Theo Dõi Hoạt Lực Tỉnh Trùng Theo Thời Gian Tồn Trữ Với Các Môi Trường BTS, Butschwiler Và Modena

TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG PH M H NG NHU THEO DÕI HO T L C TINH TRÙNG THEO TH I GIAN T N TR V I CÁC MÔI TR NG: BTS, BUTSCHWILER VÀ MODENA T I M T C S T NHÂN THU C THÀNH PH C N TH Lu n v n t t nghi p Ngành: BÁC S THÚ Y C n Th , 2010 TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG Lu n v n t t nghi p Ngành: BÁC S THÚ Y Tên tài: THEO DÕI HO T L C TINH TRÙNG THEO TH I GIAN T N TR V I CÁC MÔI TR NG: BTS, BUTSCHWILER VÀ MODENA T I M T S T NHÂN THU C THÀNH PH C N TH Giáo viên h ng d n: Sinh viên th c hi n: ThS Lê Hoàng S Ph m H ng Nhu Mssv: 3064533 p: Thú Y K32 C n Th , 2010 i TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG tài: Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng: BTS, Butschwiler Modena t i m t c s t nhân thu c Thành Ph C n Th ; sinh viên th c hi n: Ph m H ng Nhu hi n t i tr i gi ng Hoàng S , 1/12A ng 3/2, P.H ng L i, Q Ninh Ki u, Tp C n Th t tháng 09 n m 2010 n tháng 12 n m 2010 C n Th , ngày…tháng…n m 2010 C n Th , ngày…tháng…n m 2010 Duy t B môn Duy t Giáo viên h C n Th , ngày … tháng … n m 2010 Duy t khoa Nông Nghi p & Sinh H c ii ng D ng ng d n IC MT Xin g i l i c m t bi t n sâu s c n: Quý Th y Cô khoa Nông Nghi p Sinh H c su t th i gian theo h c t i tr ng Th y Lê Hoàng S lu n v n l i ã t n tình giúp h Ch tr i gi ng n i th c hi n th c hi n tài ng D ng gi ng d y tơi ng d n tài ã t o tơi hồn thành u ki n thu n Xin chân thành c m t C n Th , ngày tháng n m 2010 Ph m H ng Nhu iii CL C Trang TRANG T A i TRANG DUY T .ii L I C M T iii M C L C iv DANH SÁCH B NG vi DANH SÁCH HÌNH vii TÓM L C viii Ch ng 1: TV N Ch ng 2: S LÝ LU N 2.1 Sinh lý sinh s n heo c 2.1.1 Gi i ph u c quan sinh d c c a heo c 2.1.2 Thành ph n tinh d ch 2.1.3 c tính sinh hóa h c c a tinh 2.1.4 c tính sinh lý h c c a tinh trùng 2.2 ánh giá ph m ch t tinh d ch 2.2.1 ánh giá b ng m t t ng 2.2.2 ánh giá qua kính hi m vi 2.3 Môi tr ng pha loãng tinh d ch 11 2.3.1 Mơi tr ng có ngu n g c t ch t h u c t nhiên 11 2.3.2 Ngu n g c t hóa ch t làm c s 12 2.3.3 M t s yêu c u môi tr ng dùng pha loãng b o qu n tinh d ch 12 2.3.4 K thu t pha loãng tinh d ch 13 2.4 B o qu n t n tr tinh d ch 15 2.5 M t s y u t nh h ng n k t qu t n tr tinh d ch 15 2.5.1 nh h ng c a ch t l ng tinh d ch 15 2.5.2 nh h ng c a nhi t 15 2.5.3 nh h ng c a ánh sáng 16 2.5.4 nh h ng c a th i gian b o t n 16 2.6 Tình hình nghiên c u n iv c 16 2.6.1 Tình hình nghiên c u n c 16 2.6.2 Tình hình nghiên c u ngồi n c 17 Ch ng 3: PH 3.1 Ph NG TI N VÀ PH NG PHÁP THÍ NGHI M 18 ng ti n ti n hành thí nghi m 18 3.1.1 Th i gian 18 3.1.2 a m 18 3.1.3 it ng thí nghi m 18 3.1.4 D ng c 18 3.1.5 Hóa ch t 19 