Thực hành Dược lý: Kỹ thuật tiêm và đánh giá tác dụng thuốc

MỤC LỤC

Kỹ thuật tiêm tĩnh mạch

Cần phải kiểm tra xem đã đưa kim vào đúng tĩnh mạch hay chưa bằng cách kéo pid- tông lại, nếu máu được hút vào bơm tiêm là đúng. Cần phải kiểm tra xem đã đưa kim vào đúng tĩnh mạch hay chưa bằng cách kéo pid- tông lại, nếu máu được hút vào bơm tiêm là đúng.

Kỹ thuật tiêm bắp

Dùng một miếng bông tẩm cồn sát trùng đặt vào vị trí vừa tiêm và giữ chặt trong khoảng 1 phút, không cho máu chảy ra ngoài. Một người bắt, giữ động vật, người thứ hai dùng tay trái giữ chân con vật, tay phải cầm bơm tiêm đặt mũi kim tiêm vào vị trí cần tiêm.

Kỹ thuật tiêm dưới da

Vị trí tiêm bắp thường ở mặt ngoài đùi nơi có bắp cơ dày, không có mạch máu lớn. Dùng một tay nhấc lớp da gáy thỏ kẹp giữa ngón cái và ngón trỏ, tay thuận cầm bơm tiêm đưa mũi kim tiêm vào vị trí da được kẹp giữa hai ngón tay, nhẹ nhàng bơm thuốc vào.

Kỹ thuật tiêm phúc mạc

- Sau 10 phút, kiểm tra lại ngưỡng kích thích đau ở cả hai chân ếch (cả ngưỡng kích thích đau tại chỗ và toàn thân). So sánh ngưỡng kích thích đau trước và sau khi tiêm thuốc, giải thích kết quả về tác dụng của lidocain trên đường dẫn truyền cảm giác. - Kiểm tra chức năng vận động: cởi bỏ dây buộc, đặt ngửa ếch lên bàn mổ, dùng kéo mổ rộng bụng, gạt bỏ phủ tạng sang một bên để lộ cột sống và các bó dây thần kinh vận động đi từ cột sống xuống đùi.

Dùng điện cực lần lượt kích thích vào hai bó dây thần kinh này và quan sát đáp ứng của từng chân. So sánh cường độ đáp ứng của hai chân, giải thích kết quả về tác dụng của lidocain trên dẫn truyền vận động.

THÍ NGHIỆM TÁC DỤNG NHUẬN TẢY CỦA THUỐC VÀ ĐỊNH KHU TÁC DỤNG CỦA STRYCHNIN

  • ĐỊNH KHU TÁC DỤNG CỦA STRYCHNIN 1. Mục đích

    - Dụng cụ: bơm và kim tiêm đầu tù cho chuột uống thuốc, bộ dụng cụ mổ chuột, chậu thủy tinh. - Sau 2-3 giờ, giết chuột bằng cách cắt động mạch cổ, mổ một đường giữa bụng để bộc lộ dạ dày – ruột. - Quan sát trạng thái ruột ở 2 chuột về mức độ căng phồng và cường độ nhu động ruột.

    Cũng có thể cắt toàn bộ ruột của 2 chuột đem cân để xác định khối lượng. Bộc lộ dây thần kinh đùi một bên, luồn chỉ xuống dưới dây thần kinh đùi, buộc chặt đùi ếch lại (chú ý không buộc vào dây thần kinh và không làm tổn thương mạch máu). Kích thích và quan sát đáp ứng bình thường của ếch (kớch thớch bằng cỏch gừ xuống bàn hoặc kớch thớch trực tiếp vào con ếch).

    - So sánh tính chất co giật do strychnin gây ra với co giật dùng niketamid liều cao( đã học ở bài 3). + Dùng kéo luồn qua miệng ếch, cắt bỏ hàm trên của ếch, chờ sau 1 phút kích thích lại và quan sát đáp ứng. Nhận thức các dạng bào chế cụ thể của các thuốc nhóm thuốc tác dụng trên hệ tim mạch.

