Nghiên cứu di truyền học về khả năng chống cồn của nấm men Saccharomyces spp

Các nồi nấm men

Cac noi nam men đã được sử dụng. Ss Tén noi Nguồn gốc. Nhà máy Thực pham Da nang. Viện Công nghiệp thực pham Hà nội. Nhà may mi Chùa bộc, Hà nội. Nhà may mi Tương Mai, Hà nội. Xí nghiệp Vang Thang long, Hà nội. Đại học Tông hợp Leningrad, Liên xô. Men thương pham của Phap. Men thương pham của Anh. Men thương phâm của Hà lan. Đại học Tổng hợp Kasetsart, Thailand. LV Bánh men Lang Vân. HB Banh men Ha Bae. TV Banh men Nga Tu Vọng. SG | Bánh men Sài gòn SỐ. CỊ | Cơm tượun Cửa Thư. Hóa chất tinh khiết. Môi trường đủ. Dich chiét nam men 20 ml. Môi trường đủ có pepton. La môi trường đủ được bố sun g thêm [0g Pepton. Môi trường lên men. Mai trường tối thiểu. Môi trường tiền bao tử. Dich chiét nam men 20 ml. Môi trường sinh bao tứ,. Môi trường vi thao tác. Môi trường chon lọc 1. La mụi trường toi thiệu được bo sung axit amin, baZỉ nùtợ, vitamin. Môi trường chọn lọc 2. Mãi trường tái sinh. Mãi trường thạch - tỉnh bot. H.1.Các phương pháp Vi sinh vật học. Phân lập dong thuần. Dịch huyền phù của té bào nam men được cấy tách trên môi trường thạch đủ;. Sau đó chon lây khuân lạc điên hình dé cây vào ông. Phân lập nam men :. a) Phân lập từ bánh men rượu, cơm rượu, men thương phẩm. Dịch huyền phù của vật liệu được cây tách lên môi trường thạch đủ; ủ 48 giờ ở 30 C. Chọn lây khuân lạc to, có mau trắng sữa. b) Phân lập từ các loại qua. Những khuân lạc có tê bào hình tròn, ovan điên hình và có khả năng lên. Những nòi có khả năng tạo ra nang bào tử hình thoi, chứa 4 bào tử điển.

Giống tươi 48 giờ tuổi của nòi 220 được huyền phù hóa trong môi trường dich thé đã pha loãng 20 lần. Từ đó, tinh được số tế bào / mi tương ứng với mỗi một giá trị OD. - Xác định khả năng lên men rượu trong dịch rỉ đường bằng phương pháp so.

Những nòi cần xác định khả năng đường hoá tỉnh bột được cấy lên môi. Vòng đường hoá trong suốt ( không cú tỉnh bột ) hiện rừ trờn nờn thach-tinh bột trắng đục. Đóng dấu giống 2 ngày tuổi của các nòi cần thử lên các đĩa riêng rẽ có chứa các nồng độ cồn nói trên.

Dịch huyền phù của các nòi nấm men cần thử được đóng dấu lên môi trường. Dung que cay lấy một lượng lớn giống sinh bao tử, cho vào 0,05 ml dich. Dùng con dau nhung để đóng dấu sang môi trường tối thiêu và môi trường đủ mới.

Các thể phân ly có tinh trạng mong muốn ( ở nghiên cứu này là tính. trạng tế bào dai hoặc tinh trạng đường hoá tỉnh bột ) sinh ra từ ndi lai F1.

KET QUÁ VÀ THẢO LUẬN

Nghĩa là, kha năng hình thành bào tử chính là một chỉ tiêu để nhận biết mức bội the của một nồi nấm men. Kết qua nghiên cứu của chúng tôi ( bảng 4 ) cho thay: Tất cả các nòi đơn bội đều không sinh bào tử. 9 C); Hầu hết các nòi nấm men ma chúng tôi đã phân lập được từ các nguồn. Nói cách khác, độ sống sót cao của bào tử phan ánh rằng té bào sinh ra chúng là những tế bào “khoẻ mạnh”.

