(Luận văn thạc sĩ) lựa chọn thức ăn để nhân nuôi sâu khoang spodoptera litura fabricius phục vụ sản xuất chế phẩm NPV

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỰA CHỌN THỨC ĂN ĐỂ NHÂN NUÔI SÂU KHOANG SỐ LƯỢNG LỚN PHỤC VỤ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC Ngành: Công Nghệ Sinh Học Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học Giảng viên hướng dẫn :TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực :Thạch Lai Huône MSSV :1411100043 Lớp :14DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỰA CHỌN THỨC ĂN ĐỂ NHÂN NUÔI SÂU KHOANG SỐ LƯỢNG LỚN PHỤC VỤ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC Ngành: Công Nghệ Sinh Học Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học Giảng viên hướng dẫn :TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực :Thạch Lai Huône MSSV :1411100043 Lớp :14DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình ngun cứu thân tơi thực hiện, hướng dẫn TS Nguyễn Thị Hai, môn Công Nghệ Sinh Học, trường Đại học Công nghệ Tp Hồ Chí Minh Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác TPHCM, Ngày tháng Sinh viên thực đồ án năm ii LỜI CẢM ƠN Trước hết, em trân trọng bày tỏ lịng biết ơn đến Cơ TS Nguyễn Thị Hai tận tình hướng dẫn, bảo suốt thời gian học, tạo điều kiện thuận lợi tinh thần vật chất trình nguyên cứu, chỉnh sửa chu đáo nội dung hình thức luận văn Đặt biệt, Cô tận tâm động viên, lo lắng lúc em gặp khó khăn trình hồn thành đồ án Nhân đây, em xin chân thành cảm ơn Quý Thầy Cô Khoa Công Nghệ Sinh Học cung cấp kiến thức quý báu suốt thời gian học tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành bảo vệ đồ án Cuối cùng, xin chân thành biết ơn Ba, Mẹ, Em khuyến khích, động viên chăm lo cơng việc gia đình để hồn thành đồ án TPHCM, Ngày tháng năm Sinh viên thực đồ án iii TĨM TẮT Việc nhân ni sâu khoang thức ăn nhân tạo từ sâu tuổi đến trưởng thành thực điều kiện nhiệt độ 270 ± 10 C, ẩm độ 65 ± 5% Kết xác định thành phần thức ăn gồm đậu trắng (200g), đậu nành(10g), tinh bột (30g), men bánh mì (30g), Vitamin E (10ml), Vitamin tổng hợp(10ml), Methyl paraben (2.5g), Ascorbic acid (1.5g), agar (10g), formalin 40% (1ml), nước cất (1000ml) thích hợp để sản xuất sâu khoang (Spodoptera litura) với tiêu trọng lượng sâu 10 ngày tuổi đạt 0.53 g; thời gian phát dục sâu non 15,25 ngày; tỷ lệ sâu vào nhộng đạt 91,33%; tỷ lệ nhộng vũ hóa 92,96%; khả đẻ trứng 6.33 ổ trứng/con cái; giá thành cho mẻ thức ăn công thức 26.578đ, ni 200 sâu Từ khóa: Sâu khoang Spodoptera litura, thức ăn nhân tạo sâu non iv ABSTRACT SELECTION OF ARTIFICIAL DIET FOR MASS REARING OF THE TOBACCO CATERPILLAR, SPODOPTERA LITURA The aim of research is evaluate a artificial diet for mass rearing of Spodoptera littoralis The result showed that ingredients consisted of cowpea (200g), soybean (10 g), Starch (30g), yeast (30g), vitamin E (10ml), synthetic vitamin(10ml), Ascorbic acid (1.5g), Methyl paraben (2.5g), agar (10g), formalin 40% (1ml), Distilled water (1000ml) was the best for mass rearing of Spodoptera littoralis This artificial diet successfully supported the growth and development with larval weight (10 days old) was 0.53g, larval period were 15.25 days respectively , the Percentage to Pupation and Adult emergence were 91.33 and 92.96% respectively The Fecundity was 6.33 egg mass per femalen The cost of batch of diet was VND 26.578, on which 200 neonate larvae can be reared Key words: tobacco bollworm Spodoptera litura, artifical diet, caterpillar iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii ABSTRACT iv MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiển đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ LĨNH VỰC NGHIÊN CỨU .3 1.1 GIỚI THIỆU VỀ SÂU KHOANG .3 1.1.1 Đặc điểm gây hại .3 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Đặc tính sinh học .7 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU THỨC ĂN NHÂN TẠO NHÂN NI SÂU Ở NƯỚC NGỒI .9 1.2.1 Nghiên cứu thức ăn nhân tạo nhân ni sâu nước ngồi .9 1.2.2Nghiên cứu ảnh hưởng thức ăn thêm đến phát triển trưởng thành 18 1.3 Tình hình nghiên cứu thức an nhân tạo nhân ni sâu khoang Ở Việt Nam 19 1.4 Kỹ thuật nuôi nhân sâu hàng loạt 21 1.4.1 Các biện pháp vệ sinh phòng bệnh nuôi nhân sâu 22 1.4.2 Biện pháp chống thối hóa quần thể sâu ni 22 1.4.3 Kỹ thuật nhân nuôi sâu khoang .23 iv 1.5 Giới thiệu virus NPV gây bệnh côn trùng 24 1.5.1 Đặc điểm hình thái: 24 1.5.2 Cấu trúc NPV 24 1.5.3 Quy trình sản xuất NPV 26 CHƯƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .28 2.1 Vật Liệu Và Đối Tượng Nguyên Cứu .28 2.1.1 Nguồn sâu làm thí nghiệm .28 2.1.2 Dụng cụ hóa chất thí nghiệm 28 2.2 Nội Dung Nguyên Cứu 29 2.3 Phương Pháp Nghiên Cứu .29 2.3.1 Xác định công thức thành phần thức ăn nhân tạo để nhân nuôi ấu trùng sâu khoang (Spodoptera litura) .29 2.3.2 Xác định thức ăn thêm để nuôi trưởng thành sâu khoang (Spodoptera litura) 33 2.3.3 Xác định khả sử dụng thức ăn nhân tạo để sản xuất chế phẩm sinh học NPV 34 CHƯƠNG 37 KẾT QUẢ NGUYÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Xác định thức ăn tổng hợp để nhân nuôi sâu khoang số lượng lớn .37 3.1.1 Trọng lượng sâu tuổi 37 3.1.2 Trọng lượng nhộng 39 3.1.3.Thời gian phát dục sâu non .39 3.1.4 Tỷ lệ sâu sống sót, sâu vào nhộng nhộng vũ hóa sâu khoang 40 3.1.5.Thời gian sống trưởng thành .43 3.1.6 Khả sinh sản trưởng thành 43 3.2 Xác định nồng độ loại thức ăn thêm phù hợp để nuôi trưởng thành 45 3.2.1 Thời gian sống trưởng thành cho ăn thêm 45 3.2.2 Khả sinh sản trưởng thành cho ăn thêm 46 v 3.3 Xác định khả sử dụng thức ăn nhân tạo để sản xuất chế phẩm sinh học NPV .47 3.3.1 Số sâu chết .47 3.3.2 Hiệu lực gây chết .48 3.3.3 Trọng lượng sâu .48 3.3.4 Lượng virus/ sâu 49 3.4 Giá thành nuôi sâu công thức 51 CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 4.1 Kết luận 54 4.2 Kiến nghị 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 vi DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Tp HCM: Thành phố Hồ Chí Minh NPV: Virus đa diện nhân (Nuclear Polyhedrosis Virus) CT1: Công thức CT2: Công thức CT3: Công thức CT4: Công thức CT5: Công thức CT6: Công thức CT7: Cơng thức Hình 9: Nhộng bị khơ khơng vũ hóa Hình 10: Sâu khơng hóa nhộng Hình 11: Trứng Hình 12: Sâu tuổi cơng thức Hình 13: Nhộng kính hiển vi Hình 14: Nhộng đực kính hiển vi A B Hình Sâu chết virus (A và B = sâu chết virus) PHỤ LỤC B Bảng phân tích số liệu thô băng phần mềm SAS Trọng lượng sâu tuổi t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 89.57473 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 24.491 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 85.010 ct2 A 81.507 ct5 A 76.517 ct4 A 70.577 ct1 A 69.903 ctla Phần trăm nhộng vũ hóa t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 75.16334 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 22.435 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 77.367 ct2 A 72.287 ct4 B 45.060 ctla B 44.443 ct1 B 36.290 ct5 Phần trăm sâu vào nhộng t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 