HO SPIROCHAETACEAE

Ph¶n øng ng ng kÕt d ¬ng tÝnh trªn kÝnh hiÓn vi tô quang nÒn ®en. trªn kÝnh hiÓn vi tô quang nÒn ®en.[r]

Hä Spirochaetaceae

•Là vi khuẩn hình xoắn, dài, mềm mại, dễ uốn khỳc, di ng

mạnh

Phần lớn xoắn khuẩn không nuôi cấy đ ợc môi tr êng

th«ng th êng, m«i tr êng nuôi xoắn khuẩn phải có 5-10% huyết thỏ t

Xoắn khuẩn sống rải rác thiên nhiên, đa số không gây

bnh, mt s lồi có khả gây bệnh cho ng ời ng vt

Những xoắn khuẩn gây bệnh có gièng:

•Borrelia

Gièng Borrelia:

Gồm xoắn khuẩn đ ờng kính từ 0,3-0,5 m, Vidô :

+ B.gallinarum , gây bệnh tăng bạch cầu cho gà + B.recurrentis g©y bƯnh sèt håi quy ë ng êi

Gièng Treponema:

Đ ờng kính xoắn khuẩn 0,1-0,3 m , kí sinh ng ời động vật Ví dụ:

+ Treponema pallidum g©y Giang mai ë ng êi

Gièng Leptospira :

Giang mai giai đoạn :

Giang mai giai ®o¹n :

vÕt chít ë bé phËn sinh dôc

Giang

Gièng leptospira

Giống leptospira

ãI Khái niệm bệnh

ãBệnh Leptospira gây bệnh truyền nhiƠm chung

cho nhiỊu loµi sóc vËt cã lây sang ng ời

ã Bệnh có biểu hiƯn chÝnh :

• Sốt cao, vàng da, đái máu huyết sắc tố, viêm gan,

thận, rối loạn tiêu hoá, sảy thai

ãLeptosira có nhiều typ gây bệnh, bƯnh chóng g©y gäi

•Bệnh có khắp nơi giới, nhiều lồi động vật, hoang

thó vµ ng êi

ãBệnh gây nhiều thiệt hại làm giảm sản l ợng chất l ợng

thịt, sữa

ãSố l ợng gia súc chết bệnh nhiều tốn

phòng chống bệnh

ãở Việt Nam, bệnh có từ lâu xảy tất vùng miền ãTrên nhiều loại gia súc nh lợn, chó, bò, gây nhiều thiệt hại vỊ

•Gièng Leptospira bao gåm rÊt nhiỊu typ hut (serotyp)

Vµ chia làm hai loại:

ã - L.biflexa:

ãlà loài không gây bệnh, chiếm đa số, sống hoại sinh tự

nhiên

ã - L.interrogans:

•là lồi gây bệnh th ờng ký sinh ng ời động vật, đ ợc chia làm

nhiỊu serotyp

•Hiện nay, ng ời ta tìm thấy 212 serotyp Leptospira khác •Chúng giống hình thái, số đặc tính sinh học nh ng

ãTrên giới, có 12 serotyp Leptospira phỉ biÕn g©y bƯnh

cho động vật bao gồm:

•1- L.australis - L.icterohemorhagiae •2- L.autumnalis - L.mitis

•3- L.bataviae - L.poi

•4- L.canicola 10 - L.pomona

•5- L.grippotyphosa 11 - L saxkoebing •6- L.hebdomadis 12 - L.sejroe

•

•ở Việt Nam xác định có serotyp gây bệnh th ờng gặp

bao gåm

- L.bataviae - L.icterohemorrhagiae -L.canicola - L.mitis

-L.grippotyphosa - L.pomona

•Để phịng bệnh cho gia súc, n ớc ta sử dụng chủng

ch vacxin

ãTheo thống kê Cục Thú y, tháng đầu năm 2007 n ớc ta

Đặc tính sinh học

Đặc tính sinh học Hình thái:

ãCó khoảng 212 serotyp Leptospira cã cÊu tróc KN kh¸c nh ng giống hình thái

ãLà loại xoắn khuẩn nhỏ, mỏng. ãĐ ờng kính 0,1-0,2 x 4-20m.

