Tách chiết phân lập cephalotaxine và homoharringtonine từ cây cephalotaxus

Tách chiết, phân lập Cephalotaxine Homoharringtonine từ Cephalotaxus Trịnh Thái Hà Trường Đại học Khoa học Tư nhiên Luận văn ThS Chuyên ngành: Hóa hữu cơ; Mã số: 60 44 01 14 Người hướng dẫn: GS.TSKH Lưu Văn Bôi Năm bảo vệ: 2013 Abstract: Nghiên cứu nhằm mục đích để tách chiết, phân lập cephalotaxine homoharingtonine từ Cephalotaxus harringtonia cách sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký cột phương pháp phân tích đại HPLC Thứ nhất, nghiên cứu để đưa quy trình tách chiết alkaloid thơ làm giàu chất có hoạt tính sinh học từ Cephalotaxus harringtonia Thứ hai, nghiên cứu để đưa chương trình HPLC để tách hiệu homoharringtonine cephalotaxine mẫu thực vật Thứ ba, nghiên cứu để định lượng hàm lượng alkaloid nói thành phần Cephalotaxus harringtonia Keywords: Hóa hữu cơ; Hoạt tính sinh học; Thực vật Content MỞ ĐẦU Cephalotaxaceae họ loài kim, với chi khoảng 20 loài Cephalotaxaceae phân bố nhiều nước Đông Á, Nhật Bản, Trung Quốc, Việt Nam, Thái Lan , Theo Sách đỏ Việt Nam, loài Cephalotaxaceae thường tìm thấy Việt Nam lâu năm, phân bố chủ yếu khu vực miền núi tỉnh Hà Tây (Ba Vì), Thanh Hóa (Lũng Văn), … Các nghiên cứu toàn giới số alkaloid có hoạt tính chống ung thư tìm thấy thuộc họ này, Cephalotaxus harringtonia, Cephalotaxus hainanensis, Cephalotaxus wilsoniana Cephalotaxine chất đứng đầu nhóm alkaloid chiết xuất từ Cephalotaxus, phân lập từ Cephalotaxus harringtonia Nhóm quan tâm nhờ có hoạt tính sinh học đa dạng chống lại bệnh bạch cầu, kháng u HIV Các alkaloid tách từ Cephalotaxus, homoharringtonine isohomo-harringtonine, chứng minh có tính chất ức chế khởi đầu trình tổng hợp protein Bên cạnh đó, homoharringtonine nghiên cứu điều trị bệnh sốt rét nhãn khoa Một số quy trình tổng hợp hợp chất đưa ra, nhiên, chúng có nhược điểm bao gồm nhiều bước hiệu suất thấp Do đó, việc tách chiết phân lập hoạt chất nói từ nguyên liệu thực vật bán tổng hợp có ý nghĩa khoa học thực tiễn quan trọng Nghiên cứu nhằm mục đích để tách chiết, phân lập cephalotaxine homoharingtonine từ Cephalotaxus harringtonia cách sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký cột phương pháp phân tích đại HPLC Thứ nhất, nghiên cứu để đưa quy trình tách chiết alkaloid thơ làm giàu chất có hoạt tính sinh học từ Cephalotaxus harringtonia Thứ hai, nghiên cứu để đưa chương trình HPLC để tách hiệu homoharringtonine cephalotaxine mẫu thực vật Thứ ba, nghiên cứu để định lượng hàm lượng alkaloid nói thành phần Cephalotaxus harringtonia Luận văn hoàn thành Phịng thí nghiệm Hóa học hữu III, Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội khoa Công nghệ hóa học, Trường Đại học Osaka Prefecture Nhật Bản) Cơng trình hỗ trợ kinh phí từ đề tài Nghị định thư Việt – Pháp, mã số 42/2011/HĐ-NĐT Bộ KH&CN References Tiếng Việt Đặng Trường, Phan Văn Thăng (2012), “Phát quần thể kim quý Khu BTTN Xuân