3.2 Ph ng pháp ti n hành thí nghi m 21 3.2.1 Ti n hành cân pha môi tr 3.2.2 Theo dõi n ng ng 21 tinh trùng m t li u gieo 21 3.2.3 Theo dõi th i gian t n tr tinh d ch ho t l c 50% 22 3.3 Ph Ch ng pháp thu th p x lý s li u 23 ng 4: K T QU TH O LU N 24 4.1 K thu t l y pha loãng tinh d ch 24 4.1.1 K thu t pha môi tr ng giá thành môi tr ng pha loãng 24 4.1.2 K thu t pha loãng tinh d ch t o li u gieo 25 4.2 K thu t l y b o qu n tinh d ch 26 4.3 K t qu theo dõi n ng tinh trùng m t li u gieo 27 4.4 K t qu theo dõi th i gian t n tr tinh d ch ho t l c 50% 28 Ch ng 5: K T LU N VÀ NGH 30 5.1 K t lu n 30 5.2 ngh 30 TÀI LI U THAM KH O 31 PH CH NG 32 v DANH SÁCH B NG ng Thang m ánh giá ho t l c c a tinh trùng 10 ng Các ch tiêu v ch t l ng tinh d ch 11 ng Công th c c a môi tr ng BTS 19 ng Công th c c a môi tr ng Modena 20 ng Công th c c a môi tr ng Butschwiler 20 ng Thành ph n hóa ch t c a mơi tr ng L ng pha lỗng 21 ng tinh trùng li u gieo 27 ng Th i gian t n tr tinh d ch n ho t l c 50% 150C 28 ng Th i gian t n tr tinh d ch n ho t l c 50% 50C 28 vi DANH SÁCH HÌNH Hình L c tinh d ch 32 Hình Làm m mơi tr Hình Rót mơi tr ng .32 ng vào tinh d ch 33 Hình T mát tr tinh 150C 33 Hình T mát tr tinh 150C 34 Hình Làm m mơi tr ng tr c ki m tra t5 .34 Hình Ki m tra ho t l c 50% 35 Hình Bu ng m h ng c u 35 vii TÓM L C Theo u c u c s mu n tìm mơi tr ng pha lỗng tinh d ch có th i gian t n tr phù h p v i u ki n s n xu t mang l i hi u qu kinh t cao i u r t c n thi t T ó chúng tơi th c hi n tài: “Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng: BTS, Butschwiler Modena t i m t s t nhân thu c Thành Ph C n Th ” Thơng qua q trình thí nghi m th c t tr c ti p tham gia vào quy trình theo dõi th i gian t n tr tinh d ch tr i ghi nhân c k t qu nh sau: Th i gian t n tr tinh d ch gi a môi tr Butschwiler t ng ng ng Modena môi tr B o qu n 0C + Môi tr ng Butschwiler trung bình là: 117.6 ± 3.27 gi + Mơi tr ng Modena trung bình là: 116.1 ± 3.21 gi B o qu n 150C + Mơi tr ng Butschwiler trung bình là: 105.8 ± 2.81 gi + Mơi tr ng Modena trung bình là: 103.9 ± 2.45 gi + Môi tr ng BTS trung bình là: 39.4 ± 1.3 gi viii ng Ch ng TV N Trong ch n ni gieo tinh nhân t o mang l i nhi u u i m nh : tinh trùng c gi bên c th c lâu h n, gi m t l ch n ni c/cái, c n c gi ng nên có i u ki n ch n l c c gi ng t t nh t cho s n xu t tinh gi m chi phí giá thành ch n nuôi, h n ch c b nh truy n nhi m lây qua ng giao ph i c bi t có th v n chuy n tinh d ch i xa d dàng Trong gieo tinh nhân t o, mơi tr ng pha lỗng tinh d ch m t y u t h t s c quan tr ng nh ng n th i gian t n tr tinh d ch, t l th thai, u ki n b o qu n v n chuy n tinh d ch Vì th mà vi c l a ch n môi tr ng pha loãng tinh d ch phù h p em l i hi u qu cao gieo tinh nhân t o r t