( Chúng tôi chỉ dùng những bộ bốn có đủ cả bốn thể phân ly sống sót để. phân tích sự phân ly về tinh trạng chịu cồn ). Từ đó có thê giả thiết rằng tinh trạng chịu cồn ở nòi nam men này do nhiều gen nhân kiểm soát và các gen này có biểu hiện hoạt động theo kiểu cộng tinh,. Gần đây, tinh trạng chịu mặn ở vi sinh vật nói chung và ở nấm men nói riêng đã thu hút sự chú ý của nhiều nhà nghiên cứu trên thế giới.

Người ta thấy sự xuất hiện của các nhân tố bền nhiệt trong tế bào nấm men cũng liên quan chặt chế đến việc thay đổi nồng độ muối trong môi trường. Kết quả nghiên cứu trình bày trên bảng 9 cho thấy khả năng chịu muối của các nòi nấm men đã dùng trong thí nghiệm có tinh chất khác nhau: Nêu như đối với nhóm này ( gồm các ndi FRA, ENG, 9C, 370 ) khi nồng độ NaCl trong môi trường. Nhưng dé có thông tin day đủ về đặc điểm di truyền của tinh trạng này thi còn cân phải tiên hành rât nhiêu nghiên cứu khác nhau nữa.

Để khảo sát sự phân ly về tính chiu muối, chúng tôi đã tiến hành tách bào tử của nòi GH233 , thu lấy nhũng thể phân ly sống sót và cấy lên môi. Đối với các nòi nấm men lưỡng bội, có khả năng sinh bào tử, có khả năng chịu được 8 % muối, chúng tôi cũng tiến hành tách nang, thu lấy những bào tử sống sót và cấy lên môi trường 8 % và 9 % NaCl. Vì thế nó được phân tích để tìm hiểu về sự kiểm soát di truyền đối với các tính trạng chịu nhiệt cao, chịu pH thấp nhằm tạo ra các giống nấm men mới có những đặc điểm phù hợp với yêu cầu cụ thể của san xuất Khi nghiên cứu sự phân ly theo tính chịu nhiệt của các thể phân ly tách ra từ mỗi nang của nòi này , chúng tôi thu được kết quả cho thấy : ở 30°C.

Các tỉ lệ phân ly trên bảng 14 cũng cho thắy có it nhất 2 gen trên hai nhiễm sắc thể khác nhau qui định tinh trạng tích lay sinh khối.

Tao giống nấm men bánh mi có vỏ mỏng

Thêm vào đó, các thê phân ly tách ra từ nòi TH, -30 đã được kiểm tra về khả năng chịu cồn.

30 phút. Trong khi đó, vỏ tế bào của nồi nấm men kiểu dai ban

• So sánh khả năng tích lấy sinh khối. lên men giữa nòi lai và cha mẹ

N ghia là, các thể phân ly đều chứa các tẾ bao có dạng hình tròn hoặc ovan nên không còn những thê phan ly có tẾ bào đài,. Các thể đột biến ?„pm„ớ¡ được thu nhận độc lập có các dạng tế bào giá khuẩn ty khác nhau. May vi thao tác đã được dùng dé phép trực tiếp các bào tử của các nòi khác nhau thành từng cặp.

Kết quả của những phép laf được trình bày ở bảng 15cho thấy hoàn toàn có thé dùng máy vi thao tác dé lai tạo nấm men. Ngoài việc dùng các nòi lai đề tách lấy thể phân ly cần thiết đối với phép lai trở lại tiếp theo, chúng tôi đã nghiên cứu so sánh khả năng tích lũy. Kết quả trên bang 17 cho thấy nòi nấm men lai đã thé hiện wu thế lai.

Rất có thé đó là do vỏ tế bào của nòi lai này đã mong hơn nen tế bào có thé tiết ra môi trường nhiều. Ket qua so gánh khả năng tạo sinh khối giữa noi nắm men lai mang gen 77 với nòi cha mẹ trong điều kiện san xuất. Những thể phân ly chịu cồn cao lại được cho sinh bào tử và tiến hành tách nang dé lua chon lay những thể phân ly có khả năng chiu cồn.

Khả năng chong chịu còn của các dòng tế hào được đánh gia qua kha năng mọc của chúng. Những thê phân ly có năng chịu con tốt nhât và những thê phan ly chịu côn. 10 dong tê bào ở thé hệ thứ bai nay lại được cho sinh bào tử và tách.

Kết quả nghiên cứu được nêu lên ở bảng 23 cho thấy răng chi có những noi nam men lai bat nguon từ các cha me có kha nang chống chiu cồn.