    THÍ NGHIỆM CÁC THUỐC TÁC DỤNG TRÊN TIM, MẠCH VÀ HUYẾT ÁP

    • TÁC DỤNG CỦA THUỐC TRÊN MẠCH
      • TÁC DỤNG CỦA THUỐC TRÊN HUYẾT ÁP 1. Mục đích

        - Trình bày được kết quả của thí nghiệm, phân tích kết quả, rút ra kết kuận về tác dụng của các thuốc trên tim, mạch và huyết áp: cafein, acetylcholin, atropin, adrenalin. - Trình bày được: tên hoạt chất, tên biệt dược, các đặc điểm dược dộng học, tác dụng, cơ chế tác dụng, tác dụng không mong muốn, cách dùng, những chú ý khi dùng các thuốc thuộc nhóm thuốc tác dụng trên hệ thần kinh thực vật. Luồn một ống canuyn đã có chứa đầy dung dịch ringer qua chỗ cắt, vào động mạch, xuống tâm thất (nếu ống canuyn đã vào đến tâm thất, ta sẽ thấy máu phun vào ống từng đợt).

        + Luồn kim vào động mạch tai thỏ, bơm dung dịch ringer cho sạch máu rồi cố định tai thỏ vào bàn cố định (chú ý bảo vệ sợi thần kinh không bị căng đứt). Hai bình (một bình chứa dung dịch ringer và một bình chứa dung dịch natri 1% pha trong dung dịch ringer) được đặt ở một độ cao nhất định và lần lượt được bơm vào tĩnh mạch tai thỏ. + Đếm và so sánh số giọt chảy qua hệ mạch tai thỏ trước và sau khi có dung dịch natri nitrit, rút ra kết luận về tác dụng của nitrit trên hệ mạch tai thỏ.

        Lưu ý: có thể thay việc đếm số giọt chảy qua hệ mạch tai thỏ bằng việc đo thể tích dịch hứng được trong một đơn vị thời gian (1 phút). - Dụng cụ: bàn và bộ dụng cụ mổ chó, bộ ghi huyết áp chó, máy kích thích điện, kẹp để kẹp động mạch, bơm và kim tiêm. Bộc lộ 2 động mạch cổ, luồn một canuyn thủy tinh vào một động mạch rồi nối với huyết áp kế thủy ngân để đo huyết áp, động mạch còn lại dùng để thử phản ứng giao cảm.

        THÍ NGHIỆM THUỐC TÁC DỤNG TRấN HỆ PHể GIAO CẢM VÀ THUỐC TÁC DỤNG TRÊN QUÁ TRÌNH ĐÔNG MÁU

        TÁC DỤNG CỦA THUỐC TRấN HỆ PHể GIAO CẢM 1. Mục đích

        - Quan sát trạng thái bình thường của 2 thỏ trước khi thử thuốc về độ mở của đồng tử, nhịp tim, sự tiết dịch ở mắt, ở miệng. - Quan sát trạng thái của 2 thỏ sau khi thử thuốc về độ mở của đồng tử, nhịp tim, sự tiết dịch ở mắt, ở miệng.

        Thỏ 2

        • TÁC DỤNG CỦA THUỐC TRÊN ĐỒNG TỬ 1. Mục đích
          • TÁC DỤNG CỦA THUỐC TRÊN QUÁ TRÌNH ĐÔNG MÁU 1. Tác dụng của vitamin K trên thời gian đông máu

            Quan sát sự thay đổi đồng tử ở mỗi mắt, so sánh với độ mở đồng tử của mắt khi thử thuốc lần 1 và so sánh với mắt nhỏ dung dịch NaCl 0,9%. - Dựng đồng hồ bấm giõy theo dừi thời gian từ khi mỏu chảy ra ngoài cho đến khi máu ngừng chảy, ghi lại thời gian máu chảy bình thường. - Sau 2 – 5 phút, dùng lưỡi kéo hoặc dao cạo nhẹ cục máu đã đông ở đuôi chuột cho máu chảy trở lại, nhúng đuôi chuột vào cốc nước ấm 37 C và xác định thời giano chảy sau khi có heparin.