•Có nhiều vịng xoắn sát (15-20 vịng), đầu uốn cong tựa móc câu, có khả di động mạnh co rút xoay vần

ãNhuộm ph ơng pháp thấm bạc Morosop

(Xoắn khuẩn bắt màu nâu đen vàng) •Nhuộm Giemsa xoắn khuẩn bắt màu đỏ tím

Nuôi cấy:

ãXon khun th ờng mọc mơi tr ờng hiếu khí. •pH= 7,2- 7,6, nhiệt độ 280C, phải giàu Oxy

• Th ờng cấy môi tr ờng có 5-10% huyết thá t ¬i:

Terskich, Korthoff, EMJH

ãTrong môi tr ờng nuôi cấy lần đầu xoắn khuẩn mọc chậm

nhanh phải 15-20 ngày (giữ tối thiểu 28 ngày)

ãTrong cấy chuyển giống: sau cấy 2-3 ngày xoắn khuẩn

mc, tuần mơi tr ờng đục nhẹ, lắc có vẩn khúi

ãCó thể cấy xoắn khuẩn vào màng niệu phôi gà 10 ngày tuổi,

ã Cấu trúc kháng nguyên :

ã Leptospira có loại kháng nguyên: ã + Một KN chÝnh

• + Mét KN phơ

• KN chủng xoắn khuẩn có tỏc dng quyt nh

với thân nh ng KN phụ chủng xoắn khuẩn khác

ã Nên th ờng gây phản ứng huyết chéo chủng

xo¾n khuÈn

Leptospira canicola

Leptospira icterohaemorrhagiae Leptospira icterohaemorrhagiae

Leptospira( KHV ®iƯn tư )

Leptospira

• Sc khỏng

ãLeptospira nhạy cảm với sức nóng: đun 560C chịu đ ợc 10

phút; 600C phút, đun sôi chết

ãXon khun chịu đ ợc nhiệt độ lạnh: - 300C không chết

•Trong gan chuột 40C để 26 ngày giữ đ ợc tính gây bệnh •Nhạy cảm với độ axit nên dày ,chỉ sau 10 phút b

tiêu diệt,pH <6 xoắn khuẩn không sống đ ợc

ãCác chất sát trùng thông th ờng diƯt xo¾n khn nhanh

chãng

Khả gây bệnh

Khả gây bệnh ã Trong tự nhiên

ãRt nhiu loi gia sỳc, hoang thú, chuột, thỏ ng ời

mắc bệnh

ã gia sỳc bũ, mn cm sau đến ngựa, cừu, dê, lợn,

mÌo

ãTrong loài dà thú báo dễ mắc bệnh ãLoài gặm nhấm th ờng mang trùng.

ã ng ời, bệnh có tính chất nghề nghiệp rõ, liên quan đến dầm

• ChÊt chứa mầm bệnh:

ãĐộng vật phát bệnh máu có mầm bệnh

ãTrên 15 ngày mầm bệnh thận, gan thai của

ãGia súc khỏi bệnh th ờng mang thải mầm bệnh thời gian dài, có từ - năm.

ãTrong tự nhiên có loại ổ chứa Leptospira: ã+ ổ chứa th ờng xuyên:

ãChủ yếu loài gặm nhấm

ãTt c cỏc loi chuột, chuột lớn mang thải xoắn

khn qua n íc tiĨu

•Ng ời ta xác định: Chỉ cần từ - chuột hoạt động

đã đủ lm bnh l u hnh

ã+ ổ chứa thiên nhiên:

ã Là loài hoang thú nh cầy, cáo, ã+ ổ chứa không th ờng xuyên:

ỉ

• Ph ơng thức truyền lây

ãGia sỳc mc bnh ăn, uống sản phẩm đụng chạm

với mầm bệnh chuột thải

ãở nguồn n ớc bị nhiễm n ớc tiểu chuột nÕu gia sóc uèng hay

bơi qua b bnh

ãCác loài côn trùng hút máu truyền bệnh.

ãNg ời lây nhiễm ăn thÞt, mỉ thÞt gia sóc bƯnh, tiÕp xóc víi

những nơi ô nhiễm xoắn khuẩn nh ao tù n c ng

ã Sự lây trực tiếp ng ời ng ời hầu nh không xảy ra.