c n thi t Hi n nay, th tr ng có nhi u mơi tr ng pha loãng tinh d ch, nh ng làm th tìm mơi tr ng thích h p pha loãng tinh d ch heo v a kéo dài c th i gian b o qu n, tinh trùng s c s ng t t, m b o c t l th thai giá thành h p lý r t quan tr ng B t ngu n t nh ng v n c s h ng d n c a th y Lê Hoàng S theo yêu c u c s c phân công th c hi n tài: “Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng: BTS, Butschwiler Modena t i m t c s t nhân thu c Thành Ph C n Th ” M c tiêu tài: Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr Butschwiler Modena i u ki n có c a c s v i môi tr ng: BTS, Cách ti n hành ki m tra t5: Rót tinh d ch t n tr l tinh c b o qu n nhi t 50C 150C vào m t l thu tinh (15ml), t l vào n c m 38 – 40 0C kho ng phút, l y gi t tinh d ch l nh lên lame kính r i t vào kính hi n vi quan sát ho t l c c a tinh trùng Th i gian c n kh o sát th i gian sau pha tinh xong tinh trùng 50% M i th i m ki m tra tinh (h s gi m ho t l c) 3.3 P u ghi k t qu theo dõi di n bi n c a m u ng pháp thu th p s lý s li u - S li u c thu th p t q trình thí nghi m - X lý s li u b ng ph ng pháp th ng kê mô t 23 n ho t l c Ch ng T QU TH O LU N 4.1 K thu t l y pha lỗng tinh d ch tr i s d ng mơi tr ng BTS pha loãng tinh d ch, tr i mua hóa ch t t cân theo cơng th c c a môi tr ng BTS (b ng 3) 4.1.1 K thu t pha môi tr ng giá thành môi tr 4.1.1.1 K thu t pha môi tr ng thu t pha môi tr ng (môi tr ng lít) tr i ng pha lỗng thu t pha mơi tr ng tr (mơi tr ng lít) c ây Theo L Minh Tám (1998) un sơi lít n c c t Glucose 10 phút un sơi 0.25 lít n c c t Glucose Thêm 0.25 lít n c c t nhi t v a hịa tan hóa ch t cịn l i (C6H5Na3O7, EDTA, nhi t h xu ng 50 – 600C thêm hóa ch t cịn l i (C6H5Na3O7, EDTA, NaHCO3, KCl) NaHCO3, KCl) Thêm 0.5 lít n c c t l i, cho ti p kháng sinh vào (Peniciline streptomycine) i nhi t h xu ng 35 – 360C Cho ti p kháng sinh vào ( Peniciline Streptomycine) B o qu n n i mát tránh ánh sáng tr c ti p B o qu n l th y tinh có n p y kín nhi t 15 – 180C So v i k thu t pha mơi tr ng tr c ây k thu t pha mơi tr ng tr i có trình t pha n gi n, d th c hi n, ti t ki m th i gian, không l thu c nhi u vào d ng c o 24 Môi tr ng sau pha c b o qu n u ki n khô, mát Khi ti n hành pha tinh mơi tr ng c tr c ti p pha loãng tinh d ch c n nâng nhi t môi tr ng lên t ng ng nhi t tinh d ch 4.1.1.2 Giá thành mơi tr ng pha lỗng Mơi tr ng BTS có giá th p nh t 7500 ng môi tr ng cao h n h t môi tr ng Butschwiler 18500 ng ng Modena 17000 1.2 K thu t pha loãng tinh d ch t o li u gieo Pha loãng tinh d ch v i môi tr ng Tinh d ch sau khai thác thu t pha loãng tinh d ch c a tr i n phòng pha ch Theo trình t : thu t pha lỗng tinh d ch tr c ây Theo L Minh Tám (1998) L c xu xoa L c b xu xoa ánh giá s b b ng m t, ki m tra ho t l