Nghiên cứu chiết suất hoạt chất từ cây gai xanh (boehmeria nivea l gaud) và ứng dụng trong sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe​

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HỒNG NGỌC NGHIÊN CỨU CHIẾT SUẤT HOẠT CHẤT TỪ CÂY GAI XANH (Boehmeria nivea L.Gaud) VÀ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thái Nguyên – 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HỒNG NGỌC NGHIÊN CỨU CHIẾT SUẤT HOẠT CHẤT TỪ CÂY GAI XANH (Boehmeria nivea L.Gaud) VÀ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số ngành: 84 20 201 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Trần Văn Chí Thái Ngun - 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn i LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập hoàn thành luận văn tốt nghiệp, em nhận giúp đỡ nhiều mặt cấp lãnh đạo, tập thể cá nhân Trước tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến TS.Trần Văn Chí ln tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em suốt trình thực hoàn thành luận văn Em xin bày tỏ lời cảm ơn đến ThS Lưu Hồng Sơn cán bộ, bạn sinh viên Khoa Công nghệ sinh học công nghệ thực phẩm trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành đề tài nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn ThS Nguyễn Sinh Huỳnh, chủ nhiệm đề tài “Nghiên cứu công nghệ chế biến số sản phẩm từ gai xanh tỉnh Cao Bằng”, sở Khoa học công nghệ tỉnh Cao Bằng năm 2018, giám đốc công ty cổ phẩn giống chăn ni Cao Bằng giúp đỡ em q trình thực tập nghiên cứu, hỗ trợ kinh phí để thực luận văn Cuối em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên, giúp đỡ em suốt trình học tập thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng 10 năm 2019 Học Viên Nguyễn Thị Hồng Ngọc Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết .1 1.1 Mục tiêu nghiên cứu 1.1.1 Mục tiêu chung 1.1.2 Mục tiêu cụ thể 1.2 Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.2.1 Ý nghĩa khoa học 1.2.2 Ý nghĩa thực tiễn Chương CƠ SỞ KHOA HỌC VÀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Cơ sở khoa học 1.1.1 Tổng quan gai xanh 1.1.2 Các hoạt chất sinh học gai xanh tính chất chúng 1.1.3 Tổng quan gốc tự chất chống oxi hóa .6 1.1.4 Định nghĩa thực phẩm chức 1.1.5 Đặc điểm tác dụng thực phẩm chức 1.2 Tình hình nghiên cứu sản xuất sử dụng gai xanh 1.2.1 Tình hình nghiên cứu sản xuất sử dụng gai xanh Việt Nam 1.2.2 Tình hình nghiên cứu sản xuất sử dụng gai xanh giới Chương 12 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 12 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 12 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn iii 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu 12 2.1.2.1 Phạm vi nội dung 12 2.1.2.2 Phạm vi không gian nghiên cứu: 12 2.1.2.3 Vật liệu, hoá chất thiết bị sử dụng 12 2.2 Nội dung nghiên cứu 13 2.3 Phương pháp nghiên cứu 13 2.3.1 Phân tích, thử nghiệm hoạt tính sinh học số hợp chất gai xanh 13 2.3.1.1 Xác định hàm lượng flavonoid tổng số phương pháp cân 13 2.3.1.2 Phương pháp xác định hoạt động chống oxy hóa tế bào 14 2.3.2 Bố trí thí nghiệm tối ưu hóa q trình chiết suất cao củ gai 15 2.3.3 Phương pháp thử khả kháng khuẩn 19 2.3.4 Nghiên cứu hồn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc cao củ gai .19 2.3.4.1 Nghiên cứu, xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất trà túi lọc từ Gai 19 2.3.4.2 Nghiên cứu, xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất cao từ rễ (củ) Gai: 26 2.3.4.3 Phương pháp phân tích tiêu chất lượng sản phẩm thu 27 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu 28 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 3.1 Kết nghiên cứu số hoạt chất sinh học dịch chiết củ gai 29 3.1.1 Kết phân tích hoạt chất sinh học số phận gai xanh 29 3.1.2 Kết thử hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết gai 30 3.2 Kết tối ưu hóa q trình chiết suất cao củ gai 32 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ dung môi chiết suất 33 3.2.2 Ảnh hưởng thời gian chiết suất 33 3.2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết suất 34 3.2.4 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi 35 3.2.5 Kết tối ưu điều kiện chiết suất dịch củ gai 36 3.2.6 Ảnh hưởng nhiệt độ cô đặc đến chất lượng sản phẩm 39 3.2.7 Kết phân tích hàm lượng flavonoid cao củ gai 39 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn iv 3.3 Kết nghiên cứu khả kháng khuẩn số hoạt chất sinh học gai xanh; 40 3.4 Kết nghiên cứu hồn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc cao củ gai 42 3.4.1 Kết nghiên cứu hồn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc .42 3.4.1.1.Kết xác định thành phần hóa học nguyên liệu 42 3.4.1.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố trình sản xuất 43 3.4.1.3 Quy trình sản xuất 46 3.4.1.4 Xây dựng tiêu chuẩn sở cho sản phẩm trà túi lọc từ gai 47 3.4.2 Kết nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất cao củ gai 48 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 I Tài liệu tiếng Việt: 51 II Tài liệu tiếng Anh: 51 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CT : Công thức IFIC : Hiệp hội thông tin thực phẩm quốc tế DPPH : 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl HPLC : High Performance Liquid Chromatography - Sắc ký lỏng hiệu cao LB : Luria Bertani ROS : Reactive oxygen species - Gốc tự oxy hóa SSR : Simple sequence repeat - Chuỗi lặp lại đơn giản Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn vi DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Bảng mã hóa điều kiện tối ưu 18 Bảng 2.2 Ma trận thực nghiệm Box- Behnken ba yếu tố hàm lượng hoạt chất sinh học cao củ gai 18 Bảng 3.1 Bảng kết phân tích hoạt chất sinh học số phận gai xanh 29 Bảng 3.2 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết thể qua giá trị IC 50 32 Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến hàm lượng flavonoid 33 Bảng 3.4 Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng flavonoid tổng số 34 Bảng 3.5 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hàm lượng flavonoid tổng số 34 Bảng 3.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/ dung môi đến hàm lượng flavonoid tổng số 35 Bảng 3.7: Ma trận thực nghiệm Box-Behken ba yếu tố chiết củ Gai .36 Bảng 3.8: Phân tích phương sai ANOVA mơ hình chiết suất từ củ Gai 37 Bảng 3.9 Kết ảnh hưởng nhiệt độ cô đặc đến chất lượng sản phẩm 39 Bảng 3.10 Kết phân tích hàm lượng flavonoid cao củ gai 40 Bảng 3.11 Đường kính vịng vơ khuẩn cao chiết gai kháng E coli, B subtilis S aureus 41 Bảng 3.12 Bảng kết phân tích số tiêu từ rễ gai xanh 42 Bảng 3.13 Kết đánh giá cảm quan nhiệt độ đến trình sấy 43 Bảng 3.14 Ảnh hưởng thời gian sấy 44 Bảng 3.15 Ảnh hưởng kích thước nguyên liệu 45 Bảng 3.16 Tỷ lệ nguyên liệu phụ bổ sung vào sản phẩm 45 Bảng 3.17 Kết đánh giá chất lượng sản phẩm 47 Bảng 3.18 Kết đánh giá tiêu vi sinh vật 48 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn vii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1.1 Cây gai xanh củ gai xanh .3 Hình 2.1 Phản ứng khử gốc DPPH 14 Hình 3.1 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết gai .31 Hình 3.2 Hoạt tính chống oxy hóa Acid ascorbic 31 Hình 3.3 Bề mặt đáp ứng hàm lượng flavonoid 38 Hình 3.4 Hàm kỳ vọng điều kiện tối ưu hàm lượng flavonoid dịch chiết 38 Hình 3.5 Kết khảo sát hoạt tính kháng khuẩn gai với vi khuẩn A: Escherichia coli, B: Bacillus subtilis, C: Staphylococcus aureus D: Đối chứng dương Ampicillin, đối chứng âm nước cất 40 Hình 3.6 Khả kháng khuẩn cao củ gai Bacillus subtilis Escherichia coli 42 Hình 