13.83322 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 9.6244 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 73.093 ct2 A 71.953 ctla A 70.390 ct4 B 41.133 ct5 B 39.210 ct1 Số ổ trứng t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 1.133333 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 2.7548 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.3333 ct2 B A 5.3333 ctla B A C 4.3333 ct4 C 3.3333 ct1 C 2.3333 ct5 B Số trứng/ trưởng thành t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 109035.3 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 854.47 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 1917.7 ct2 A 1786.7 ctla B A 1071.0 ct4 B C 403.0 ct1 C 34.0 ct5 Thời gian phát dục sâu non t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.16234 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 1.0426 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 20.3933 ct1 A 19.9333 ct5 B 16.4733 ct4 C 15.2500 ct2 C 15.1000 ctla Trọng lượng nhộng t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000533 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 0.0598 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 0.33000 ct1 A 0.33000 ct2 A 0.30667 ct4 B 0.26667 ct5 B 0.26000 ctla B Trọng lượng sâu t Tests (LSD) for N Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.000873 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 0.0765 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 0.53000 ct2 A 0.52000 ctla B 0.40000 ct4 C 0.17333 ct1 C 0.11333 ct5 Trưởng thành sống t Tests (LSD) for N Alpha 0,01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 1,07044 Critical Value of t 3,16927 Least Significant Difference 2,6773 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 4,5133 ct4 A 4,5100 ct2 A 4,1333 ct1 A 3,5967 ctla A 2,3200 ct5 10 Trưởng thành sống cho ăn thức ăn thêm t Tests (LSD) for N Alpha 0,01 Error Degrees of Freedom 42 Error Mean Square 9,578231 Critical Value of t 2,69807 Least Significant Difference 4,4634 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6,857 D20% 5,429 MO10% 5,286 D5% 5,143 MO5% 4,429 MO20% 4,143 NC 3,143 D10% A A A A A A A A A A A A 11 Số ổ trứng/ trưởng thành cho ăn thức ăn thêm t Tests (LSD) for N Alpha 0,01 Error Degrees of Freedom 42 Error Mean Square 22,21769 Critical Value of t 2,69807 Least Significant Difference 6,7978 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 8,429 D20% A 8,286 D5% A 6,429 MO5% A 5,429 D10% A 5,286 NC A 5,286 MO10% A 3,571 MO20% 12 Số trứng / trưởng thành cho ăn thức ăn thêm t Tests (LSD) for N Alpha 0,01 Error Degrees of Freedom 42 Error Mean Square 553526,8 Critical Value of t 2,69807 Least Significant Difference 1073 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 1320,3 D20% 1210,7 MO10% 1022,0 D5% 984,1 MO5% 911,6 D10% A 696,1 MO20% A 450,4 NC A A A A A A A A A ... lượng sâu khỏe, đồng để phục vụ sản xuất chế phẩm sinh học cần thiết Chính vậy, học viên tiến hành nghiên cứu đề tài ? ?Lựa chọn thức ăn để nhân nuôi sâu khoang Spodoptera litura Fabricius phục vụ. .. sử dụng thức ăn nhân tạo để sản xuất chế phẩm sinh học NPV 2.3 Phương Pháp Nghiên Cứu 2.3.1 Xác định công thức thành phần thức ăn nhân tạo để nhân nuôi ấu trùng sâu khoang (Spodoptera litura) ... phù hợp để nhân nuôi lây nhiễm sâu khoang cũng nồng độ thức ăn thêm để nuôi trưởng thành sâu khoang Spodoptera litura, phục vụ cho sản xuất NPV (Nucleopolyhedrosis virus) trừ sâu khoang hại