do W.Y.Tseng và S.K.HO (1996) nghiên cứu. Ở giai ủoạn này, tế bào sinh dục là những noón nguyờn bào ủang phỏt triển, buồng trứng ở giai ủoạn này cú hai giai ủoạn khỏc nhau ủú là vựng mầm và vựng cỏc trứng thuộc giai ủoạn lớn ớt ủang xảy ra sự biến ủổi về nhõn. Trờn cơ sở cỏc nghiờn cứu năm 2008, chỳng tụi ủó phần nào xỏc ủịnh mựa vụ sinh sản của cỏ song chuột và quỏ trình phát triển tuyến sinh dục của chúng.
Khi cỏc noón nguyờn bào ở vựng này phõn chia ủến một giai ủoạn nhất ủịnh chỳng sẽ chuyển sang giai ủoạn lớn ớt và trở thành noón bào 1. Giai ủoạn này thường kộo dài do noón bào cú nhiều biến ủổi phức tạp, từ sự xuất hiện của cỏc khụng bào cho ủến sự hỡnh thành cỏc hạt noón hoàng rồi thành khối noón hoàng. Noón bào giai ủoạn này cú sự xuất hiện của hai yếu tố là hỡnh thành rừ các nang bào bao quanh noãn và các không bào có trong tế bào chất có lẽ là ủể chuẩn bị cho giai ủoạn tiếp theo là giai ủoạn ủầy noón hoàng.
Buồng trứng cũng phải trải qua tuần tự cỏc giai ủoạn phỏt triển từ thấp ủến cao và biểu hiện ở cỏc giai ủoạn phỏt triển của noón bào. Sự phỏt triển của cỏc noón bào giai ủoạn 4 cú sự thay ủổi hỡnh thỏi mà nổi bật nhất là sự vỡ ra của các hạch nhân và chúng di cư vào ngoại biên tế bào. Sau thời gian nuụi vỗ chỳng tụi ủó tiến hành chọn lọc ủàn cỏ bố mẹ hậu bị cỏ Song chuột và ủó chọn ủược 14/20 cỏ thể cỏi thành thục và 8/14 cỏ thể ủực thành thục ủể tham gia sinh sản ủợt 1.
Kết quả quan sỏt thu ủược cho thấy, phụi của cỏ Song chuột cơ bản cũng trải qua cỏc giai ủoạn chớnh trong quỏ trỡnh phỏt triển phụi tuần tự từ trứng thụ tinh ủến cỏc giai ủoạn phõn cắt 2, 4, 8, 16, 32,. Thời gian chuyển giữa cỏc giai ủoạn của phụi cỏ song chuột cơ bản tương ủương với thời gian chuyển giai ủoạn ở phụi cỏ Song chấm nõu [7].
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp………53 TÀI LIỆU THAM KHẢO. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp………54 Tài liệu tiếng Anh. Branko Glamuzila, Bosvko Skaramuca, Niksva Glavic, Valter Kozul, Jakov Dulcic and Miro Kraljevic, Egg and early larval development of laboratory reared dusky grouper, Epinephelus marginatus (Lowe, 1834).
Branko Glamuzila, Niska Glavic, Pero Tutman,Valter Kozul and Bosvko Skaramuca (2000), Egg and early larval development of laboratory reared goldblotch grouper, Epinephelus costae (Steindachner, 1878). Paiboon B.(1999) Report of Natural Spawning and Larviculture of tiger Grouper, Epinephelus fuscoguttatus (Forsskal, 1775), at Krabi Coastal Aquaculture Station, Thailand. Natural spawning of three species of grouper in floating cages at a pilot broodstck facility at Komodo, Flores, Indonexia.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp………55 21. Sugama K, Tridjoko, Bejo Slamet, Suko Ismi, Eri Setiadi and Shogo Kawahara (2001), Manual for the Seed Production of Humpack Grouper, Cromileptes altivelis, Gondol Research Institute for Mariculture, p. Seasonal cycle of Ovarian Development and Serum Sex Steroid Levels of Female Grouper Epinephelus coioides.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp………56 CÁC YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG TRONG THỜI GIAN NUÔI.