            - Sau khi đã cho vào mỗi ống 1ml huyết tương đã loại calci, lần lượt cho thuốc vào các ống nghiệm như trên, trừ ống số 1 không thêm calciclorid, các ống còn lại đều lần lượt thêm 0,2ml calciclorid vào. Sau khi thêm calciclorid vào mỗi ống, dùng ngón tay bịt kín miệng ống, lật ngược ống 3 lần để trộn đều (sau mỗi lần trộn, ngón tay phải được lau khô để tránh đưa thuốc thử từ ống này sang ống khác). - Xác định thời gian đông máu của mỗi ống nghiệm (thời gian tính từ lúc cho calciclorid vào cho đến khi nghiêng nhẹ ống nghiệm mà không thấy sự thay đổi về mặt huyết tương).

            - So sánh thời gian đông máu giữa các ống nghiệm, giải thích và rút ra kết luận về tác dụng của các thuốc thử trên thời gian đông máu invitro. + Pha chế huyết tương: lấy máu vào cốc hoặc chai thủy tinh miệng rộng, chống đông bằng natri citrat (1ml natri citrat 8% + 19 ml máu), làm lạnh ngay sau đó. + Pha chế các dung dịch thử khác: các dung dịch thử đều cần đẳng trương và trung tính hóa để khắc phục ảnh hưởng của áp lực thẩm thấu và pH đến quá trình đông máu.

            Bảng 8.3. Bố trí thí nghiệm về tác dụng tăng cường hoặc ngăn cản đông máu invitro của một số thuốc tác dụng trên quá trình đông máu.
            Bảng 8.3. Bố trí thí nghiệm về tác dụng tăng cường hoặc ngăn cản đông máu invitro của một số thuốc tác dụng trên quá trình đông máu.

            THÍ NGHIỆM TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE HUYẾT CỦA THUỐC VÀ XÁC ĐỊNH ĐỘC TÍNH CẤP CỦA THUỐC

            Đánh giá tác dụng hạ glucose huyết của thuốc Mục đích

            • Nguyên tắc thí nghiệm

              Giúp người học biết cách thử tác dụng hạ glucose huyết của các thuốc có thể làm hạ glucose huyết để làm cơ sở cho việc NCKH hướng phát triển thuốc điều trị tiểu đường. Muốn gây tăng glucose huyết cho chuột có thể bằng cách dùng các hoá chất như: streptozocin, aloxan, gây tổn thương tế bào β tuyến tuỵ của chuột thí nghiệm, dẫn đến insulin giảm bài tiết, vì vậy glucose huyết sẽ tăng lên. Cho chuột thí nghiệm dùng thuốc thử, so sánh glucose huyết của lô thuốc thử với lô chứng để đánh giá ảnh hưởng của thuốc thử trên glucose huyết.

              - Máy định lượng glucose huyết kèm theo bộ kit định lượng glucose, bơm tiêm 1ml, kim tiêm 25G và kim đầu tù cho chuột uống thuốc, dụng cụ lấy máu xét nghiệm. - Cách xác định nồng độ glucose máu: cắt một đoạn đuôi chuột dài 2-4mm, để chảy máu tự nhiên vào bộ phận nhận máu của máy( kit) đo đường huyết cầm tay. Đọc kết quả hiển thị trên máy đo. - Dùng kiểm định thống kê để so sánh glucose huyết ở các lô và điền vào bảng kết quả sau:. Bảng 9.1 kết quả của thuốc thử đến glucose huyết. chứng dương). Sauk hi thăm dò trên một số lượng hạn chế động vật, tiến hành cho lô đầu tiên uống liều tối đa không gây chết động vật nào và lô cuối cùng uống liều tối thiểu gây chết toàn bộ động vật.

              - Các biểu hiện khác thường của động vật thí nghiệm: hoạt động thần kinh( nhanh nhẹn, chậm chạp, hay nằm, không di động…), lông mượt hay bết., bài tiết( phân lỏng hay khô…), ăn, uống…. + Tính LD50 và khoảng tin cậy 95% của giá trị này bằng mô hình không tuyến tính sigmoid hoặc bằng phương pháp hồi qui probit sử dụng phần mềm GraphPad Prism hoặc SPSS. - Áp dụng bảng phân loại độc để kết luận về độc tính của thuốc Bảng 9.2 phân loại độc tính cấp theo giá trị giới hạn LD 50.