c tr c pha môi tr ng Ki m tra ch tiêu V,A,C Và tính b i s pha lỗng (BSPL) Rót t t mơi tr ng vào chai tinh m t l ng t ng ng v i tinh d ch Sau ó ti p t c rót mơi tr ng vào chai tinh v a 500ml Nâng nhi t môi tr ng ng ng v i nhi t c a tinh d ch 36 – 370C Rót t t mơi tr ng vào tinh d ch, úng th tích theo úng BSPL Phân li u vào l nh a th y tinh 100ml theo ph ng pháp c l ng c a c s Phân li u vào l nh a 80ml theo b i s pha loãng Ki m tra ho t l c n ng sau pha Ki m tra ho t l c óng nút dán nhãn cho vào t tr tinh óng nút dán nhãn cho vào t tr tinh 25 V i ph ng pháp pha loãng tinh d ch tr c ây tr c, t o m t li u tinh t chu n c n ph i xác nh c n ng , th tích ho t l c ban u c a tinh d ch tính b i s pha loãng c a tinh d ch Khi pha loãng tinh d ch ph i nâng nhi t môi tr ng lên t ng ng v i nhi t tinh d ch So v i quy trình tr c ây ph ng pháp pha loãng tinh d ch tr i có nh ng u i m sau: - Ti t ki m th i gian - Không l thu c d ng c cân, o, ong, - B t ch p n ng th tích ban m u áp d ng ph ng pháp òi h i ng i th c hi n ph i ki m tra xác qua d ng c o, m tr c Sau nhi u l n m i kinh nghi m pha c l ng v i n ng t theo yêu c u 4.2 K thu t l y b o qu n tinh d ch Tinh d ch sau pha lỗng v i mơi tr ng Modena Butschwiler c 0 b o qu n t l nh nhi t C 15 C Riêng môi tr ng BTS ch b o qu n 15 C Theo nguy n T n Anh Nguy n T n t (1997), th i gian s ng c a tinh trùng bên c th t l ngh ch v i nhi t c a môi tr ng xung quanh Vi c t n tr tinh d ch nh m kéo dài th i gian s d ng tinh d ch Khi t n tr thành công kh n ng s ng c a tinh trùng lâu bên c th ng v t, ph ng pháp gieo tinh nhân t o c ng d ng r ng rãi h n Vi c t n tr tinh d ch cho phép có th d n tinh cho gia súc b t c th i m n m, h n n a có th v n chuy n tinh d ch xa h n d n tinh cho gia súc 26 4.3 K t qu theo dõi n ng tinh trùng m t li u gieo K t qu trung bình c a m t li u gieo c l ng ng L c pha t i tr i theo ph ng pháp pha ng tinh trùng li u gieo (109/100ml) Gi ng heo m u ng Landrace 11 3.2 ± 0.092 Yorkshire 31 3.3 ± 0.125 Duroc 11 3.6 ± 0.144 Pietrain 11 3.2 ± 0.094 Pi – Du 19 3.3 ± 0.117 3.3 ± 0.155 Trung bình V i ph ng pháp pha c l ng có u i m pha nhanh, ti t ki m th i gian, không ph thu c vào d ng c cân, o, ong, m c Theo Nguy n Thi n, Nguy n T n Anh, H u Loan (2006), m c pha loãng tinh d ch ph thu c vào ph m ch t tinh d ch Vì v y m c pha lỗng có th thay i theo m i l n l y tinh, m t yêu c u i v i li u d n tinh cho heo n i c n 0,5 – 1t , v i heo lai c n 1- 1,5 t heo ngo i 1,5 - t tinh trùng/m t li u gieo ng Tuy nhiên ph ng pháp pha c l ng mang tính ch quan v y ịi h i i pha ph i có kinh nghi m m i pha c li u tinh có n ng t yêu c u 27 4.4 K t qu theo dõi th i gian t n tr tinh d ch ho t l c 50% ng Th i gian t n tr tinh d ch Môi tr ng n ho t l c 50% 150C