Nha”, (http://www.thiennhien.net/2012/12/31/phat-hien-quan-the-cay-la-kimquy-hiem-o-khu-bttn-xuan-nha/) Lê Trần Chấn, Trần Ngọc Ninh (2008), “Thêm hai loài thực vật quý lần phát xã Thài Phìn Tủng (huyện Đồng Văn, tỉnh Hà Giang)”, (http://dongvan.apps.vn/a/news?t=71&id=1010278) Lưu Tường Bách (2012), “Một số thông tin dự án Xác lập khu bảo tồn loài hạt trần quý xã Nam Động, huyện Quan Hóa”, (http://vienbaovecongtrinh.vn/vi-Vn/Tintuc/15789/Mot-so-thong-tin-ve-du-an-Xac-lap-khu-bao-ton-loai/ 221.html) Nguyễn Tiến Hiệp, Phan Kế Lộc, Nguyễn Đức Tố Lưu et al (2008), “Thông Việt Nam, nghiên cứu trạng bảo tồn”, (http://botanyvn.com/cnt.asp? param=news&newsid=802) Sách đỏ Việt Nam (Phần II thực vật)(2007), NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Hà Nội, tr 497 Trịnh Duy Hưng (2011), “Phát quần thể hạt trần quý hiếm”, (http://www.vietnamplus.vn/phat-hien-duoc-quan-the-cay-hat-tran-quy-hiem/ 113314.vnp) Website Bộ Tài nguyên Mơi trường (2013), “Sơn La: Phát lồi q khu vực rừng chân núi Pha Luông”, (http://www.monre.gov.vn/v35/default.aspx?tabid=428&CateID=24&ID=124223&Code=N ESB124223) Tiếng Anh Aweinreb, S (1975), “Total synthesis of (±)-cephalotaxine”, J Am Chem Soc., 97, 276281 Awitman Gary (1952), “Behavior of alkaloid salt solutions on aluminum oxide columns”, Arch Pharm Ber Dtsch Pharm Ges., 22(9), 422-38 10 Arboretum de Villardebelle, Cephalotaxus fortunei Gallery, (http://www.pine tum.org /sp/CPfortunei.htm) 11 Baaske D M., Heinstein P (1977), “Cytotoxicity and cell cycle specificity of homoharringtonine”, Antimicrob Agents Chemother, 12, 298 – 300 12 Batey, R.A., Simoncic, P.D., Lin, D., Smyj, R P., Lough, A J (1999), Chem Comm, 651652 13 Choi, Y H., Yoo, K P , Kim, J (2003), “HPLC-electrospray ionization-MS-MS analysis of Cephalotaxus harringtonia leaves and enhancement of the extraction efficiency of alkaloids therein by SFE”, J Chromatogr Sci., 41(2), 67-72 14 Fanon, A., Page, C., and Schellvis, N (1993), “A preliminary world list of threatened conifer taxa”, Biodiversity and Conservation, 2, 304-326 15 Hagop, M., Kantarjian, M D et al (2001), “Homoharringtonin: History, current research, and future directions”, Cancer, 92, 6, 1591–1605 16 Jalil Miah, M A., Tomas Hudlicky, Josephine Reed, W (1998), "Cephalotaxus Alkaloids", The alkaloids, 51, 199-264 17 Jian-Yuan Zhou, Dan-Lin Chen, Ze-Shuang Shen, et al (1990), “Effect of Homoharringtonine on Proliferation and Differentiation of Human Leukemic Cells in Vitro”, Cancer Res., 50, 2031-2035 18 Kenji Kywayama, Jenji Tsujikawa, Hajime Miyaguchi et al (2005), “Effects of the various preparation procedures of Dragendorff reagent on sensitivity for thin layer chromatography”, Japanese Journal of forensic science and technology, 10(2), 127-133 19 Lou Yinjun, Jin Jie, Xu Weilai, and Tong Xiangming (2004), “Homoharringtonin Mediates Myeloid Cell Apoptosis via Upregulation of Pro-apoptotic bax and Inducing Caspase-3Mediated Cleavage of Poly(ADP-ribose) Polymerase (PARP)”, American Journal of Hematology, 76, 199–204 20 Neidhart, J.A., Young, D.C., Kraut, E., et al (1986), “Phase I trial of homoharringtonin administered by prolonged continuou s infusion”, Cancer Res, 46, 967–969 21 O’Brien, S., Kantarjian, H., Keating, M., et al (1995), “Homoharringtonin therapy induces responses in patients with chronic myelogenous leukemia in late chronic phase”, Blood, 86, 3322 – 3326 22 Powell, R G., Weisleder, D., and Smith, C R (1972), “Antitumor alkaloids from Cephalotaxus harringtonia: Structure and activity”, Journal of Pharmaceutical Science, 61(8), 1227-1230 23 Powell, R.G., Weisleder, D., Smith, C.R., and Wolff, I A (1959), “Harringtonine, a tumorinhibiting alkaloid from Cephalotaxus harringtonia”, Abstracts of papers, 158th National ACS Meeting, New York 24 Richard Powell G et al (1974), “Isolation of antitumor alkaloids form Cephalotaxus harringtonia”, Ind Eng Chem Prod Res Dev., 13 (2), 129–132 25 Siebold, P F and Zuccarini, J G (1870), “Cephalotaxus, Flora Japonica (Volume Secundum)”, In horto sieboldiano acclimatationis dicto, Lugduni Batavorum, 66-67 26 Tripp, K E (1995), “Cephalotaxus: The Plum Yews”, Arnoldia, 55, 25–39 27 Wang, D Z., Ma, G E., Xu, R S (1992), “Studies on the alkaloids of Cephalotaxus IX Semi-synthesis of cephalotaxin esters and their anti-leukemic activity”, Yao Xue Xue Bao, 27(3), 178-84 28 Whaun, J M., Brown, N D (1990), “Treatment of chloroquine-resistant malaria with esters of cephalotaxine: homoharringtonine”, Ann Trop Med Parasitol, 84(3), 229-37 29 Wikipedia, Acid-base extraction, (http://en.wikipedia.org/wiki/Acid-base_ extraction) 30 Won-Kyo Kim, Hee-Jeong Chae, and Jin-Hyun Kim (2010), “Microwave-assisted extraction of homoharringtonine from Cephalotaxus koreana”, Bioteachnology and Bioprocess Engineering, 15, 481-487 31 Xue-Dong Lang, Jian-Rong Su, Shu-Gang Lu & Zhi-Jun Zhang (2013), “A taxonomic revision of the genus Cephalotaxus (Taxaceae)”, Phytotaxa, 84(1), 1-24 32 Yi-He Ling, Michael T Tseng and James I Harty (1989), “Effects of Homoharringtonin on Protein Glycosylation in Human Bladder Carcinoma Cell T-24”, Cancer Res., 49, 76-80 33 Zhong, S B., Liu, W C., Li, R L., Ling, Y Z., Li, C H., Tu, G Z., Ma, L B., Hong, S L (1994), “Studies on semi-synthesis of cephalotaxin esters and correlation of their structures with antitumor activity”, Yao Xue Xue Bao, 29(1), 33-38  ... thấp Do đó, việc tách chiết phân lập hoạt chất nói từ nguyên liệu thực vật bán tổng hợp có ý nghĩa khoa học thực tiễn quan trọng Nghiên cứu nhằm mục đích để tách chiết, phân lập cephalotaxine homoharingtonine.. .Cephalotaxine chất đứng đầu nhóm alkaloid chiết xuất từ Cephalotaxus, phân lập từ Cephalotaxus harringtonia Nhóm quan tâm nhờ có hoạt tính... cầu, kháng u HIV Các alkaloid tách từ Cephalotaxus, homoharringtonine isohomo-harringtonine, chứng minh có tính chất ức chế khởi đầu trình tổng hợp protein Bên cạnh đó, homoharringtonine nghiên cứu