3.7 Sơ đồ quy trình sản xuất trà túi lọc gai 46 Hình 3.8 Quy trình sản xuất cao củ gai 48 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Tính cấp thiết Cây gai xanh - Boehmeria nivea (L.) Gaud sử dụng từ 5.000 - 3.300 trước công nguyên loại vải xác ướp Ai Cập Nó trồng loại lấy sợi nhiều quốc gia bao gồm Trung Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, Philippines, Ấn Độ Hàn Quốc Phần vỏ thân gai xanh chứa hàm lượng chất xơ cao, thu hoạch chủ yếu sử đụng để sản suất vải sợi Ngoài thành phần chất xơ có hoạt chất với khả chống vi khuẩn, côn trùng công nấm mốc [12] Ở Hàn Quốc có nhiều nghiên cứu việc sử dụng gai xanh thực phẩm, chẳng hạn nhiều loại bánh gạo truyền thống Hàn Quốc [12] Đặc biệt, phần gai xanh giàu yếu tố dinh dưỡng khoáng chất, protein, vitamin, nhiều chất hoạt tính sinh học khác [18] Trong thuốc thảo dược truyền thống Trung Quốc sử dụng rễ gai xanh để điều trị cảm lạnh thông thường, phù nề, sốt, nhiễm trùng đường tiết niệu, viêm thận an thai tốt [12] Những nghiên cứu trước tìm thấy hợp chất quý có gai xanh alkaloids, lignans, flavon, terpenoids glycosides axit behenic, axit ursolic, β- sitosterol, cholesterol, kiwiionoside, rutin, uracil, quercetin, α-amyrin, nonacosanol, emodin, emodin-8-O-β-glucoside, physcion, polydatin, catechin, epicatechin epicatechin gallate [12] Theo dược lý đại, gai có chlorogenic acid, flavonoid rhoifolin, apogenin Trong chlorogenic acid có tác dụng diệt nấm, vi khuẩn chống oxy hóa mạnh gấp 10 lần vitamin E Nó phong tỏa nhóm “tự do”, ngăn chặn oxy hóa lipoprotein LDL, khởi điểm xơ động mạch để dẫn tới cao huyết áp nhồi máu tim Các báo cáo chất chiết xuất từ rễ gai xanh biểu hoạt động bảo vệ gan chống lại tổn thương gan CCl4 gây tác dụng chống oxy hóa FeCl2-ascorbate gây lipid peroxid hóa gan homogenate [12] Trong nghiên cứu Xiaoning Wang cs chiết xuất 49  Thuyết minh quy trình: Thuyết minh quy trình: - Nguyên liệu: củ gai tươi Sơ chế: củ gai rửa nước, cho củ gai vào chậu nước to ngâm khoảng 15 – 20 phút để làm giảm lực liên kết tạp chất bám củ gai sau dùng giáp sắt cọ rửa loại bỏ hết tạp chất bẩn bám củ Để cho nước dùng dao chặt thành miếng nhỏ Củ gai sau chặt thái thành miếng nhỏ cân khoảng 100g củ ngâm với ethanol 70% 90 phút Trích ly: củ gai sau ngâm với ethanol 71,80% theo tỷ lệ 18,04/1 thời gian 92,06 phút nhiệt độ 70ºC, sau đem lọc thu dịch chiết đầu, bã tiếp tục đưa vào thiết bị Soxhlet 15 phút thu dịch chiết Gộp dịch chiết đầu thu hỗn hợp dịch chiết củ gai - Cô đặc: dịch chiết đưa cô đặc nhiệt độ 70ºC đạt hàm lượng flavonoid yêu cầu bổ sung tá dược (rượu ngô, đường màu đường lactose) - Sản phẩm: sản phẩm cao lỏng cho vào bình kín (bình kín trùng 121ºC vòng 15 – 20 phút) tránh ánh sáng 50 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trong dược liệu gai xanh Cao Bằng phần gai củ gai có nhiều hoạt chất sinh học quý, cụ thể Axit clorogenic khô rễ (củ gai) 0,11mg 16,5mg; Flavonoid rhoifolin 3,61mg 35,12mg; Apogenin 7,4mg 54,23mg 100g nguyên liệu - Dịch chiết gai nồng độ 592,644 µg/ml có khả làm giảm 50% gốc tự 0,5 mM DPPH Như dịch chiết gai có tiềm sử dụng làm chất chống oxy hóa tự nhiên Điều kiện chiết suất thích hợp để thu hàm lượng flavonoid xác định sau: nồng độ ethanol 70%, thời gian 90 phút, tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu 15/1, nhiệt độ 80ºC Chúng sử dụng phương pháp bề mặt tiêu theo thiết kế thí nghiệm Box-Behnken với ba biến ba cấp độ cho phương án tốt dự đoán nồng độ ethanol 71,80%, thời gian 92,06 phút, tỷ lệ dung môi/nguyên liệu 18,04/1, hàm lượng flavonoid tổng số đạt 24,7206 mg; xác định nhiệt độ cô đặc cao 70ºC Kết kiểm tra thực nghiệm có độ tương thích cao Kết chúng tơi tìm điều kiện tối ưu để chiết suất flavonoid cho hàm lượng cao Dịch chiết gai có khả kháng số