BTS t5(gi ) Butschwiler t5(gi ) Modena t5 (gi ) Landrace 39.9 ± 0.97 107.5 ± 2.71 105.2 ± 2.34 Yorkshire 39.4 ± 1.44 106.05 ± 2.58 104.75 ± 2.38 Duroc 39.4 ± 1.57 105.9 ± 2.79 103.9 ± 2.49 Pietrain 38.7 ± 1.51 103.6 ± 2.21 102.4 ± 2.13 Pi - Du 38.9 ± 1.02 104.8 ± 2.28 102.75 ± 2.25 Trung bình 39.4 ± 1.3 105.8 ± 2.81 103.9 ± 2.45 Gi ng heo Qua trình kh o sát th i gian t n tr tinh d ch ho t l c 50% t i tr i v i 75 m u tinh c quan sát mơi tr ng BTS có th i gian t n tr trung bình 39.4 ± 1.3 gi Cịn i v i mơi tr ng Butschwiler Modena qua kh o sát 60 m u i v i t ng mơi tr ng có th i gian t n tr trung bình l n l t 105.8 ± 2.81 gi 103.9 ± 2.45 gi Trong i u ki n b o qu n 150C ng Th i gian t n tr tinh d ch Môi tr ng n ho t l c 50% 50C Butschwiler t5(gi ) Modena t5 (gi ) Landrace 119.1 ± 3.1 117.5 ± 2.9 Yorkshire 117.3 ± 3.44 116.1 ± 3.3 Duroc 117.8 ± 3.24 116.4 ± 3.23 Pietrain 116.3 ± 3.03 114.5 ± 3.09 Pi - Du 116.8 ± 3.27 115.4 ± 3.17 117.6 ± 3.27 116.1 ± 3.21 Gi ng heo Trung bình 28 Qua kh o sát 60 m u i t ng môi tr ng Butschwiler Modena i u ki n b o qu n 0C có th i gian t n tr trung bình l n l t 117.6 ± 3.27 gi 116.1 ± 3.21 gi Qua q trình t n tr i v i mơi tr ng Butschwiler Modena i u ki n C 15 C ta th y c môi tr ng thu c lo i môi tr ng t n tr dài ngày nhi t b o qu n 50C tinh trùng có th i gian s ng lâu h n so v i b o qu n 150C Th i gian t n tr tinh d ch gi a môi tr ng Butschwiler môi tr ng Modena c gi ng t ng gi ng nhi t có s chênh l ch nh ng khơng cao s chênh l ch khơng có ý ngh a th ng kê Theo Nguy n Thi n c Thà (1999), nhi t b o t n tinh pha lỗng thích h p nh t 15 – 18 C Tuy nhiên c n xem xét l i y u làm nh h ng th i gian t n tr tinh d ch nh n c c t pha môi tr ng, ch c a thành ph n hóa ch t dùng pha mơi tr ng cách b o qu n mơi tr lỗng 29 d ch ã t khác t l ng ng pha Ch ng T LU N VÀ NGH 5.1 K t lu n Qua trình theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng BTS, Butschwiler Modena t i tr i gi ng Hoàng S , 1/12A ng 3/2, P.H ng L i, Q Ninh Ki u, Tp C n Th k t lu n: Th i gian t n tr tinh d ch gi a môi tr ng Butschwiler môi tr ng Modena t ng ng nhau, c môi tr ng pha lỗng có th a vào s d ng gieo tinh nhân t o V i th i gian t n tr tinh trùng ho t l c cịn 50% 50C c a: - Mơi tr ng Butschwiler trung bình là: 117.6 ± 3.27 gi - Mơi tr ng Modena trung bình là: 116.1 ± 3.21 gi Th i gian t n tr tinh trùng ho t l c 50% 150C c a: - Mơi tr ng Butschwiler trung bình là: 105.8 ± 2.81 gi - Môi tr ng Modena trung bình là: 103.9 ± 2.45 gi - Mơi tr ng BTS trung bình là: 39.4 ± 1.3 gi Th i gian t n tr tinh d ch c a môi tr ng Butschwiler Modena t ng ng thu c môi tr ng t n tr dài ngày sau mơi tr ng BTS có th i gian t n tr th p thu c môi tr ng t n tr ng n ngày Môi tr ng t n tr 0C có th i