ãXoắn khuẩn xâm nhập vào thể qua đ ờng tiêu hoá

hoặc qua da niêm mạc lành Đây điều quan trọng cần l u ý việc phòng bệnh

ãở n ớc ta gia súc th ờng mắc bệnh quanh năm nh ng nhiều

ã ở lợn

ãBệnh có thể: cấp tính mạn tính.

ã Nhiều ng ời gọi bệnh lợn nghệ da, niêm mạc mỡ bị vàng

nh nghệ

ã Thể cấp tính:

ãLợn sốt cao 410C - 420C / - ngày

ãLợn mệt mỏi, nhịp thở tăng, xiêu vẹo, thích nằm, co giật

run cơn, sùi bọt mép

ã Da niêm mạc vàng

ãN c tiu sau vng thm v ớt dn.

ãở lợn - tháng tuổi sốt cao có triệu chứng thần kinh nh

ã Thể mạn tính lợn:

ãBệnh phát sinh âm ỉ, lợn ăn , uống n ớc nhiều, táo, n ớc tiểu lúc đầu hồng sau chuyển sang vàng, n ớc tiểu dần.

ãLn st 400C - 410C, vật run rẩy co giật nhẹ từng cơn, sau triệu chứng giảm , ln gy rc,

vàng da, niêm mạc, mặt họng bị phù thũng, liệt chân sau, cuối kỳ lợn bị chết kiệt sức sau - tháng.

ã ở chã

• Chã th êng nhiƠm • - L.canicola

• - L.icterohaemorrhagiae. • Chã sèt cao 400C - 410C

• Cã thĨ chảy máu mũi ã Khát n ớc, phù mặt

• N ớc tiểu đặc, có albumin niu

ã Chó táo, nôn mửa, có triệu chứng thần kinh.

ã Cuối thân nhiệt giảm xuống 360 - 36,50C chết

• ë ngùa

• ë ng ời

ãBệnh ng ời gồm giai đoạn ã- Giai đoạn 1:

ãThể nhiễm trùng hut, sèt cao 390C - 400C, mƯt mái, ch¸n

ăn, li bì, mê sảng

ãCó dấu hiệu đau nhức: th ờng vùng trán, đau déi

nhÊt lµ chi d íi, cã không đ ợc

ãKết mạc mắt s ng, phù nề Da niêm mạc vàng giống màu lựu

chín

ã- Giai đoạn 2:

ãTh ờng có hội chứng màng nÃo, triệu chứng th êng phøc t¹p

Bò bị Leptospirosis

Bò bị leptospirosis

Bò bị leptospirosis (

*

* Lỵn chÕt LeptospirosisLỵn chÕt Leptospirosis

da nhạt màu, có màu vàng

BƯnh Leptospirosis

BƯnh Leptospirosis

x¶y thai, thai chÕt cã nhiỊu ®iĨm xt hut

bƯnh Leptospirois

bƯnh Leptospirois

thai chÕt mỉ thấy mỡ vàng, gan có nhiều ổ hoại tư

bƯnh Leptospirois

bƯnh Leptospirois

Thận có màu vàng, có nhiều điểm xuất huyết lấm lấm bề mặt

thai chết thấy mỡ vàng, gan có nhiều ổ hoại tö

Hiện t ợng xuất huiyết thành đám phổi

Leptospirosis ë ng êi

Leptospirosis ë ng êi

Leptospirosis

ã Trong phòng thí nghiệm:

ãTh ng dựng chut lang gõy bnh

ãTiêm VK vào phúc mạc hay d ới da chuột lang ãSau 2-3 ngày chuột sốt 40,50c-41,50c

ãCon vật gầy ,niêm mạc mắt da có màu vàng ãSau 6-12 ngày thân nhiệt hạ , chuột chết.

ãMổ khám :

ã - Vàng da , niêm mạc , phủ tạng,gan s ng to

ã - Tìm m¸u ,gan , thËn, n íc xoang bơng sÏ thÊy

nhiỊu xo¾n khn

ãIII.Chẩn đoán

ã1 Chẩn đoán vi khuẩn học ã Lấy bệnh phẩm

ãTuỳ theo thời gian thể bƯnh cã thĨ lÊy c¸c bƯnh phÈm

kh¸c

ã - Sốt tuần lễ đầu lấy máu ã - Sốt 10 ngày lấy n ớc tiểu

ã Tìm xoắn khuẩn qua kính hiển vi

ã+ Xem t ơi:

ã - Ly mỏu trn vi xitrat natri 5% chắt huyết t ơng • - Hoặc lấy n ớc tiểu để lắng lấy cặn

• KiĨm tra d íi kÝnh hiĨn vi tơ quang đen:

ãNu cú xon khun, xon khun chuyn ng nhanh, lp

lánh nh trời

ã + Xem tiêu nhuộm:

ãTừ bệnh phẩm Làm tiêu nhuộm ph ơng pháp thấm

ã Nuôi cấy phân lập

ã Dùng bệnh phẩm cấy vào môi tr ờng Terskich EMJH ã Nuôi cấy môi tr ờng: EMJH

ã (Ellingghausen - Mc Cullough - Johnson - Harris)

- Bệnh phẩm thận: cắt nhỏ, nghiền nát, pha thành nồng độ 1/10, lấy n ớc pha sang ống 2-3 (theo số 10 )

- BƯnh phÈm lµ máu: Dùng ống môi tr ờng: + ống1: giät m¸u

+ èng 2: giät

+ èng :4 giät

+ èng 4: 10 giọt

Nuôi 280C tháng, tuần kiểm tra lần

Nếu có xoắn khuẩn lắc ống môi tr ờng có vẩn khói

•Tiêm động vật thí nghiệm

•Tốt dùng chuột lang non để gây bệnh. •Tiêm bệnh phẩm vào phúc mạc cho chuột

•Nếu có xoắn khuẩn : • - Chuột sốt 40 độ

ã - Vàng da, vàng niêm mạc mắt

ãLấy máu tim n ớc phúc mạc kiĨm tra sÏ thÊy xo¾n

khn

ã2 Chẩn đoán huyết học

ã Là ph ơng pháp để chẩn đoán bệnh dễ làm, nhanh xác

định đ c chớnh xỏc serotyp gõy bnh

ã * Phản ứng vi ng ng kết tan với kháng nguyên sống phiến kính

ã (MAT - Microscopic agglutination test)

ãNguyên lý:

ã Khi vật mắc bệnh, sau - 10 ngày máu xuất kháng

thể Leptospira

ã Khi trén hut cđa gia sóc nghi bƯnh víi hỗn dịch canh khuẩn

Leptospira sống (gồm 12 serotyp khác nhau)

ã Nếu huyết có kháng thể chủng xoắn khuẩn gây bệnh

sẽ có t ợng ng ng kết: xoắn khuẩn chụm lại nh hình hay hình mạng nhện

ã Nếu hàm l ợng kháng thể huyết lớn xoắn khuẩn sau

ãChuẩn bị:

ã - Kháng thể nghi:

ãLấy máu gia súc nghi mắc bệnhchắt huyết 

pha víi n íc sinh lý 1/200

ã - Kháng nguyên chuẩn:

ã + Gồm 12 chủng Leptospira, XK khoẻ, hình thái rõ,

cã 150 -300 XK/ trªn vi tr êng

• + Mỗi chủng ni cấy riêng mơi tr ờng Terskich • + XK đ ợc giữ nhiệt độ 20 độ C.

ãTiến hành:

ãMôi mâu dùng phiến kính

ãMỗi phiến chia làm ô, đ ợc 12 ô dùng cho 12 chủng Leptospira. ãNhỏ lên « giät hut cđa gia sóc nghi bƯnh pha ë

nồng độ 1/200,

•Råi nhá vào ô chủng Leptospira

ãTrn u để 15 - 20 phút nhiệt độ phịng thí nghiệm •Đọc kết kính hiển vi có tụ quang đen.

•Để đánh giá kết •Ng ời ta quy định :

• - L+ : cã ng ng kÕt tan.

• - L++++ : ng ng kết mạnh ,có 30

ã cơm ng ng kÕt cã h×nh nhƯn

• - L+++ : ng ng kÕt võa , cã 20-30 côm

• - L++ :ng ng kÕt yÕu cã 6-12 cơm • ng ng kÕt , cã nhiỊu XK tự do.