loại vi khuẩn trực khuẩn gram (-): Escherichia coli, trực khuẩn gram (+) Bacillus subtilis, tụ cầu khuẩn gram ( Staphylococcus aureus, với đường kính vịng kháng khuẩn dịch chiết tác động lên loại vi sinh vật khác Khả kháng khuẩn dịch chiết gai chủng Bacillus subtilis cao với kết vòng kháng khuẩn mm thấp chủng Escherichia coli với mm Đối với chủng Xác định thành phần flavonoid cao củ gai 115,6mg/100 ml, khả kháng khuẩn đối tượng VSV: Bacillus subtili Escherichia coli KIẾN NGHỊ Hoàn thiện quy trình sản xuất trà túi lọc gai cao củ gai - Nghiên cứu sâu hoạt tính sinh học có gai củ gai 51 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt: Đỗ Huy Ích ( 1990), Cây thuốc động vật làm thuốc, NXB Khoa học kỹ thuật Đỗ Tất Lợi ( 2004) Cây thuốc vị thuốc Việt Nam NXB Y Học Lưu Hồng Sơn Đtg (2017),” Tối ưu hóa trình chiết suất Flavonoid từ chè dây Cao Bằng”, Tạp chí Khoa học cơng nghệ 171(11): 15 – 19 Nguyễn Thị Chính, Trương Thị Hịa, (2005), Vi sinh vật Y học, Nxb Đại học quốc gia Hà Nội Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, Nxb Y học Nguyễn Thị Huyền ( 2017), ”Khả chống oxy hóa in vitro dịch chiết ca cao ( Theobroma cacao) thử nghiệm hạn chế oxy hóa lipid thịt cá bớp”, Tạp chí khoa học nơng nghiệp Việt Nam, tập 15, số 2: 214 – 224 Quyết định 4664/QĐ – BYT ngày 07/11/2014 Về việc ban hành tranh thuốc sử dụng sở khám bệnh, chữa bệnh y học cổ truyền Thông tư 08/2014/TT- BYT, Ngày 23 tháng 08 năm 2004, Bộ Y tế Tạ Kim Chỉnh; Nguyễn Đức Khảm; Nguyễn Hà Chi; Nguyễn Thúy Hằng, (2008), Nghiên cứu phát triển gai xanh (Boehmeria nivea L.Gaud) đất dốc rừng đầu nguồn sơng Đà, góp phần bảo vệ mơi trường xố đói giảm nghèo cho vùng di dân lòng hồ Sơn La, Báo cáo tổng kết đề tài cấp Bộ 10 Trần Đức Hảo (2016), Khai thác phát triển nguồn gen giống gai xanh (Boehmeria nivea L Gaudich) Phú Yên Thanh Hóa; Viện nghiên cứu phát triển nông nghiệp Nha Hố II Tài liệu tiếng Anh: 11.A Pérez (2013), Boehmeria nivea(L.) Gaud., Pastos y Forrajes, Vol 36, No 4, October-December, 404-408, 2013 12 Dong Gu Lee (2015), “Quantitative Analysis of the Flavonoid Content in the Leaves of Boehmeria nivea and Related Commercial Products”, Natural Product Sciences, 21(1) : 66-70 52 13.G Contị, F Carfì and V Pace (2011), ”Chemical Composition and Nutritive Value of Ramie Plant [Boehmeria nivea (L.) Gaud] and Its By-Products from the Textile Industry as Feed for Ruminants”, Journal of Agricultural Science and Technology A1 (2011) 641-646 14 Heejeong Lee and Nami Joo (2012), ”Optimization of Pan Bread Prepared with Ramie Powder and Preservation of Optimized Pan Bread Treated by Gamma Irradiation during Storage”, Prev Nutr Food Sci, Vol 28, No 15 Lien Ai Pham Huy, Hua He, Chuong Pham Huy (2008) Review article: Free radicals, antioxidants in disease and health International journal of Biomedical science: vol (2), 89-96.13 Parkavi, V., et al (2012), Antibacterial Activity of Aerial Parts of Imperatacylindrica (L.) Beauv International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drug Research 4(3): 209-212 16 Nuengchamnong N, Krittasilp K, Ingkaninan K, (2009) Rapid screening and identification of antioxidants in aqueous extracts of Houttuynia cordata using LC-ESI-MS coupled with DPPH assay Food Chem; 117: 750756 17 Sana Ullah, Lijun Liu, Sumera Anwar, Xu Tuo, Shahbaz Khan, Bo Wang and Dingxiang Peng (2016), Effects of Fertilization on Ramie (Boehmeria nivea L.) Growth, Yield and Fiber Quality, MDPI 8,887 18 Singleton VL, Orthofer R, Lamuela-Raventos RM (1999), Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of FolinCiocalteu reagent In: Packer L, editor Oxidants and Antioxidants, pp 152–178 19 Spigno G Tramelli, L De Faveri, D.M (2007) ”Effccts of extraction time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics”, Journal