gian dài h n t n tr 150C 5.2 ngh Môi tr ng Modena môi tr ng Butschwiler có th i gian t n tr t ng ng nh ng v giá thành mơi tr ng Modena có giá th p h n mơi tr ng Butschwiler Vì th tr i có th a mơi tr ng Modena vào quy trình s n xu t tinh tr i v a kéo dài th i gian t n tr v n chuy n tinh i xa v a h n ch c chi phí v n chuy n l ng tinh h y Tuy nhiên c ng c n s d ng môi tr ng BTS cho i u ki n v n chuy n g n mơi tr ng r h n mơi tr ng Modena Các hóa ch t mơi tr ng d tìm cách pha n gi n, ti t ki m c th i gian, c bi t b o qu n c u ki n khơ, mát r t phù h p v i vi c s n xu t tinh N u có u ki n tr i có th dùng hóa ch t tinh t thay cho hóa ch t cơng nghi p kéo dài th i gian t n tr , t ng hi u qu thu nh p 30 TÀI LI U THAM KH O c Thà, 2006 K thu t th tinh nhân t o v t nuôi Nhà xu t b n Lao ng – Xã i Lê Hồng S , 2006 Giáo trình gi ng d y môn Gieo Tinh Nhân T o B môn Thú Y Khoa Nông Nghi p SH D i H c C n Th L Minh Tám, 1998 K t qu s d ng môi tr Ph c Th t nh V nh Long Lu n v n t t nghi p ng BTS GUELPH t i tr i ch n nuôi i H c i H c C n Th Nguy n T n Anh, L u K , V Ng c Tý, súc gia c m Nhà xu t b n Lao ng – Xã H i c Thà, 2003 Th tinh nhân t o cho gia Nguy n T n Anh, Nguy n T n t, 1997 Th tinh nhân t o gia súc gia c m Nhà xu t n Nơng Nghi p, Thành ph H Chí Minh Nguy n T n Anh, Nguy n Duy Hoang, 1998 Sinh lý sinh s n gia súc Nhà xuât b n Nông Nghi p, Hà N i Nguy n Thi n, Nguy n T n Anh, H u Hoan, 2006 K thu t th tinh nhân t o cho heo Vi t Nam Nhà xu t b n Nông Nghi p, Hà N i Nguy n Thi n, c Thà, 1999 C m nang k thu t th tinh nhân t o gia súc gia m Nhà xu t b n Nông nghi p, Hà N i Tr n Nguyên Hùng 1997 Lu n án th c s Khoa Nông Nghi p i h c C n Th 10 Tr n Th Dân, 2004 Sinh s n heo nái sinh lý heo Nhà xu t b n Nông Nghi p, Hà N i 11 Tr n Ti n D ng, D ng ình Long, Nguy n V n Thanh, 2002 Sinh s n gia súc Nhà xu t b n Nông nghi p, Hà N i 31 PH CH NG Hình L c tinh d ch Hình Làm m mơi tr 32 ng Hình Rót mơi tr ng vào tinh d ch Hình T mát tr tinh 33 150C Hình T mát tr tinh Hình Làm m tinh d ch tr 34 50C c ki m tra t5 Hình Ki m tra ho t l c 50% Hình Bu ng 35 m h ng c u 36 Hình 11 D ng c h p l 37 ng tinh ... tài: ? ?Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng: BTS, Butschwiler Modena t i m t c s t nhân thu c Thành Ph C n Th ” M c tiêu tài: Theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian. .. NG Lu n v n t t nghi p Ngành: BÁC S THÚ Y Tên tài: THEO DÕI HO T L C TINH TRÙNG THEO TH I GIAN T N TR V I CÁC MÔI TR NG: BTS, BUTSCHWILER VÀ MODENA T I M T S T NHÂN THU C THÀNH PH C N TH Giáo... tr ng cách b o qu n mơi tr lỗng 29 d ch ã t khác t l ng ng pha Ch ng T LU N VÀ NGH 5.1 K t lu n Qua trình theo dõi ho t l c tinh trùng theo th i gian t n tr v i môi tr ng BTS, Butschwiler Modena