ãPhản ứng d ơng tính :

ãTừ mức L+++ trở lên

ãKhi thấy vi tr êng xt hiƯn tõ 20 - 30 cơm ng ng kết có hình

ãChủng xoắn khuẩn t ơng ứng ô từ mức L+++ tạm coi

chủng gây bệnh vật

ãPha loÃng huyết thêm vài hiệu giá làm lại với

chng ó cú ng ng kết để xác định xác có t ợng ng ng kết chéo

•Với bị , lợn ,chó hiệu giá kháng thể đạt từ1/400 trở lên

chủng XK đ ợc coi chủng gây bệnh

•Víi ngùa :

12 chñng Leptospira

12 chñng Leptospira

(Bộ môn:

(Bộ môn: huyết - Trung tâm chẩn đoán Thú y) huyết - Trung tâm chẩn ®o¸n Thó y)

1 L australis 7 L icterohaemorrhagiae

2 L autumnalis + 8 L javanica L bataviae L pomona

4 L canicola +10 L sejroe hardjo bovis L grippotyphosa 11 L sejroe saxkoebing

Ph¶n øng ng ng kÕt d ơng tính

Phản ứng ng ng kết d ơng tính kính hiển vi tụ quang đen

Phản ứng ng ng kết âm tính

Phản ứng ng ng kết ©m tÝnh trªn kÝnh hiĨn vi tơ quang nỊn đen

ãCó thể dùng phản øng :

- Ng ng kÕt víi KN chết phiến kính - Phản ứng két hợp bổ thể

- Phản ứng miễn dịch hùynh quang

Xoắn khuẩn KHV có tụ quang đen

Leptospira hardjo Leptospira hardjo

ãPhòng bệnh

ãVệ sinh phòng bệnh ã Khi ch a có dịch

ã- Chm súc chu ỏo, m bo phần đầy đủ trì

chế v sinh u n

ãHàng ngày phải dọn vệ sinh máng ăn chuột có

thể đến ăn thức ăn mầm bệnh

•- Thực thật tốt chế độ tiêm phịng vacxin.

•- TÝch cùc diƯt cht, phát quang bụi rậm, khai thông cống

rónh để hạn chế nơi chuột c trú

•- Dïng phản ứng huyết học phát sớm

•Khi cã bƯnh

• - Phải chẩn đoán xác, khai báo dịch kịp thời.

ã - Không bán chạy nhập gia súc có dịch. ã - Những gia súc mắc bệnh nặng nên giết

ã - Những bị nhẹ hay chung đụng với ốm phải cách ly điều trị

tÝch cùc

ã - Tiêm phòng cho gia súc khỏe vùng dịch xung quanh vùng

dịch

• - Gia súc chết phải chơn sâu, kỹ thuật, không mổ thịt súc vật bừa

b·i

• - Phân rác, chất độn chuồng gia súc ốm, chết phải tiêu độc kỹ

Chuồng trại phải tẩy uế, sát trùng

ã Với ng êi:

• Cần trang bị đầy đủ ph ơng tiện phòng hộ lao động nh quần, áo, ng,

ã Tiêm phòng vacxin

•HiƯn vacxin dïng cho gia sóc ë n ớc ta vacxin chết ã Vacxin có chứa serotyp Leptospira

Lợn con: Lần 1: 2ml

Lần 2: 3ml

Lợn lớn: LÇn 1: 3ml

LÇn 2: 5ml

– Trâu bò: Lần 1: 5ml

Lần 2: 10ml

Tiêm d ới da, lần cách lần ngày, miẽn dịch đ ợc tháng

ãNgoài lợn có vacxin đa giá ngoại nhập Farrowsure B

ã Điều trị

ã Phải tiến hành điều trị sớm.

• Với gia súc bị bệnh nặng khơng nên điều trị mà diệt để tránh lây

nhiƠm.

• Những gia súc có tiên l ợng tốt dùng phác đồ sau: • - Thuốc kháng sinh:

• + Penicillin G víi liỊu 30000 UI - 25000 UI/kg thĨ träng tiªm bắp thịt. ã +Nên kết hợp với Streptomycin liỊu 20 mg/kg thĨ träng, liƯu tr×nh -

ngày.

ã Ngoài ra, số kháng sinh kh¸c cịng cã t¸c dơng nh : Ampicillin,

Amoxicillin, Tetraxyclin, Erythromycine, Cephalosporine.

• - KÕt hợp với thuốc trợ sức nh :

• Cafein, vitamin B1, vitamin C, vitamin K, vitamin B12.