of Food Engineering, 81, pp 200208 20 Tian Xiao Ying, Min Xu, Bin Deng, Kelvin Sze-Yin Leung, King Fai Cheng et al (2011), ”The effects of Boehmeria nivea (L.) Gaud on embryonic development: In vivo and in vitro studies”, Journal of Ethnopharmacology 21 Touming Liu (2013), Development and Characterization of 1,827 Expressed Sequence Tag-Derived Simple Sequence Repeat Markers for Ramie 53 (Boehmeria nivea L Gaud), PLoS One 22 Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G., Kaur, H, (2011) Phytochemical screening and Extraction: A Review Internationale Pharmaceutica Sciencia 1(1): 98-106 23 Xiaoning Wang (2015), “Protective Effects of Ramie (Boehmeria nivea) against Oxidative Stress in C6 Glial Cells”, Korean J Plant Res 28(6):675-681(2015) 24 Youn Ri Lee et al (2009), “Chemical Composition and Antioxidant Activity of Ramie Leaf (Boehmeria nivea L.)”, Food Science and Biotechnology, Volume 18 Number (2009.10) Website: 25 http://www.buykorea.org/product-details/ramie-tea 3016831.html 26 http://www.buykorea.org/product-details/Brown-Rice- Ramie-Tea 3016832.html 27 https://www.alibaba.com/showroom/ramie-powder.html 54 PHỤ LỤC 1: Bảng cho điểm đánh giá cảm quan Chỉ tiêu Màu sắc Mùi Vị Trang thái (TCVN 3218-1993, Bộ Khoa học - Công nghệ Môi trường, số 212/QĐ ngày 12/5/1993) 55 PHỤ LỤC 2: Kết xử lý số liệu tối ưu hóa quy trình chiết suất Flavonoid từ củ gai 1.1 Nồng độ Ethanol Test of Homogeneity of Variances Flavonoid Levene Statistic ANOVA Flavonoid Between Groups Within Groups Total Multiple Comparisons Dependent Variable: Flavonoid LSD Dunnett t (2b sided) * The mean difference is significant at the 0.05 level b Dunnett t-tests treat one group as a control, and compare all other groups against it Flavonoid Duncan a Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.000 56 1.2 Thời gian Test of Homogeneity of Variances Flavonoid Levene Statistic ANOVA Flavonoid Between Groups Within Groups Total Multiple Comparisons Dependent Variable: Flavonoid LSD Dunnett t (2b sided) * The mean difference is significant at the 0.05 level b Dunnett t-tests treat one group as a control, and compare all other groups against it Flavonoid Duncan a Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.000 1.3 Nhiệt độ Test of Homogeneity of Variances Flavonoid Levene Statistic ANOVA Flavonoid Between Groups Within Groups Total Multiple Comparisons Dependent Variable: Flavonoid LSD Dunnett t (2a sided) a Dunnett t-tests treat one group as a control, and compare all other groups against it Flavonoid Duncan a Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.000 58 1.4 Dung môi/nguyên liệu Test of Homogeneity of Variances Flavonoid Levene Statistic ANOVA Flavonoid Between Groups Within Groups Total Multiple Comparisons Dependent Variable: Flavonoid LSD Dunnett t (2-10.00 b sided) * The mean difference is significant at the 0.05 level b Dunnett t-tests treat one group as a control, and compare all other groups against it Flavonoid 10.00 Duncana 15.00 20.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 2.000 ... ? ?Nghiên cứu chiết suất hoạt chất từ gai xanh (Boehmeria nivea L Gaud) ứng dụng sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe” Mục tiêu nghiên cứu 2.1 Mục tiêu chung Nghiên cứu chiết suất hoạt chất từ gai. .. NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG L? ?M NGUYỄN THỊ HỒNG NGỌC NGHIÊN CỨU CHIẾT SUẤT HOẠT CHẤT TỪ CÂY GAI XANH (Boehmeria nivea L. Gaud) VÀ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE Chuyên ngành: Công... phẩm chức từ cao củ gai 2.1.2.2 Phạm vi không gian nghiên cứu: Nghiên cứu chiết suất hoạt chất sinh học từ gai xanh Boehmeria nivea (L. ) Gaud ứng dụng sản xuất số thực phẩm bảo vệ sức khỏe quy